|
Xgam = số khuẩn lạc
đếm được x
|
1
|
x
|
1
|
|
khối lượng nuôi cấy
|
bội số pha loãng
mẫu thử
|
X100gam=100 x số khuẩn
lạc đếm x
1
x
1
khối lượng nuôi cấy
bội số pha loãng
mẫu thử
PHỤ
LỤC A
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
A1. Môi trường nước thịt: Theo phụ lục B TCVN
5153-90.
A2. Môi trường thạch deoxycholat:
- Pepton 10g
- Thạch 18-20g
- Natri deoxycholat 1g
- Natri clorua 5g
- Kalihydro phophat (K2HPO4) 2g
- Lactos 10g
- Sắt xitrat 2g
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
- Nước cất 1.000ml
A.3 Môi trường thạch macconkey
- Pepton 20g
- Thạch 18-20g
- Natri clorua 5g
- Lactos 10g
- Muối mật 5g
- Dung dịch cồn đỏ trung tính 0,1% 5ml
- Nước cất 1.000ml
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
A4. Môi trường nước pepton: Theo phụ lục B
TCVN 5153-90.
A5. Môi trường nước pepton-glucose: Theo phụ
lục B TCVN 5153-90
A6. Môi trường thạch Simmon-xitrat:
- Ammonium dihydrophotphat (NH4H2PO4) 1g
- Magiê - sulphat (MgSO4) 0,2g
- Kalihydro photphat (K2HPO4) 1g
- Natri xitrat (Na3C6H5O7.2H2O) 2,3g
- Natri clorua (NaCl) 5g
- Thạch 18-20g
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
- Xanh Brôm-thy-môn, dung dịch 0,5-1g
trong cồn (Bromthymol Blue) 10-20ml
Theo thứ tự lần lượt hoà tan các muối trong
nước, cho thạch vào và đun sôi, chỉnh pH 6,8 rồi cho tiếp dung dịch xanh
brôm-thy-môn. Lắc đều và lọc qua bông. Chia ra các ống nghiệm 10 x 100mm, mỗi
ống từ 3-5ml. Hấp 1210C trong 20 phút. Để ống nằm nghiêng cho môi
trường đông lại (môi trường có mầu xanh).
A7. Thuốc thử Indol: Theo phụ lục B TCVN
5153-90.
A8. Thuốc thử đỏ methil (Methyl red): Hoà tan
0,04g đỏ methyl trong 60ml cồn 950, sau cho thêm 40ml nước cất.
A9. Thuốc thử đỏ Voges-Proskauer: Theo phụ
lục B TCVN 5153-90.
PHỤ
LỤC B
KỸ
THUẬT ĐẾM VÀ TÍNH SỐ VI KHUẨN (KHUẨN LẠC).
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
B2. Các chọn đĩa môi trường để đếm.
B2.1. Chọn những đĩa khuẩn lạc mọc riêng
biệt, số lượng từ 30-300 vi khuẩn.
B2.2. Nếu 2 đậm độ pha loãng kế tiếp nhau có
cùng số đếm từ 30-300 thì lấy số đếm được ở từng đĩa nhân với bội số pha loãng,
so sánh tỷ lệ giữa hai giá trị, nếu nhỏ hơn 2 thì lấy số đếm bình quân của cả 2
giá trị. Nếu lớn hơn 2 thì lấy số có giá trị thấp.
B2.3. Nếu các đậm độ pha loãng đều có số đếm
trên 300 thì chọn đĩa môi trường có bột số phan loãng cao nhất.
B2.4. Nếu các đậm độ pha loãng đều có số đếm
ít hơn 30 thì chọn đĩa môi trường có bội số pha loãng thấp nhất.
B2.5. Cách tính lại số lượng vi khuẩn: Căn cứ
vào kết quả giám định 5 khuẩn lạc đại diện cho mỗi nhóm để tính lại số đếm
(B2). Nếu cả 5 đều dương tính thì nhóm đó được tính 100% dương tính, nếu có 3
dương tính thì chỉ được tính là 60% dương tính.
B4. Cách tính số vi khuẩn trong 1 gam và trên
100cm2 mẫu thử theo công thức:
X1g=số khuẩn lạc
đếm được X
1
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
1
khối lượng nuôi cấy
bội số pha loãng
mẫu thử
X100 cm2
=100 X
Số khuẩn lạc đếm
được X
1
x
1
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
bội số pha loãng
mẫu thử
4.1. Số khuẩn lạc đếm được là số lượng bình
quân trên 2 đĩa môi trường có cùng độ đậm pha loãng hoặc ở 2 độ pha loãng kế
tiếp nhau và đã được xác minh lại (B3).
B4.2. Trước khi tính cần làm tròn số đếm:
Dưới 10 thì làm tròn số hàng chục; dưới 5 thì lấy số hàng chục dưới, trên 5 thì
lấy tròn số hàng chục trên, trên 100 nếu số hàng đơn vị là 5 thì lấy số tròn
chia chẵn cho 20, các trường hợp khác thì lấy số tròn chia chẵn cho 10.
B4.3. Thí dụ và cách tính:
B4.3.1. Thí dụ: 1ml mẫu thử ở độ đậm pha
loãng 10-2 được cấy đều trên 2 đĩa môi trường. Đĩa 1 có 65 khuẩn lạc
gồm 55 điển hình và 10 không điển hình. Đĩa 2 có 85 khuẩn lạc gồm 82 điển hình
và 3 không điển hình.
B4.3.2. Cách tính:
- Tổng khuẩn lạc đếm được trên 2 đĩa: 150 gồm
137 điển hình và 13 không điển hình.
- Sau khi chọn và giám định lại 5 khuẩn lạc ở
mỗi nhóm thì thấy (giả thiết) cả 5 khuẩn lạc ở nhóm điển hình đều không dương
tính. Chiếm tỷ lệ 100% (5/5). Có 3 trong nhóm không điển hình dương tính chiếm
tỷ lệ 60% (3/5).
- Căn cứ vào tỷ trên, số khuẩn lạc được tính
lại như sau:
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
= 137 + 7,8
= 137 + 8 (số tròn)
= 145
= 140 (số làm tròn)
Số bình quân = 
=
70
x 1g = 70 x 
x
= 70 x 102
= 7 x 103
- Nếu tính số vi khuẩn trên 100cm2
diện tích mẫu thử cũng tính như trên rồi nhân với 100.