TIÊU CHUẨN VIỆT
NAM
TCVN
5147:1990
THỊT
VÀ SẢN PHẨM CỦA THỊT. PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG PENIXILIN
Meat and meat
products. Determination of penicillin residues
Tiêu chuẩn này quy
định phương pháp xác định tổng penicillin tồn dư trong thịt và sản phẩm của
thịt dùng làm thực phẩm cho người và thức ăn gia súc.
1
Đặc tính chung
Penicillin thuộc họ
kháng sinh, là chất hữu cơ có phân tử lượng lớn, tồn tại trong thịt và sản phẩm
của thịt với hàm lượng rất nhỏ. Họ penicillin gồm nhiều dẫn xuất như benzyl
penicillin, potasium penicillin, phenoxymethyl penicillin, ampycillin,
anhydrous, bezathyl penicillin G, procaine penicillin G, …v.v
2
Nguyên tắc
Ap dụng
phương pháp gián tiếp, dựa vào phản ứng tạo phức đặc trưng và hoàn toàn định
lượng của penicillin với thuốc thử phenaltrolin- cadimi sinh ra phức bền. Chiết
phức này bằng nitrobenzen và đo phổ hấp thụ nguyên tử của kim loại cadimi trong
phức ở tướng hữu cơ, hay phân hủy tướng hữu cơ, lấy cadimi vào axit clohydric,
dung dịch 1% và do phổ của caidimi.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Theo TCVN 4833 - 89 (
ST SEV 2433 - 80)
4
Dụng cụ, thiết bị và hoá chất
4.1 Dụng cụ, thiết
bị:
+ Máy phổ hấp thụ
nguyên tử SP - 9/800 hay loại tương đương.
+ Đèn catốt
rỗng của cadimi
+ Bếp đun
cách thủy
+ Máy xay
sinh tố
+ Bình định mức các
loại
+ Pipet các loại
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
+ Phễu chiết 250 ml.
+ Một số dụng cụ khác
4.2 Hóa chất:
Dùng loại tinh khiết
cao 99,99% hay tinh khiết quang phổ ( Specpure).
+ Thuốc thử
Tris ( 1,10 - Phenaltrolin) Cadimi
+ Dung môi
nitrobenzen ( C6H5NO2)
+ Dung dịch gốc tiêu
chuẩn của cadimi nồng độ 1mg/ ml
+ Axit nitric, dung
dịch 65%
+ Hydroperoxyt (H2O2)
dung dịch 30%
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
+ Nước cất 2 lần.
5
Chuẩn bị thử
5.1 Chuẩn bị mẫu phân
tích:
Mẫu thịt cần phân
tích được thái nhỏ, trộn đều, cân 1 lượng 10 g cho vào máy xay sinh tố. Thêm
vào 30 ml nước cất rồi cho máy chạy trong 5 phút. Cho toàn bộ huyễn dịch vào
cốc chịu nhiệt, điều chỉnh pH khoảng 5 - 6 rồi đun cách thủy ở 60 - 70 0
C trong 30 phút. Chuyển dung dịch này vào bình định mức và định mức bằng nước
cất đến thể tích 50 ml. Sau đó ly tâm lắng cặn, lấy 25 ml dịch nước trong cho
tác dụng với 1 lượng dư (15 lần) thuốc thử Tris (1,10 - Phenaltrolin) cadimi
(khoảng 10 ml). Lắc kỹ trong 10 phút, sau đó cho 5ml dung môi nitrobenzen và lắc
tiếp trong 30 phút. Để yên cho phân lớp hoàn toàn trong phễu chiết rồi tách lấy
phần dung môi hữu cơ chứa phức liên hợp ra. Tro hóa ướt dung dịch chiết này
bằng 30 ml axit nitric 65% và vài giọt hydropeoxyt 30% trong bình keldan đến
khi thu được dung dịch mẫu trong. Chuyển toàn bộ mẫu ra cốc chịu nhiệt và cô
cạn để đuổi axit. Sau đó thêm 5ml axit clohydric 1% vào cốc, chuyển dung dịch
này sang bình định mức và định mức bằng axit clohydric 1% đến thể tích 20 ml
rồi tiến hành xác định cadimi.
5.2 Pha dãy
chuẩn:
Dùng dung
dịch gốc tiêu chuẩn của cadimi nồng độ 1 mg/ml và axit clohydric 1% để pha
loãng. Tính lượng phù hợp để pha dãy chuẩn có nồng độ của cadimi là 0, 1 - 0,5
- 1,0 - 1,5 - 2,0 - 2,5 mg/ml trong bình định mức có thể tích 25 ml
5.3 Chuẩn bị
mẫu trắng:
Đồng thời
với việc chuẩn bị mẫu phân tích phải chuẩn bị thêm mẫu trắng để so sánh và bổ
chính nền. Mẫu trắng được chuẩn bị như mẫu phân tích nhưng không có mẫu phân
tích.
5.4 Các điều
kiện thực nghiệm:
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
+ Khe đo máy
AAS 0,5 nm
+ Burner: Loại khe
dài 10 cm
+ Cường độ đến catốt
rỗng : dùng 80% giá trị cực đại
+ Hỗn hợp khí: không
khí nén và axetylen 4,2/1,2 lít/ phút
+ Tốc độ dẫn
mẫu : 4, 5 - 5 ml / phút
+ Thời gian đo: 5 -
10 giây
+ Các điều kiện khác
chọn phù hợp với máy AAS
6
Tiến hành thử
+ Đặt các thông số đã
chọn ở mục 5.4 cho máy để đo cadimi
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
+ Đo phổ hấp
thụ của cadimi lần lượt từ các mẫu chuẩn, mẫu trắng. Rồi đến mẫu phân tích. Mỗi
mẫu đo 3 lần lấy giá trị là trung bình cộng của 3 lần thử đồng thời có sai lệch
giá trị không vượt quá 15%.
+ Hiệu chỉnh
giá trị của mẫu trắng (nếu có)
+ Dựng đường
chuẩn theo hệ tọa độ D -C. Trong đó D là cường độ của vạch phổ hấp thụ của
cadimi trong các mẫu chuẩn tương ứng với các nồng độ C của nó trong dãy chuẩn.
+ Xác định
nồng độ Cx của cadimi trong mẫu phân tích theo đường chuẩn trên.
7
Tính kết quả
Tổng hàm
lượng của cadimi trong mẫu phân tích được tính theo công thức sau
C - Cx .V ở
đây V = 20 ml và C tính bằng Mg
Sau khi xác
định được hàm lượng cadimi trong mẫu phân tích ta suy ra lượng penicillin theo
phản ứng sau:
Penicillin + Tris ( 1,10 - phenal trolin) Cd
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Theo thành
phần của phức liên hợp ta thấy rằng:
1 nguyên tử
cadimi tương ứng với 2 phân tử penicillin hay 112,4 g cadimi tương ứng với 2
mol penicillin hay 112,4 mg cadimi tương ứng với 2 mmol penicillin
Vậy 1 mg cadimi tương ứng
với 2/112,4 mmol
penicillin.
Do đó Cmg 2.C/112,4
mmol
Suy ra công thức tính
hàm lượng tổng penicillin là
G = 2.C/112,4.a
Tính bằng mmol/g
Chú thích
Nếu sau khi chiết
phức bằng nitrobenzen mà tiến hành đo ngay cadimi trong phức thì mẫu chuẩn cũng
phải chiết bằng nitrobenzen rồi mới đo.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
PHỤ
LỤC
1. Pha dung dịch gốc
tiêu chuẩn của cadimi nồng độ 1mg/ml; cân 1,1423g cadimi oxyt bột (Cd0), thêm
40 ml axit nitric 6M, đun nhẹ cho tan hết, để nguội rồi định mức bằng nước cất
đến 1 lít. Dung dịch này gọi là dung dịch A.
2. Dung dịch cadimi
nồng độ 10mg/ml; lấy 1 ml dung
dịch A, pha loãng và định mức bằng axit nitri 1% đến 100ml. Dung dịch này gọi
là dung dịch B.
3. Dung dịch cadimi
nồng độ 0,1 mg/ml: lấy 1 ml dung
dịch B, pha loãng và định mức bằng axit nitric 1% đến thể tích 100ml.