Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8161:2009 thực phẩm - Xác định patulin trong nước táo trong, nước táo đục

8.2. Các điều kiện vận hành của HPLC

Khi sử dụng cột quy định trong 5.11 và pha động quy định trong 4.11, thì cài đặt như sau là thích hợp:

Tốc độ dòng của pha động (cột): 1,0 ml/min;

Bước sóng của detector UV: 276 nm;

Thể tích bơm: 50 ml.

9. Tính kết quả

Đọc từ đường chuẩn khối lượng patulin trong dung dịch mẫu thử đã bơm lên cột HPLC, bằng nanogam. Tính phần khối lượng patulin, w_PAT, bằng nanogam trên mililit (hoặc gam đối với puree) theo công thức (2):

                             (2)

Trong đó:

...

...

...

V₂ là thể tích phần dung dịch thử (6.4) được bơm lên cột, tính bằng mililit (ml);

V₁ là thể tích dung dịch mẫu thử (6.4), (V₁ = 1,0 ml đối với nước táo, V₁ = 0,5ml đối với puree) tính bằng mililit (ml);

M_s là thể tích mẫu được chiết, tính bằng mililit đối với nước táo (m_s = 10 ml) hoặc gam đối với puree (m_s = 5 g).

Kết quả cuối cùng có thể được biểu thị bằng microgam trên lit (hoặc kilogam đối với puree) và tương đương với nanogam trên mililit (hoặc gam).

10. Độ chụm

10.1. Phép thử liên phòng thử nghiệm

Các chi tiết của phép thử liên phòng thử nghiệm về độ chụm của phương pháp được nêu trong Phụ lục A. Các giá trị thu được từ phép thử liên phòng thử nghiệm này có thể không áp dụng cho các dải nồng độ/chất nền khác với các giá trị đã nêu.

10.2. Độ lặp lại

Chênh lệch tuyệt đối giữa các kết quả của hai phép thử đơn lẻ thu được khi sử dụng cùng phương pháp, tiến hành trên vật liệu thử giống hệt nhau, trong cùng một phòng thử nghiệm, do một người thực hiện, sử dụng cùng thiết bị, thực hiện trong một khoảng thời gian ngắn, được phép vượt quá giá trị giới hạn lại r sau đây nhưng không quá 5% trường hợp.

...

...

...

= 26 mg/l

= 54 mg/l

= 67 mg/l

= 128 mg/l

r = 10,36 mg/l

r = 16,8 mg/l

r = 23,5 mg/l

r = 27,7 mg/l

Đối với nước táo đục:

...

...

...

= 60 mg/l

= 69 mg/l

= 106 mg/l

r = 10,36 mg/l

r = 21,8 mg/l

r = 11,8 mg/l

r = 28,6 mg/l

Đối với puree táo:

= 23 mg/kg

...

...

...

= 69 mg/kg

= 121 mg/kg

r = 17,9 mg/kg

r = 10,6 mg/kg

r = 21,0 mg/kg

r = 66,1 mg/kg

10.3. Độ tái lập

Chênh lệch tuyệt đối giữa các kết quả của hai phép thử đơn lẻ thu được trên vật liệu thử giống hệt nhau, do hai phòng thử nghiệm khác nhau thực hiện, được phép vượt quá giá trị giới hạn tái lập R sau đây nhưng không quá 5% trường hợp:

Đối với nước táo trong:

...

...

...

= 54 mg/l

= 67 mg/l

= 128 mg/l

R = 23,5 mg/l

R = 38,1 mg/l

R = 42,8 mg/l

R = 39,2 mg/l

Đối với nước táo đục:

= 26 mg/l

...

...

...

= 69 mg/l

= 106 mg/l

R = 23,5 mg/l

R = 35,0 mg/l

R = 28,0 mg/l

R = 36,1 mg/l

Đối với puree táo:

= 23 mg/kg

= 38 mg/kg

...

...

...

= 121 mg/kg

R = 23,8 mg/kg

R = 25,3 mg/kg

R = 23,8 mg/kg

R = 97,41 mg/kg

10.4. Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải chỉ rõ:

a) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử (loại mẫu, nguồn gốc của mẫu, ký hiệu);

b) viện dẫn tiêu chuẩn này;

...

...

...

d) ngày phòng thử nghiệm nhận được mẫu;

e) ngày thử nghiệm;

f) kết quả thử nghiệm thu được và đơn vị tính;

g) độ lặp lại đã được kiểm tra;

h) mọi chi tiết đặc biệt quan sát được trong khi thử nghiệm;

i) mọi chi tiết thao tác khác với quy định trong tiêu chuẩn này hoặc những điều được coi là tùy chọn mà có thể ảnh hưởng đến kết quả.

PHỤ LỤC A

(Tham khảo)

...

...

...

Các kết quả thu được từ phép thử liên phòng thử nghiệm này [1] theo hướng dẫn của AOAC về quy trình nghiên cứu cộng tác để đánh giá hiệu lực các đặc trưng của phương pháp phân tích [2].

Bảng A.1 - Dữ liệu về độ chụm - Nước táo trong

Mẫu

Mức thấp

Mức trung bình

Mức cao

Mẫu bổ sung Blind

Năm thực hiện phép thử liên phòng thử nghiệm

1998-1999

...

...

...

1998-1999

1998-1999

Số lượng phòng thử nghiệm

12

12

12

12

Số lượng phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ

12

...

...

...

10

12

Số lượng phòng thử nghiệm ngoại lệ

0

0

2

0

Số lượng kết quả được chấp nhận

12

...

...

...

10

12

Giá trị trung bình , mg/l

26

54

128

67

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r, mg/l

3,7

...

...

...

9,9

8,4

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại RSD_r, %

14

11

8

13

Giới hạn lặp lại r[r = 2,8 x s_r]. mg/l

10,36

...

...

...

27,7

23,5

Độ lệch chuẩn tái lập s_R, mg/l

8,4

13,6

14

15,3

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập RSD_R, %

33

...

...

...

11

23

Giới hạn tái lập R[R = 2,8 x s_R], mg/l

23,5

38,1

39,2

42,8

Độ thu hồi, %

-

...

...

...

-

89%±20%

Bảng A.2 - Dữ liệu về độ chụm - Nước táo đục

Mẫu

Mức thấp

Mức trung bình

Mức cao

Mẫu bổ sung Blind

Năm thực hiện phép thử liên phòng thử nghiệm

...

...

...

1998-1999

1998-1999

1998-1999

Số lượng phòng thử nghiệm

12

12

12

12

Số lượng phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ

...

...

...

9

10

11

Số lượng phòng thử nghiệm ngoại lệ

0

3

2

1

Số lượng kết quả được chấp nhận

...

...

...

9

10

11

Giá trị trung bình , mg/l

26

69

106

60

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r, mg/l

...

...

...

4,2

10,2

7,8

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại RSD_r, %

14

6

10

13

Giới hạn lặp lại r[r = 2,8 x s_r]. mg/l

...

...

...

11,8

28,6

21,8

Độ lệch chuẩn tái lập s_R, mg/l

8,4

10

12,9

12,5

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập RSD_R, %

...

...

...

14

12

21

Giới hạn tái lập R[R = 2,8 x s_R], mg/l

23,5

28

36,1

35

Độ thu hồi, %

...

...

...

-

-

80%±16%

Bảng A.3 - Dữ liệu về độ chụm- Puree táo

Mẫu

Mức thấp

Mức trung bình

Mức cao

Mẫu bổ sung Blind

...

...

...

1998-1999

1998-1999

1998-1999

1998-1999

Số lượng phòng thử nghiệm

9

11

10

10

...

...

...

8

9

10

9

Số lượng phòng thử nghiệm ngoại lệ

1

2

0

1

...

...

...

8

9

10

9

Giá trị trung bình , mg/kg

23

38

121

69

...

...

...

6,4

38

23,6

7,5

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại RSD_r, %

27

10

19

11

...

...

...

17,9

10,6

66,1

21

Độ lệch chuẩn tái lập s_R, mg/kg

9,2

12,6

34,8

8,5

...

...

...

13

33

29

36

Giới hạn tái lập R[R = 2,8 x s_R], mg/kg

25,7

35,3

97,4

23,8

...

...

...

-

-

-

92%±12%

Thư mục tài liệu tham khảo

[1] MacDonald S., Long M., Gilbert J., Felguerias, I. 2000, Liquid chromatography method for determination of patulin in clear and cloudy apple juices apple puree: collaborative study. J AOAC Int 83 (6), 1387 - 1394.

[2] AOAC International 1995, AOAC Official Methods Program, pp. 23-51.