TIÊU CHUẨN
QUỐC GIA
TCVN
7928 : 2008
THỰC PHẨM –
XÁC ĐỊNH TỔNG SỐ VI SINH
VẬT HIẾU KHÍ
BẰNG PHƯƠNG PHÁP GEL PECTIN
Foodstuffs
– Determination of total aerobic count by the pectin gel method
Lời nói đầu
TCVN 7928:2008 được xây dựng trên cơ
sở AOAC 988.18 Aerobic Plate Count – Pectin Gel Method;
TCVN 7928:2008 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn
TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích và lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu
chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
VẬT
HIẾU KHÍ BẰNG PHƯƠNG PHÁP GEL PECTIN
Foodstuffs
– Determination of total aerobic count by the pectin gel method
1. Phạm vi áp dụng
Tiêu chuẩn này qui định phương pháp gel
pectin để xác định tổng vi khuẩn hiếu khí có trong sản phẩm thực phẩm.
2. Nguyên tắc
Phương pháp này sử dụng các đĩa
RedigelTM đã xử lý sơ bộ có chứa một lớp “chất làm cứng” mỏng và môi
trường lỏng chứa các chất dinh dưỡng với chất làm đông pectin. Rót một lớp môi trường
lỏng từ 12 ml đến 15 ml vào đĩa RedigelTM đã xử lý sơ bộ và bổ sung
phần mẫu thử không pha loãng hoặc đã pha loãng. Xoay và lắc đĩa để trộn đều mẫu
thử và môi trường. Để yên đĩa trên mặt phẳng từ 30 min đến 40 min cho đến khi
đông đặc. Toàn bộ quá trình được thực hiện ở nhiệt độ phòng. Sau đó ủ các đĩa
và đếm.
3. Thuốc thử và môi trường nuôi cấy
Các thuốc thử được sử dụng phải là loại
tinh khiết phân tích và nước được sử dụng phải là nước cất hoặc nước có chất lượng
tương đương, trừ khi có qui định khác.
3.1 Ống và đĩa gel pectin
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Để chuẩn bị pectin đếm đĩa từ các thành
phần riêng lẻ, hòa tan 5,0 g sản phảm thủy phân của casein, 2,5 g dịch chiết
nấm men và 1,0 g glucoza trong 500 ml nước. Hòa tan 15 g pectin metoxyl hóa
thấp trong 500 ml nước. Đun nóng các hỗn hợp riêng rẽ cho đến khi các thành phần
được hòa tan hết. Hấp áp lực các dung dịch này 15 min ở 121 oC. Gộp
thành phần dinh dưỡng, dung dịch pectin và chỉnh pH đến 7,0 ± 0,1. Để chuẩn bị
các đĩa Redigel vô trùng, cần chuẩn bị hỗn hợp lớp chất làm cứng của thạch 1 %
với CaCl2 2 % (khối lượng trên thể tích). Khử trùng hỗn hợp bằng hấp
áp lực 15 min ở 121 oC. Phân phối một cách vô trùng các lượng 5 ml
hỗn hợp vào các đĩa Redigel vô trùng.
3.2 Dung dịch đệm phosphat
Butterfield.
4. Thiết bị, dụng cụ
Sử dụng các thiết bị, dụng cụ của phòng
thử nghiệm thông thường và cụ thể như sau:
4.1 Pipet.
4.2 Ống đong.
4.3 Cân.
4.4 Máy trộn phòng thử nghiệm, có thể duy trì được tốc độ từ 10 000r/min
đến 12 000r/min.
4.5 Tủ ấm, có thể duy trì được nhiệt độ ở 32 oC
± 1 oC và 35 oC ± 1 oC.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
5.1 Chuẩn bị dịch cấy
Chuẩn bị các dịch pha loãng thập phân
bằng 90 ml dịch pha loãng vô trùng (dung dịch đệm phosphat Butterfield) với 10
ml dung dịch mẫu pha loãng, trừ khi có quy định khác. Lắc tất cả các dịch pha
loãng 25 lần theo dạng hình vòng cung 30 cm. Dùng pipet (4.1) lấy chính xác thể
tích cần thiết. Không dùng pipet có dung tích lớn hơn 10 lần thể tích được lấy.
Ví dụ: không dùng pipet có dung tích lớn hơn 10 ml để phân phối 1 ml, không
dùng pipet có dung tích lớn hơn 1 ml để phân phối thể tích 0,1 ml.
5.1.1 Sản phẩm sữa
Đong (hoặc cân) 11 ml (hoặc 11 g)
phần mẫu thử và pha loãng trong 99 ml dung dịch đệm phosphat Butterfield (3.2).
Đối với các sản phẩm dạng rắn thì trộn 2 min trên máy trộn phòng thử nghiệm
(4.4) ở tốc độ quay từ 10 000 r/min đến 12 000 r/min. Chuẩn bị các dung dịch
pha loãng tiếp theo sao cho trên một đĩa tổng số khuẩn lạc thu được từ 25 đến
250. Ủ các đĩa này trong 48 h ± 3 h ở 32 oC ± 1 oC.
5.1.2 Các sản phẩm khác với sữa
Cân 50 g phần mẫu thử cho vào 450 ml
dung dịch đệm phosphat Butterfield (3.2) và trộn 2 min trên máy trộn phòng thử nghiệm
(4.4) ở tốc độ quay từ 10 000 r/min đến 12 000 r/min. Chuẩn bị các dung dịch
pha loãng tiếp theo bằng cách phân phối 10 ml phần mẫu thử vào 90 ml dịch pha
loãng sao cho trên một đĩa tổng số khuẩn lạc thu được từ 30 đến 300. Ủ các đĩa
này trong 48 h ± 2 h ở 35 oC ± 1 oC.
5.2 Phương pháp xác định
5.2.1 Mở nắp đĩa Redigel vô trùng và rót khoảng
từ 12 ml đến 15 ml dịch lỏng gel pectin từ chai vào đĩa. Đậy nắp đĩa và xoay
đĩa để gel pectin phủ khắp đáy. Chuẩn bị một số lượng đĩa cần thiết cho các phần
mẫu thử (hai đĩa cho mỗi dịch pha loãng). Các đĩa cần được sử dụng trong vòng 5
min sau khi đã rót gel pectin.
5.2.2 Cho 1 ml dịch cấy vào dịch lỏng gel
pectin trong đĩa Redigel vô trùng. Chạm đầu tip pipet một lần vào điểm khô trên
thành trong của đĩa (cao hơn mức của dịch pha loãng gel pectin) sau khi phân
phối phần mẫu thử đến điểm ngừng trong tip pipet. Lắc đĩa ngay để trộn đều phần
mẫu thử với gel pectin. Không để pectin tràn ra ngoài nữa.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
5.2.3 Để yên các đĩa đã cấy trên mặt phẳng
cho đến khi đông đặc (khoảng 30 min đến 40 min) sau đó ủ 48 h ± 2 h ở 35 oC
± 1 oC đối với các sản phảm khác với sữa và trong 48 h ± 3 h ở 32 oC
± 1 oC đối với các sản phẩm sữa.
5.2.4 Đếm các đĩa có số khuẩn lạc thích
hợp (từ 30 khuẩn lạc đến 300 khuẩn lạc đối với các sản phẩm khác với sữa và từ
25 khuẩn lạc đến 250 khuẩn lạc đối với sản phẩm sữa). Nếu các đĩa không chứa số
khuẩn lạc thích hợp đó thì ghi lại độ pha loãng và số khuẩn lạc đếm được.
5.3 Biểu thị kết quả
Ghi lại trung bình số đếm thu được là
tổng số vi sinh vật hiếu khí đếm được trên gam hoặc mililit sản phẩm.
6. Báo cáo thử nghiệm
Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ:
- mọi thông tin cần thiết để nhận
biết đầy đủ về mẫu thử;
- phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu
biết;
- phương pháp thử đã sử dụng và viện
dẫn tiêu chuẩn này;
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
- các kết quả thử nghiệm thu được.