Thuộc tính
Nội dung
Tiếng Anh (English)
Văn bản gốc/PDF
Lược đồ
Liên quan hiệu lực
Liên quan nội dung
Thuộc tính
Tải về

Đang tải văn bản...

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11600:2016 về Thịt và sản phẩm thịt - Xác định dư lượng ractopamin

Số hiệu:	TCVN11600:2016	Loại văn bản:	Tiêu chuẩn Việt Nam
Nơi ban hành:	***	Người ký:	***
Ngày ban hành:	Năm 2016	Ngày hiệu lực:
		Tình trạng:	Đã biết

- Cột:	4.20;
- Nhiệt độ cột:	20 ^oC;
- Pha động A:	3.20;
- Pha động B:	3.21;
- Tốc độ dòng:	0,5 ml/min;
- Chương trình gradient:	xem Bảng 1;
-Thể tích bơm:	10 μl;
- Bộ bơm mẫu:	4.19;
- Nhiệt độ bơm mẫu tự động:	Nhiệt độ phòng;
- Thời gian chạy:	6,5 min;
- Thiết bị LC-MS/MS:	4,18;
- Chế độ vận hành:	ion dương, kiểm soát đa phản ứng (MRM);
Xác định:	302,1 > 164,1 ;
Khẳng định:	302,1 >284,2; 302,1 >121,2;
Nội chuẩn:	308,2 > 168,1;

Các thông số cụ thể đối với các hợp chất, xem Bảng 2. Các thông số của thiết bị, xem Bảng 3.

Bảng 1 - Chương trình gradient

Bước

Tổng thời gian

Pha động A

Pha động B

min

...

Bạn phải đăng nhập hoặc đăng ký Thành Viên TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.

Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66

0,00

70,0

30,0

0,50

70,0

30,0

3,50

...

100,0

4,00

0,0

100,0

4,10

70,0

30,0

...

6,50

70,0

30,0

Bảng 2 - Các thông số cụ thể đối với các hợp chất^a

Nhận biết hợp chất

Khối lượng Q1, amu

Khối lượng Q3, amu

...

Ractopamin

302,1

164,1

Ractopamin

302,1

284,2

...

Ractopamin

302,1

121,2

Ractopamin-d₆

308,2

168,1

...

Bảng 3 - Các thông số của thiết bị (đối với API4000 và API5000)^a

Thông số thiết bị

Giá trị các thông số

Nguồn ion

Turbospray

Độ phân giải (Q1 và Q3)

Đơn vị tùy chọn

Khí 1 (GS1)

...

Khí 2 (GS2)

Khí chắn (CUR)

Điện áp phun ion (IS)

5 500

Nhiệt độ (TEM)

500

Va chạm hoạt hóa phân ly (CAD)

...

Điện thế bắn phá (DP)

Điện thế đầu vào (EP)

9,00

Thời gian ngưng, miligiây (ms)

150

^a Tối ưu hóa các thông số đối với hệ thống được sử dụng.

6.5.2 Tiến hành phân tích

...

Nên sử dụng van chuyển đổi để giảm thiểu nguồn nhiễm bẩn và tránh làm hao hụt đáp ứng tuyệt đối khi bơm nhiều dịch chiết. Van này có thể được cài đặt chương trình chuyển đổi dòng pha động để thải trước khi rửa giải ractopamin nhằm giảm thiểu lượng nền mẫu được bơm vào nguồn. Thiết bị có thể tối ưu hóa lại trước mỗi mẻ nếu độ nhạy tuyệt đối bị giảm vì nhiễm bẩn tại nguồn.

6.5.2.1 Cân bằng hệ thống với pha động ở tốc độ dòng 0,10 ml/min để đảm bảo thời gian lưu ổn định trước khi tương tác với nguồn ion hóa phun điện tử (ESI).

6.5.2.2 Kết nối hệ thống HPLC với nguồn ESI và cài đặt tốc độ dòng pha động vào nguồn ở 0,5 ml/min.

6.5.2.3 Cân bằng hệ thống với 10 lần bơm dung dịch chuẩn thích hợp với nền mẫu hoặc mẫu trước khi bắt đầu phân tích. Việc này phải được thực hiện với dung dịch nền mẫu đại diện cho mẫu được phân tích.

6.5.2.4 Tiến hành bơm hai lần dung dịch chuẩn thích hợp với nền mẫu ở nồng độ thấp nhất sau đó bơm một lần dung dịch chuẩn thích hợp với nền mẫu ở nồng độ cao nhất và quan sát pic ractopamin có mặt ở thời gian lưu dự kiến đối với các ion ở m/z 302,1; m/z 164,1; m/z 284,2 và m/z 121,2. Dải khuyến cáo cho thể tích bơm là từ 8 μl đến 12 μl.

6.5.2.5 Bơm 10 μl phần dịch pha loãng được dùng để tạo các thể tích dung dịch chuẩn và thể tích mẫu, quan sát không có chất gây nhiễu sắc ký ở thời gian lưu ractopamin.

6.5.2.6 Bơm riêng dung dịch chuẩn thích hợp với nền mẫu, bơm riêng từng dịch chiết mẫu và sau đó lại bơm riêng dung dịch chuẩn thích hợp với nền mẫu.

6.6 Dựng đường chuẩn

Đo diện tích pic đối với ratopamin và chất nội chuẩn (ractopamin d₆) của dung dịch chuẩn và dung dịch thử. Dựng đường chuẩn tuyến tính (1/x) dùng tỷ số ion xác định của đáp ứng chuẩn (tỷ lệ 302,1 > 164,1 và 308,2 >168,1) (đường chuẩn của diện tích ractopamin hoặc diện tích chất nội chuẩn theo nồng độ]. Từ đường chuẩn, tính nồng độ của từng dung dịch chiết, biểu thị bằng nanogam trên mililít (ng/ml).

...

7 Tính kết quả

Nồng độ ractopamin trong mẫu thử, X, biểu thị bằng nanogam trên gam (ng/g), được tính theo Công thức sau:

Trong đó:

A là nồng độ dịch chiết mẫu xác định được từ đường chuẩn (xem 6.6), tính bằng nanogam trên mililít (ng/ml);

B là độ tinh khiết của chất chuẩn, tính bằng gam trên gam (g/g);

C là thể tích dịch chiết, tính bằng mililít (ml);

D là khối lượng của mẫu, tính bằng gam (g);

E là hệ số pha loãng, tính bằng mililít trên mililít (ml/ml) (xem 6.6).

...

Khẳng định việc nhận biết đã được thực hiện bằng cách so sánh ion sản phẩm đo được trong mẫu với ion sản phẩm trong chất chuẩn về khối lượng và cường độ tương đối.

Thu lấy sắc đồ riêng đối với các mảnh m/z 302,1 đến m/z 164,1; m/z 302,1 đến m/z 284,2 và m/z 302,1 đến m/z 121,2 đối với mỗi lần bơm và đảm bảo rằng thời gian lưu ractopamin trong mẫu tương ứng với thời gian lưu của ractopamin trong chất chuẩn chỉ chênh lệch ±5 %. Các dịch chiết có thể được bơm lại nếu có dao động về thời gian lưu trong quá trình phân tích mẻ vượt quá sai số cho phép 5 %.

9 Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ:

a) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử;

b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết;

c) phương pháp thử đã sử dụng và viện dẫn tiêu chuẩn này;

d) mọi thao tác không được quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc những điều được coi là tự chọn, và bất kỳ chi tiết nào có ảnh hưởng tới kết quả;

e) kết quả thử nghiệm thu được;

...

Phụ lục A

(Tham khảo)

Kết quả của phép thử liên phòng thử nghiệm

Bảng A.1 - Các kết quả thử nghiệm trên bò

Mức bổ sung, ng/g

Số thứ tự phòng thử nghiệm

Số lần lặp lại

Thử nghiệm nội bộ

Thử nghiệm liên phòng

...

Giá trị HorRat

Giá trị trung bình,

ng/g

Độ lệch chuẩn lặp lại,

s_r

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại

RSD, %

Giá trị trung bình,

ng/g

...

s_r

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập

RSD, %

Gan (ractopamin tổng số)

0,5

0,411

0,0252

...

0,389

0,0484

12,4

-0,111

0,50

0,378

...

17,1

...

0,0475

12,6

1,0

...

0,816

0,0536

6,57

0,850

0,0768

9,03

-0,150

0,40

...

0,855

0,0658

7,69

...

0,880

0,102

11,6

...

2,0

1,62

0,0789

4,86

1,78

0,209

11,7

...

0,58

1,77

0,216

12,2

...

1,95

0,180

9,22

...

Gan (ractopamin gốc)

19,3

1,18

...

18,2

1,16

6,35

-1,76

0,44

17,3

...

4,62

...

0,450

2,48

...

37,2

1,59

4,29

36,2

1,56

4,29

-3,76

0,33

...

34,6

0,662

1,91

...

36,9

0,695

1,88

...

71,9

2,82

3,93

70,7

4,28

6,05

...

0,52

65,6

1,77

2,69

...

74,6

0,637

0,854

...

Thận (ractopamin tổng số)

0,5

0,408

0,0340

...

0,402

0,0522

13,0

-0,098

0,52

0,441

...

10,3

5^a

...

0,0281

8,09

1,0

...

0,814

0,0685

8,42

0,816

0,0778

9,53

-0,184

0,42

...

0,881

0,0522

5,92

...

0,754

0,0583

7,74

...

2,0

1,57

0,139

8,86

1,63

0,168

10,3

...

0,50

1,81

0,107

5,90

...

1,53

0,0993

6,51

...

Thận (ractopamin gốc)

39,3

1,91

...

41,3

2,34

5,66

-3,69

0,44

40,9

...

3,92

5^a

...

0,547

1,25

...

79,4

1,48

1,86

80,9

1,97

2,44

-9,11

0,21

...

81,2

1,35

1,67

...

82,1

2,17

2,65

...

180

151

5,28

3,49

161

8,72

5,40

...

0,52

163

2,42

1,49

...

170

2,34

1,37

...

Thịt (ractopamin tổng số)

0,5

0,441

0,0313

...

0,411

0,0543

13,2

-0,0887

0,53

0,438

...

11,9

5^a

...

0,0259

7,30

1,0

...

0,854

0,0586

6,86

0,815

0,0957

11,7

-0,185

0,52

...

0,862

0,0919

10,7

...

0,73

0,0785

10,8

...

2,0

1,68

0,102

6,08

1,73

0,177

10,2

...

0,50

1,93

0,0927

4,81

...

1,58

0,108

6,85

...

Thịt (ractopamin gốc)

3,78

0,259

...

3,85

0,247

6,42

-1,15

0,36

3,78

...

6,86

...

0,188

4,71

...

7,44

0,431

5,79

7,95

0,881

11,1

-2,05

0,69

...

7,44

0,431

7,28

...

8,96

0,652

5,14

...

15,2

0,779

5,14

15,8

1,23

7,80

...

0,54

15,2

0,779

5,14

...

17,1

0,935

5,46

...

Mỡ (ractopamin tổng số)

0,5

0,384

0,0295

...

0,405

0,0308

7,62

-0,0954

0,30

0,404

...

3,30

...

0,0333

7,82

1,0

...

0,880

0,0324

3,68

0,897

0,867

9,67

-1,103

0,43

...

0,944

0,0932

9,88

...

0,866

0,108

12,5

...

2,0

1,98

0,147

7,41

1,90

0,158

8,28

...

0,41

1,19

0,141

7,37

...

1,82

0,169

9,25

...

Mỡ (ractopamin gốc)

4,25

0,252

...

4,10

0,239

5,83

-0,898

0,33

4,05

...

3,15

...

0,276

6,88

...

8,98

0,486

5,41

8,73

0,505

5,79

-1,27

0,36

...

8,92

0,447

5,02

...

8,30

0,304

3,66

...

18,7

0,959

5,13

18,3

1,20

6,58

...

0,46

18,9

1,34

7,07

...

17,3

0,565

3,27

...

^a⁾ Giá trị ngoại lệ được loại bỏ.

Bảng A.2 - Các kết quả thử nghiệm trên gà

Mức bổ sung, ng/g

Số thứ tự phòng thử nghiệm

Số lần lặp lại

...

Thử nghiệm liên phòng

Độ chệch

Giá trị HorRat

Giá trị trung bình,

ng/g

Độ lệch chuẩn lặp lại,

s_r

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại

RSD, %

...

ng/g

Độ lệch chuẩn tái lập,

s_r

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập

RSD, %

Gan (ractopamin tổng số)

0,5

...

0,0414

9,86

0,405

0,031

7,62

-0,095

0,40

...

0,427

00145

3,39

...

0,361

0,0235

6,53

...

0,793

0,0326

4,12

0,815

0,0752

9,22

-0,185

...

0,874

0,0857

9,81

...

5^a

0,771

0,0614

7,97

...

2,0

1,67

0,106

6,32

1,77

...

7,26

-233

0,36

1,88

0,0623

3,31

...

1,75

0,120

...

Gan (ractopamin gốc)

225

...

7,39

3,55

207

6,82

3,30

-18,5

0,33

...

204

8,63

4,23

...

208

4,23

2,04

...

423

20,7

5,01

410

19,0

4,64

-40,1

...

402

18,6

4,64

...

415

18,1

4,37

...

900

815

7,21

0,885

798

...

3,64

-102

0,54

776

31,0

4,00

...

805

29,1

...

Thịt (ractopamin tổng số)

0,5

...

0,0185

4,58

0,413

0,0402

9,73

-0,0867

0,39

...

0,458

0,0240

5,23

...

0,378

0,0243

6,43

...

0,836

0,0600

7,18

0,850

0,0493

5,80

-0,150

...

0,891

0,0287

3,22

...

0,822

0,0251

3,06

...

2,0

1,76

0,0400

2,25

1,77

...

4,97

-0,0277

0,24

1,73

0,0876

5,08

...

1,82

0,110

...

Thịt (ractopamin gốc)

...

1,82

4,40

44,4

3,39

7,64

-5,57

0,61

...

43,9

1,14

2,59

...

48,2

2,37

4,93

...

82,6

2,29

2,77

90,3

6,64

7,36

-9,69

...

92,1

2,76

2,99

...

96,2

4,60

4,78

...

200

165

4,62

2,80

181

...

7,78

-19,4

0,76

189

12,0

6,38

...

188

7,71

...

^a) Giá trị ngoại lệ được loại bỏ.

Bảng A.3 - Các kết quả thử nghiệm trên lợn

Mức bổ sung, ng/g

...

Số lần lặp lại

Thử nghiệm nội bộ

Thử nghiệm liên phòng

Độ chệch

Giá trị HorRat

Giá trị trung bình,

ng/g

Độ lệch chuẩn lặp lại,

s_r

...

RSD, %

Giá trị trung bình,

ng/g

Độ lệch chuẩn tái lập,

s_r

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập

RSD, %

Thịt (ractopamin tổng số)

...

41,2

1,82

4,40

44,4

3,39

7,64

-5,57

0,61

...

43,9

1,14

2,59

...

48,2

2,37

4,93

...

100

82,6

2,29

2,77

90,3

6,64

...

-9,69

0,65

92,1

2,76

2,99

...

96,2

4,60

4,78

...

200

165

4,62

...

181

7,78

-19,4

0,76

189

...

6,38

...

7,71

4,09

Gan (ractopamin tổng số)

0,5

...

0,393

0,0536

13,6

0,400

0,0598

15,0

-0,100

0,60

...

0,452

0,0345

7,64

...

0,348

0,0146

4,19

...

1,0

0,848

0,121

14,3

0,801

0,0875

...

-0,199

0,48

0,791

0,0433

5,47

...

0,765

0,0722

9,45

...

2,0

1,54

0,143

...

1,62

0,121

7,48

-0,382

0,37

1,69

...

5,17

...

0,0816

5,03

Gan (ractopamin gốc)

...

19,0

0,456

2,40

18,0

1,19

6,62

-2,04

0,46

...

18,0

0,717

3,98

...

16,9

1,16

6,90

...

37,6

0,562

1,50

36,7

1,42

...

-3,26

0,30

35,5

1,65

4,64

...

37,1

0,939

2,53

...

66,6

2,30

...

69,8

3,88

5,55

-10,2

0,47

70,6

...

5,57

...

3,12

4,32

Thận (ractopamin tổng số)

0,5

...

0,399

0,0270

6,77

0,385

0,0546

14,2

-0,115

0,56

...

0,385

0,0793

20,6

...

0,372

0,0520

14,0

...

1,0

0,706

0,0897

12,7

0,729

0,0886

...

-0,271

0,54

0,748

0,0879

11,8

...

0,735

0,0991

13,5

...

2,0

1,46

0,173

...

1,56

0,166

10,6

-0,439

0,52

1,59

...

7,81

...

0,165

10,1

Thận (ractopamin gốc)

...

41,4

2,37

5,73

41,1

2,47

5,95

-3,59

0,47

...

42,5

2,19

5,14

...

40,3

2,71

6,72

...

77,4

4,33

5,59

79,8

6,46

...

-10,2

0,70

84,5

5,29

6,26

...

77,6

7,47

9,63

...

180

142

10,9

...

150

12,1

8,09

-30,1

0,78

152

...

8,76

...

8,55

5,47

Thịt (ractopamin tổng số)

0,5

...

0,398

0,0281

7,08

0,413

0,0371

8,97

-0,0869

0,36

...

0,408

0,0456

11,2

...

0,433

0,0315

7,27

...

1,0

0,814

0,0586

7,21

0,825

0,087

...

-0,176

0,47

0,811

0,0776

9,57

...

0,849

0,123

14,5

...

2,0

1,62

0,0903

...

1,77

0,180

10,1

-0,227

0,50

1,96

...

4,49

...

0,158

9,05

Thịt (ractopamin gốc)

...

4,74

0,240

5,08

4,42

0,481

10,9

-0,580

0,61

...

4,17

0,645

15,5

...

4,36

0,336

7,70

...

9,90

0,550

5,55

9,21

0,700

...

9,21

0,48

8,74

0,428

4,89

...

8,98

0,523

5,82

...

19,1

1,92

...

18,4

1,42

7,74

-1,59

0,54

17,9

...

4,00

...

1,38

7,55

Mỡ (ractopamin tổng số)

0,5

...

0,38

0,0201

5,28

0,397

0,0527

13,3

-0,103

0,53

...

0,446

0,0425

9,53

...

0,365

0,0524

14,4

...

1,0

0,875

0,0368

4,21

0,896

0,111

...

-0,104

0,55

0,961

0,133

13,8

...

0,853

0,123

14,4

...

2,0

1,86

0,0717

...

1,86

0,171

9,17

-0,136

0,45

1,94

...

11,8

...

0,164

9,19

Mỡ (ractopamin gốc)

...

4,91

0,333

6,79

4,63

0,375

8,11

-0,369

0,46

...

4,20

0,112

2,66

...

4,78

0,126

2,63

...

10,5

0,444

4,24

9,73

0,814

...

-0,273

0,52

8,71

0,175

2,01

...

10,0

0,226

2,25

...

21,5

0,852

...

20,0

1,61

8,05

-0,0389

0,56

18,1

...

1,39

...

0,887

4,36

1) Sản phẩm của Gelest, Inc., Morrisville, PA, USA. Thông tin này được đưa ra nhằm tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định sử dụng các sản phẩm này. Có thể sử dụng các sản phẩm tương tự nếu cho kết quả tương đương.

...

3) Sản phẩm của Waters, Milford, MA, USA. Thông tin này được đưa ra nhằm tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định sử dụng các sản phẩm này. Có thể sử dụng các sản phẩm tương tự nếu cho kết quả tương đương.

4) Các sản phầm của Applied Biosystem, CA, USA. Thông tin này được đưa ra nhằm tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định sử dụng các sản phẩm này. Có thể sử dụng các sản phẩm tương tự nếu cho kết quả tương đương.

5) Sản phẩm của Agilent Technologies, Inc., CA, USA. Thông tin này được đưa ra nhằm tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định sử dụng các sản phẩm này. Có thể sử dụng các sản phẩm tương tự nếu cho kết quả tương đương.