|
Tên mẫu
|
Nồng độ chuẩn
(ng/ml)
|
|
Clenbuterol
|
Salbutamol
|
Ractopamin
|
|
Chuẩn 0
|
0
|
0
|
0
|
|
Chuẩn
1
|
0,1
|
2,5
|
5
|
|
Chuẩn
2
|
0,2
|
5
|
10
|
|
Chuẩn 3
|
0,3
|
7,5
|
15
|
|
Chuẩn 4
|
0,4
|
10
|
20
|
|
Chuẩn
5
|
0,8
|
20
|
40
|
LƯU Ý:
Nếu mẫu nhiều béo, khi
cho n-hexan vào và lắc quá mạnh,
dung dịch sẽ tạo huyền phù khó
tách lớp. Nên lắc vừa phải
và tiến hành loại
béo lần thứ hai (nếu cần).
7.6 Điều kiện phân
tích của LC-MS/MS
7.6.1 Yêu cầu chung
Thực hiện bảo dưỡng LC và MS để đảm bảo
thiết bị hoạt động tốt. Cần thực hiện chuẩn
hóa các điều kiện của sắc ký lỏng như tốc độ dòng, thành phần pha động, nhiệt độ
cột và các điều kiện của đầu dò MS/MS như điện thế mao quản, điện thế đầu cone, năng lượng va
chạm, tốc độ khí va chạm...để mỗi chất phân tích thu được tỷ lệ tín
hiệu trên nhiễu (S/N) lớn hơn 3 cho các phân mảnh ion và luôn tồn tại 4 điểm nhận dạng
(IP) bao gồm 1 ion mẹ, 2 ion con; không có píc nhiễu tại vị trí của píc
phân tích.
7.6.2 Ví dụ về điều kiện phân
tích LC-MS/MS
a) Điều kiện đối với LC:
- Nhiệt độ cột: 40 °C;
- Thể tích bơm mẫu: 10 ml;
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Kênh A: axetonitril (3.7).
Kênh B: dung dịch 2 mM amonium format,
pH = 3,0 (3.21).
Bảng 2 - Điều kiện
gradient cho hệ thống UPLC
Thời gian, min
Tốc độ dòng, (ml/min)
Kênh A, %
Kênh B, %
0
0,2
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
95
0,5
0,2
5
95
1,0
0,2
20
80
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
0,2
80
20
4,2
0,2
5
95
6,0
0,2
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
95
b) Điều kiện trên MS
- Chế độ ion hóa: ion dương;
- Nhiệt độ nguồn ion hóa: 150
°C;
- Nhiệt độ hóa hơi dung môi: 400 °C;
- Tốc độ dòng khí làm bay hơi
dung môi: 800 l/h;
- Tốc độ dòng khí qua cone Gas: 30
l/h;
- Chế độ MRM: theo các điều kiện như Bảng
3.
Bảng 3 - Điều
kiện phân mảnh MS-MS
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
lon mẹ, m/z
Ion định lượng, m/z
(năng lượng, eV)
Ion định
tính, m/z
(năng lượng, eV)
Năng lượng (Sample
Cone) (V)
Clenbuterol
276
202 (14)
167 (28)
18
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
286
203 (16)
168 (30)
18
Salbutamol
240
222 (10)
148 (18)
16
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
243
255 (10)
151 (16)
18
Ractopamin
302
164 (16)
121 (28)
20
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
308
168 (16)
290 (22)
20
7.7 Trình tự bơm mẫu
Trình tự bơm mẫu
theo thứ tự đề nghị
như sau: dung dịch các chất chuẩn (bảng 1, 7.5.3); mẫu kiểm soát; nước cất
không chứa các chất phân tích; mẫu trắng; mẫu thử; sau tối đa 24 mẫu phải bơm lại
dung dịch các chất chuẩn (bảng 1, 7.5.3), mẫu kiểm soát và mẫu trắng; mẫu kiểm soát nên được tiêm lại
sau cuối mỗi dãy mẫu. Không được có píc nhiễu của các chất phân tích trong mẫu nước cất được bơm
vào thiết bị.
8 Tính kết quả
8.1 Tính hệ số
tín hiệu
Tính cho từng chất cần phân tích theo
phương trình: 
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Area là diện tích píc của
ion định lượng của chất phân tích;
ISConc là nồng độ ion định
lượng của chất nội chuẩn tương ứng chất phân tích;
ISArea là diện tích
píc của ion định lượng của chất nội
chuẩn tương ứng chất phân tích.
8.3 Hàm lượng chất
phân tích trong mẫu
Dư lượng các chất cần phân tích trong
mẫu thử, C, được biểu
thị bằng nanogam trên gam (ng/g) và được tính theo công thức sau:
C là nồng độ của Agonist có trong mẫu, tính bằng
ng/g;
Cx là nồng độ
Agonist đo được suy ra từ đường chuẩn tương ứng với chất phân tích, ng/ml;
V1 là thể tích dịch chiết ban đầu (5 ml), tính bằng ml;
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
V3 là thể tích định mức
cuối cùng (1ml), tính bằng ml;
F là hệ số pha
loãng mẫu khi đo (nếu
không pha loãng, F = 1);
m là khối lượng mẫu thử,
tính bằng gam (g).
9 Báo cáo thử nghiệm
Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ:
- mọi thông tin cần thiết để
nhận biết đầy đủ về mẫu
thử;
- phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu
biết;
- phương pháp thử đã dùng, viện dẫn
tiêu chuẩn này;
- tất cả các chi tiết thao tác không
quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc tùy chọn cùng với các chi tiết bất thường nào khác có thể
ảnh hưởng
đến
kết quả;
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
THƯ MỤC TÀI
LIỆU THAM KHẢO
[1] United States Department of
Agriculture Food Safety and Inspection Service, Office of Public Health
Science, Screening and Confirmation of Beta-Agonists by HPLC/MS/MS, CLG-
AGON1.04.
[3] AOAC Offical Method
2011.03, Parent and total
Ractopamine in Bovine,
Swine and Turkey tissues, LC-MS-MS.