TCVN-8424-2-2019-Thuc-pham-co-nguon-goc-tu-thuc-vat-Phan-2

Thuộc tính
Nội dung
Tiếng Anh (English)
Văn bản gốc/PDF
Lược đồ
Liên quan hiệu lực
Liên quan nội dung
Thuộc tính
Tải về
Các bản dự thảo

Đang tải văn bản...

Số hiệu:	TCVN8424-2:2019	Loại văn bản:	Tiêu chuẩn Việt Nam
Nơi ban hành:	***	Người ký:	***
Ngày ban hành:	Năm 2019	Ngày hiệu lực:
		Tình trạng:	Đã biết

TIÊU CHUẨN QUỐC GIA

TCVN 8424-2:2019

THỰC PHẨM CÓ NGUỒN GỐC TỪ THỰC VẬT- PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐA DƯ LƯỢNG THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT BẰNG SẮC KÝ KHÍ HOẶC SẮC KÝ LỎNG - PHỔ KHỐI LƯỢNG HAI LẦN - PHẦN 2: PHƯƠNG PHÁP CHIẾT VÀ LÀM SẠCH

Foods of plant origin - Multiresidue methods for the determination of pesticide residues by GC or LC-MS/MS - Part 2: Methods for extraction and cleanup

Lời nói đầu

TCVN 8424-2:2019 thay thế TCVN 8424-2:2010;

TCVN 8424-2:2019 được xây dựng trên cơ sở tham khảo EN 12393-2:2013;

TCVN 8424-2:2019 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích và lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.

Bộ TCVN 8424, Thực phẩm có nguồn gốc từ thực vật - Phương pháp xác định đa dư lượng thuốc bảo vệ thực vật bằng sắc ký khí hoặc sắc ký lỏng-phổ khối lượng hai lần, bao gồm các phần sau:

...

Bạn phải đăng nhập hoặc đăng ký Thành Viên TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.

Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66

- TCVN 8424-2:2019, Phần 2: Phương pháp chiết và làm sạch;

- TCVN 8424-3:2019, Phần 3: Phương pháp xác định và phép thử khẳng định.

Lời giới thiệu

Tiêu chuẩn này đưa ra một loạt các phương pháp xác định đa dư lượng thuốc bảo vệ thực vật có giá trị ngang nhau: không có phương pháp nào được coi là phương pháp chính, vì hiện nay các phương pháp này vẫn đang tiếp tục được xây dựng. Các phương pháp được chọn trong tiêu chuẩn này đã được đánh giá hiệu lực và/hoặc được sử dụng rộng rãi.

Vì các phương pháp này có thể áp dụng được cho nhiều loại hàng hóa thực phẩm/các hỗn hợp thuốc bảo vệ thực vật, nên có thể sử dụng các hệ thống khác nhau để xác định, có các thay đổi về thiết bị, các điều kiện chiết, làm sạch và sắc ký phù hợp để nâng cao hiệu năng của phương pháp, xem 3.1.

Foods of plant origin - Multiresidue methods for the determination of pesticide residues by GC or LC-MS/MS - Part 2: Methods for extraction and cleanup

1 Phạm vi áp dụng

...

Đối với mục đích này có thể sử dụng các dung môi khác nhau. Các dư lượng thuốc bảo vệ thực vật thường được chiết cùng với một số chất có thể gây nhiễu đến phép phân tích. Để tinh sạch các dịch chiết thô, có thể sử dụng một vài kỹ thuật.

Tiêu chuẩn này bao gồm các phương pháp chiết và làm sạch đã qua các nghiên cứu thử nghiệm liên phòng và/hoặc được chấp nhận sau đây:

- Phương pháp M: Chiết bằng axeton và chiết phân đoạn lỏng-lỏng bằng diclometan/dầu nhẹ, nếu cần thì làm sạch trên cột Florisil®1) ^{[1], [2], [3]};

- Phương pháp N: Chiết bằng axeton, chiết phân đoạn lỏng-lỏng bằng diclorometan hoặc xyclohexan/etyl axetat và làm sạch bằng thẩm thấu gel và sắc ký silica gel ^{[4], [5]};

- Phương pháp P: Chiết bằng etyl axetat, có làm sạch bằng sắc ký thẩm thấu gel, nếu cần ^[6].

Tiêu chuẩn này quy định chi tiết các phương pháp M, N và P để chiết và làm sạch các mẫu thực phẩm có nguồn gốc từ thực vật. Một số dung môi có các thể tích khác nhau được dùng để chiết. Các kỹ thuật làm sạch đã được liệt kê như chiết phân đoạn lỏng-lỏng, sắc ký lỏng trên các chất hấp phụ khác nhau và sắc ký thẩm thấu gel.

Bảng 4, Bảng 6, Bảng 7 và Bảng 8 cung cấp các cặp nền mẫu/thuốc bảo vệ thực vật đã được nghiên cứu công tác thử nghiệm liên phòng và danh mục khả năng áp dụng của phương pháp đối với các loại thuốc bảo vệ thực vật khác nhau được đưa ra cho từng phương pháp, khi có thể.

2 Tài liệu viện dẫn

Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có).

...

TCVN 8424-3:2019, Thực phẩm có nguồn gốc từ thực vật - Phương pháp xác định đa dư lượng thuốc bảo vệ thực vật bằng sắc ký khi hoặc sắc ký lỏng-phổ khối lượng hai lần - Phần 3: Phương pháp xác định và phép thử khẳng định.

3 Nguyên tắc

Như đã nêu trong lời giới thiệu, tùy từng trường hợp cụ thể, có thể thay đổi thiết bị sử dụng, điều kiện chiết, làm sạch và điều kiện sắc ký để nâng cao hiệu năng của phương pháp. Những điều chỉnh đó phải được lập thành văn bản rõ ràng và được chứng minh cho kết quả phù hợp.

Dư lượng thuốc bảo vệ thực vật được chiết ra khỏi mẫu bằng cách sử dụng các dung môi thích hợp, sao cho thu được hiệu quả chiết tối đa dư lượng thuốc bảo vệ thực vật và giảm tối thiểu các chất chiết cùng có thể làm tăng độ nhiễu trong phép xác định. Loại bỏ tất cả các chất gây nhiễu ra khỏi dịch chiết mẫu để thu được dung dịch chứa dư lượng thuốc bảo vệ thực vật chiết được trong dung môi thích hợp cho việc kiểm tra định lượng bằng phương pháp xác định đã chọn.

4 Yêu cầu chung: Tóm tắt các quy trình

4.1 Chiết

Quy trình chiết được nêu trong Bảng 1.

Bảng 1 - Quy trình chiết

Phương pháp

...

Thể tích dung môi (V_s)

Tỷ lệ M_s/V_s

g/ml

100

Axeton: 200

1/2

...

100 ^a

Axeton: 200

1/2

Etyl axetat: 20

1/2

^a Chỉ áp dụng nếu hàm lượng nước của nền mẫu lớn hơn 70 %.

4.2 Làm sạch

...

Các quy trình chiết phân đoạn lỏng-lỏng được nêu trong Bảng 2.

Bảng 2 - Chiết phân đoạn lỏng-lỏng

Phương pháp

Phần dịch chiết

Thể tích nước được thêm vào

Thể tích dung môi

Tỷ lệ

(A_E)

...

(V_s)

A_E/V_w

...

200

- ^a

200

x^a

100

- ^a

^a Phụ thuộc vào hàm lượng nước của nền mẫu.

Hai kỹ thuật chiết phân đoạn lỏng-lỏng được khuyến nghị:

...

- không bổ sung nước (phương pháp M).

4.2.2 Cột sắc ký hấp phụ

Các phương pháp: M, N với các chất hấp phụ khác nhau: silica gel, than, Florisil®, được sử dụng ở dạng tinh khiết hoặc hỗn hợp.

4.2.3 Sắc ký thẩm thấu gel với cột BioBeads® S-X 32)

Phương pháp N kết hợp với phương pháp P, nếu cần.

5 Phương pháp M: Chiết bằng axeton và chiết phân đoạn lỏng-lỏng bằng diclometan/ dầu nhẹ, làm sạch trên cột Florisil®, nếu cần

5.1 Nguyên tắc

Cắt nhỏ phần mẫu thử rồi đồng hóa trong axeton và lọc phần mẫu đồng nhất. Chiết một phần dịch lọc bằng hỗn hợp dầu nhẹ và diclometan, sau đó chiết bằng diclometan. Pha hữu cơ có thể được bơm trực tiếp không cần làm sạch vào máy sắc ký khí có detector thích hợp hoặc tinh sạch trên cột Florisil®. Các hỗn hợp của dietyl ete và dầu nhẹ (phương pháp M₁) hoặc hỗn hợp của diclometan, dầu nhẹ và axetonitril (phương pháp M₂) được sử dụng để rửa giải các chất phân tích ra khỏi cột Florisil®. Dịch rửa giải được cô đặc để kiểm tra bằng sắc ký khí.

5.2 Thuốc thử

...

Sử dụng tất cả các thuốc thử có độ tinh khiết thích hợp để phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật và theo Điều 4 của TCVN 8424-1:2019.

5.2.2 Axeton.

5.2.3 Dầu nhẹ, có nhiệt độ sôi trong khoảng từ 40 °C đến 60 °C.

5.2.4 Natri clorua

Được nung ở 500 °C trang ít nhất 4 h, để nguội rồi bảo quản trong chai có nắp đậy kín.

5.2.5 Diclometan

5.2.6 Axetonitril

5.2.7 Natri sulfat

Được nung ở 500 °C trong ít nhất 4 h, để nguội rồi bảo quản trong chai có nắp đậy kín.

...

Được hoạt hóa bằng cách gia nhiệt ở 130 °C đến 135 °C ít nhất 5 h, để nguội trong bình hút ẩm và chuyển sang bình có nắp đậy kín khí. Chất hấp phụ được xử lý này chỉ giữ được hoạt tính trong 4 ngày. Có thể được tái hoạt hóa bằng cách xử lý tương tự. Hoạt độ của chất hấp phụ cần được kiểm tra thường xuyên bằng cách rửa giải các chất chuẩn thuốc bảo vệ thực vật như mô tả trong phương pháp này.

5.2.9 Dietyl ete, không chứa peroxit, có chứa 2 % etanol (tỷ lệ thể tích)

5.2.10 Dung dịch rửa giải A: dietyl ete /dầu nhẹ với tỷ lệ 6:94 (phần thể tích)

5.2.11 Dung dịch rửa giải B: dietyl ete /dầu nhẹ với tỷ lệ 15:85 (phần thể tích)

5.2.12 Dung dịch rửa giải C: dietyl ete /dầu nhẹ với tỷ lệ 50:50 (phần thể tích)

5.2.13 Dung dịch rửa giải D: diclometan/dầu nhẹ với tỷ lệ 20:80 (phần thể tích)

5.2.14 Dung dịch rửa giải E: diclometan/dầu nhẹ/axetonitril với tỷ lệ 50:49 65:0 35 (phần thể tích)

5.2.15 Dung dịch rửa giải F: diclometan/dầu nhẹ/axetonitril với tỷ lệ 50:48 5:1 5 (phần thể tích)

5.3 Thiết bị, dụng cụ

...

5.3.1 Máy trộn tốc độ cao hoặc máy đồng hóa, có cốc trộn phù hợp.

5.3.2 Cột sắc ký, có van khóa bằng PTFE, đường kính trong 22 mm, dài 300 mm.

5.3.3 Bộ làm bay hơi dung môi3), Kuderna Danish hoặc loại tương đương.

5.4 Cách tiến hành

5.4.1 Chuẩn bị mẫu thử

Mẫu thử được cắt nhỏ và trộn kỹ để thu được các phần mẫu thử đồng nhất.

Nếu hàm lượng nước của mẫu nhỏ hơn 30 %, thì chỉnh đến khoảng 80 % bằng cách thêm nước.

CHÚ THÍCH: Hàm lượng nước của một số nông sản và thực phẩm thông thường được nêu trong Bảng A.1.

5.4.2 Chiết và chiết phân đoạn

...

Rót 80 ml (V_R1) dịch lọc vào phễu chiết 1 L có chứa 100 ml diclometan và 100 ml dầu nhẹ (5.2.3). Lắc 3 min và để yên cho tách lớp. Chuyển lớp nước phía dưới sang phễu chiết 1 L thứ hai. Làm khô lớp hữu cơ phía trên trong phễu chiết thứ nhất bằng cách cho đi qua lớp natri sulfat (5.2.7) dày 3 cm để trên bông thủy tinh đã rửa trong phễu 10 cm thu nhận vào bình cầu đáy tròn.

Cho 7 g natri clorua (5.2.4) vào pha nước và lắc 30 s cho đến khi natri clorua (5.2.4) hòa tan. Thêm 100 ml diclometan và lắc trong 3 min. Để cho tách lớp. Chuyển pha nước sang phễu chiết thứ ba và làm khô lại pha hữu cơ trên cùng loại natri sulfat. Cho vào phễu chiết thứ ba này 100 ml diclometan và lắc 3 min, để cho tách pha rồi loại bỏ pha nước và làm khô pha diclometan trên cùng lớp natri sulfat. Rửa natri sulfat bằng 50 ml diclometan và cô đặc tất cả các pha hữu cơ đến 2 ml. Thêm 100 ml dầu nhẹ, cô đặc lại đến 2 ml và lặp lại cho đến khi hết hẳn diclometan. Thêm 20 ml axeton và cô đặc lại đến 2 ml (V_end). Phần cô đặc này có thể được bơm trực tiếp vào máy sắc ký khi được trang bị HECD (detector Hall), NPD hoặc FPD (phương pháp M).

Trong một số trường hợp, nên có bước làm sạch khi xác định bằng ECD: phương pháp M₁ hoặc M₂. Để tinh sạch, cần cô đặc dịch chiết mẫu đến 1 ml bằng axeton (thay vì 2 ml) và được pha loãng bằng dầu nhẹ đến 10 ml.

5.4.3 Làm sạch

5.4.3.1 Phương pháp M₁

Đặt một nút bông dưới đáy cột sắc ký (5.3.2) và rót dầu nhẹ (5.2.3) đến 20 cm. Đổ 20 g Rorisil® (5.2.8) và gõ thành cột để nén chất hấp phụ. Phủ lên lớp trên cùng của chất hấp phụ một lớp natri sulfat (5.2.7) dày từ 1 cm đến 2 cm.

Rửa chất hấp phụ bằng khoảng 30 ml dầu nhẹ. Đặt bình làm bay hơi dưới cột để thu lấy dịch rửa giải. Chuyển dịch chiết sang cột để tinh sạch như mô tả trong 5.4.2, cho chảy qua cột với tốc độ không quá 5 ml/min. Tráng rửa vật chứa hai lần, mỗi lần dùng 5 ml dầu nhẹ, cho nước tráng rửa vào cột, tráng rửa sạch thành cột sắc ký bằng các lượng nhỏ dầu nhẹ và rửa giải với tốc độ 5 ml/min bằng 200 ml dung dịch rửa giải A (5.2.10).

Rửa giải tiếp bằng 200 ml dung dịch rửa giải B (5.2.11) cho vào một bình thu nhận riêng rẽ và cuối cùng rửa giải bằng 200 ml dung dịch rửa giải C (5.2.12). Cô đặc từng dịch rửa giải thu được đến một thể tích xác định thích hợp, ví dụ: 2 ml (V_end) để kiểm tra bằng GC.

5.4.3.2 Phương pháp M₂

...

Rửa giải tiếp bằng 200 ml dung dịch rửa giải E (5.2.14) cho vào một bình thu nhận riêng rẽ và cuối cùng rửa giải bằng 200 ml dung dịch rửa giải F (5.2.15). Cô đặc từng dịch rửa giải để thu được thể tích xác định thích hợp, ví dụ: 2 ml (V_end) để kiểm tra bằng GC.

5.5 Sắc ký khí

Sử dụng hệ thống sắc ký khí thích hợp để xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm halogen hữu cơ, phospho hữu cơ và nitơ hữu cơ.

Bơm phần dịch rửa giải (V_i) thu được trong 5.4.2, 5.4.3 1 hoặc 5.4.3 2 vào máy sắc ký khí.

5.6 Tính dư lượng

Dư lượng, R, của chất phân tích đã nhận diện, tính bằng milligam trên kilogam theo Công thức (1):

(1)

...

V_EX

là lượng axeton được bổ sung vào bước chiết 5.4.2;

f₁

là hệ số có thể tích do việc trộn axeton với nước có trong phần mẫu thử (V_water). Giá trị f₁ điển hình là 0,90;

V_water

là lượng nước có trong phần mẫu thử. Tham khảo các tài liệu về thành phần thực phẩm về hàm lượng nước trung bình. Một số ví dụ về hàm lượng nước có trong nông sản và rau được nêu trong Bảng A.1;

V_end

là thể tích dung dịch rửa giải cuối cùng thu được trong 5.4.2, 5.4.3.1 hoặc 5.4.3.2;

W_St

...

F_A

là diện tích pic thu được từ dịch chiết cuối cùng;

V_R1

là phần thể tích V_EX được sử dụng để chiết phân đoạn trong 5.4.2;

V_i

là phần thể tích V_end được bơm vào máy sắc ký khí;

là khối lượng phần mẫu thử, tính bằng gam (g);

F_St

...

6 Phương pháp N: Chiết bằng axeton, chiết phân đoạn lỏng-lỏng bằng diclometan hoặc xyclohexan/etyl axetat, làm sạch bằng thẩm thấu gel và sắc ký silica gel

6.1 Nguyên tắc

Cắt nhỏ phần mẫu thử rồi đồng hóa trong axeton sau khi bổ sung nước, tùy thuộc vào hàm lượng nước có sẵn trong mẫu để đảm bảo tỷ lệ của axeton và nước là 2:1 (phần thể tích). Lọc dịch đã đồng hóa. Phần dịch đã lọc được bão hòa với natri clorua rồi được pha loãng bằng diclometan, để tách phần nước dư. Cách khác, bổ sung natri clorua, hỗn hợp của etyl axetat và xyclohexan vào dịch đã đồng hóa và trộn mạnh hỗn hợp.

Pha hữu cơ được cô đặc và làm sạch bằng sắc ký thẩm thấu gel (GPC) trên Bio-Beads S-X3® (gel polystyren) sử dụng hỗn hợp của etyl axetat và xyclohexan làm chất rửa giải. Phần có chứa dư lượng được cô đặc và phân tích trực tiếp bằng sắc ký khi sử dụng detector chọn lọc nitơ hoặc phospho, detector quang phổ ngọn lửa hoặc máy đo phổ khối lượng. Sau khi trao đổi dung môi, phần tương tự có thể được sử dụng để xác định bằng LC-MS/MS. Đối với các phép phân tích sử dụng detector bắt giữ điện từ và trong một số trường hợp sử dụng detector chọn lọc nitơ có thể cần phải làm sạch thêm trên cột silica gel nhỏ. Trong bước làm sạch này, các loại thuốc bảo vệ thực vật được tách ra trong vài phân đoạn, do đó cung cấp thêm thông tin cho việc nhận dạng.

6.2 Thuốc thử

6.2.1 Yêu cầu chung

Sử dụng tất cả các thuốc thử có độ tinh khiết thích hợp để phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật và theo Điều 4 của TCVN 8424-1:2019.

6.2.2 Axeton

6.2.3 Diclometan

...

6.2.5 Xyclohexan

6.2.6 Hỗn hợp rửa giải GPC: xyclohexan/etyl axetat với tỷ lệ 1:1 (phần thể tích)

6.2.7 n-Hexan

6.2.8 Isooctan

6.2.9 Toluen

6.2.10 Nước, dùng cho sắc ký.

6.2.11 Metanol.

6.2.12 Axit axetic băng, để chuẩn bị dung dịch axlt axetic 0,1 % trong nước.

6.2.13 Chất rửa giải 1: n-hexan/toluen với tỷ lệ 65:35 (phần thể tích)

...

6.2.15 Chất rửa giải 3: toluen/axeton với tỷ lệ 95:5 (phần thể tích)

6.2.16 Chất rửa giải 4: toluen/axeton với tỷ lệ 80:20 (phần thể tích)

6.2.17 Chất rửa giải 5: axeton

6.2.18 Natriclorua

Nung ở nhiệt độ 500 °C ít nhất 4 h, để nguội và bảo quản trong chai có nắp đậy kín.

6.2.19 Natri sulfat, dạng bột

Nung ở nhiệt độ 500 °C ít nhất 4 h, để nguội và bảo quản trong chai có nắp đậy kín.

6.2.20 Hỗn hợp muối: natri sulfat/natri clorua với tỷ lệ 1:1 (phần khối lượng)

6.2.21 Celite® 5454)

...

Làm nóng silica gel ít nhất 5 h ở 130 °C, để nguội trong bình hút ẩm và bảo quản trong vật chứa có nắp đậy kín để trong bình hút ẩm. Cho 1,5 ml nước chảy từng giọt từ buret vào 98,5 g silica gel khô đựng trong bình nón 300 ml (có khớp nối mài), trong khi xoay bình liên tục. Đậy ngay nắp bình bằng nút mài rồi lắc mạnh trong 5 min cho đến khi hết các mảng vón cục, sau đó cho lắc tiếp 2 h trên máy lắc cơ học và bảo quản trong vật chứa có nắp đậy kín.

6.2.23 Bông thủy tinh, đã được làm sạch kỹ bằng axeton

6.2.24 Bông vải, đã được làm sạch kỹ bằng axeton

6.2.25 BioBeads S-X3®, cỡ hạt từ 38 μm đến 75 µm (từ 200 mesh đến 400 mesh), hạt styren divinylbenzen 3 % liên kết ngang dùng cho sắc ký giới hạn kích thước, giới hạn khối lượng mol 2 000.

6.2.26 Giấy lọc, đường kính 6 cm và 13,5 cm, tốc độ lọc nhanh, đã được chiết kỹ bằng axeton.

6.3 Thiết bị, dụng cụ

Sử dụng thiết bị, dụng cụ của phòng thử nghiệm như trong TCVN 8424-1 và cụ thể như sau:

6.3.1 Máy trộn tốc độ cao hoặc máy đồng hóa, có cốc trộn thích hợp.

6.3.2 Bộ làm bay hơi dung môi, ví dụ: bộ cô quay để giảm thể tích dịch chiết mẫu và cô đặc để chuẩn bị dịch chiết LC-MS/MS cuối cùng, hoặc loại tương tự.

...

6.3.4 Dụng cụ dùng cho GPC, ví dụ: GPC Autoprep 1001 hoặc 1002®5), được trang bị cột sắc ký, đường kính trong 25 mm, dài 50 cm và các vòng bơm mẫu 5 ml (V_R3); cột được nhồi 50 g resin Bio- Beads S-X3®, đã được làm trương nở qua đêm trong hỗn hợp dịch rửa giải GPC, cột cao khoảng 32 cm, đã được nhồi như trong 6.4.3.2.

6.3.5 Cột sắc ký, có đầu thoát được mở rộng, đường kính trong 7 mm, dài 230 mm.

6.4 Cách tiến hành

6.4.1 Chiết

6.4.1.1 Yêu cầu chung

Hàm lượng nước trung bình của một số nông sản và thực phẩm được nêu trong Phụ lục A.

6.4.1.2 Nguyên liệu thực vật và các loại thực phẩm khác có hàm lượng nước trên 70 g/100 g

Dùng máy trộn (6.3.1) đồng hóa 100 g (m) phần mẫu đã xay có hàm lượng nước là x g/100 g với (100 -x) g nước và 200 ml axeton trong 3 min.

6.4.1.3 Nguyên liệu thực vật có hàm lượng nước thấp

...

6.4.2 Chiết phân đoạn

6.4.2.1 Chiết phân đoạn bằng diclometan

Thêm 10 g Celite® 545 và đồng hóa lại trong 10 s.

Lọc dịch đã đồng hóa thu được trong 6.4.1.2 hoặc 6.4.1.3 qua giấy lọc nhanh (6.2.26) đặt trong phễu Buchner, có hút chân không nhẹ, cho đến khi thu được nhiều hơn 200 ml dịch lọc.

Để tránh hao hụt dung môi do chân không mạnh, thi nên sử dụng chân không thấp. Không để bánh lọc hút khô.

Đong lấy 200 ml dịch lọc (V_R1) trong ống đong và chuyển sang phễu chiết 500 ml. Thêm 20 g natri clorua (6.2.18) và lắc mạnh trong 3 min. Thêm tiếp 100 ml diclometan (6.2.3), lắc trong 2 min, sau đó để yên trong khoảng 10 min để cho tách pha. Loại bỏ pha nước phía dưới. Thu lấy pha hữu cơ cho vào bình cầu và thêm khoảng 25 g natri sulfat (6.2.19), để yên trong khoảng 30 min, thường xuyên xoay bình, rồi sau đó lọc qua một nút bông vải (6.2.24) có lớp natri sulfat dày 3 cm đặt trong phễu. Thu lấy phần dịch lọc cho vào bình cầu 500 ml đáy tròn và tráng phễu chiết cùng với bộ lọc hai lần mỗi lần dùng 20 ml etyl axetat (6.2.4). Cô đặc dung dịch đến 2 ml trên bộ cô quay (6.3.2). Loại hết các vết dung môi cuối cùng bằng dòng nitơ nhẹ.

6.4.2.2 Chiết phân đoạn bằng xyclohexan/etyl axetat

Thêm 35 g natri clorua (6.2.18) và chính xác 100 ml hỗn hợp rửa giải GPC (6.2.6) vào dịch đã đồng hóa thu được trong 6.4.1.2 hoặc 6.4.1.3 và đồng hóa lại trong 1 min. Khi có tách pha rõ, thu lấy pha hữu cơ phía trên. Trường hợp tách pha chưa đầy đủ hoặc chưa tách pha (hơn 30 min) thì cho ly tâm hỗn hợp. Đong chính xác 200 ml (V_R1) pha hữu cơ vào ống đong chia độ và lọc lượng này cùng với khoảng 100 g sulfat natri (6.2.19) qua nút bông vải (6.2.24) đặt trong phễu. Thu lấy phần dịch lọc vào bình cầu đáy tròn 500 ml, tráng ống đong chia độ và phễu chiết bốn lần mỗi lần khoảng 20 ml hỗn hợp rửa giải GPC. Cô đặc hỗn hợp dịch lọc (không đề khô) sử dụng bộ cô quay (6.3.2).

6.4.3 Làm sạch bằng sắc ký thẩm thấu gel

...

Trong trường hợp chiết không dùng GPC là đủ sạch để thu được sắc ký đồ không bị nhiễu đáng kể do nền mẫu thì có thể bỏ qua bước làm sạch bằng GPC. Tuy nhiên, các dữ liệu xác nhận theo 6.8 đã thu được với GPC. Các kiểu loại và kích thước khác của cột GPC được mô tả trong 6.3.4 có thể được sử dụng nếu các điều kiện tương ứng phù hợp và nếu cho kết quả tương đương.

6.4.3.2 Cột nhồi thẩm thấu gel

Để Bio-Beads® (khoảng 50 g) trương nở qua đêm trong hỗn hợp rửa giải GPC (6.2.6). Sau đó rót tất cả huyền phù cùng một lúc vào cột (dung tích khoảng 180 ml). Ngay sau khi lớp nền gel đã ổn định (không có bọt khí) đến mức xấp xỉ 32 cm, thì chèn pittông, hạ thấp xuống đến mức nền và xoay vào vị trí. Nếu lớp nền gel bị lún xuống mức thấp hơn sau khi thao tác kéo dài, thì phải chỉnh pittông cho phù hợp (theo hướng dẫn của nhà sản xuất).

6.4.3.3 Kiểm tra thể tích rửa giải

Đối với mỗi cột thẩm thấu gel trước khi sử dụng lần đầu, cần phải kiểm tra các điều kiện rửa giải trên vài chất phân tích có khoảng thể tích rửa giải thấp hơn và cao hơn (xem Bảng 3) và trên các dịch chiết thô thích hợp. Để thực hiện điều này, nạp đầy các vòng mẫu bằng dịch chiết thô hoặc hỗn hợp các dung dịch chuẩn, rửa giải theo mô tả trong 6.4.3.4 và xác định bằng phương pháp phân tích thích hợp mặc dù các chất phân tích được thêm vào đã được thu hồi hoàn toàn hoặc các chất gây nhiễu sinh ra do các tạp chất chưa được tách. Tương tự, phải kiểm tra các chất phân tích sau khi đã qua thời gian sử dụng dài.

CHÚ THÍCH: Thực tế cho thấy rằng, một số các nền mẫu có thể cho thấy hiệu quả hấp phụ ngẫu nhiên của một số chất phân tích nhất định trên resin Bio-Beads® và có thể cho các kết quả âm tính giả hoặc dương tính giả.

6.4.3.4 Làm sạch dịch chiết thô

Thêm chính xác 7,5 ml etyl axetat vào phần dịch chiết thô cô đặc thu được trong 6.4.2.1 hoặc 6.4.2.2 và hòa tan bằng cách xoay nhẹ. Thêm khoảng 5 g hỗn hợp muối (6.2.20) để hút hết phần nước còn lại, xoay bình lần nữa và thêm chính xác 7,5 ml xyclohexan để có tổng thể tích là 15,0 ml (V_R2). Lắc khoảng 20 s, để cho hỗn hợp muối lắng xuống, lọc qua giấy lọc nhanh và bơm 5 ml (V_R3) dịch lọc này vào một vòng mẫu của sắc ký thẩm thấu gel.

Rửa giải cột thẩm thấu gel bằng hỗn hợp rửa giải GPC với tốc độ dòng 5,0 ml/min. Bộ phận chuyển mạch của máy sắc ký thẩm thấu gel được điều chỉnh để kiểm tra thể tích dịch rửa giải. Việc cài đặt này phụ thuộc vào các thuốc bảo vệ thực vật cần phân tích. Việc cài đặt điển hình như sau (xem thêm Bảng 3):

...

- chế độ thu nhận chuyển sang 15 min để thu được 75 ml;

- chế độ rửa chuyển sang 2 min để tráng cột bằng 10 ml

Cô đặc thể tích thu được đến khoảng 1 ml trên bộ cô quay (quay chậm, chỉ ngâm nhẹ bình cầu) dùng pipet cho lượng thể tích cô đặc này vào ống nghiệm chia độ được đậy kín bằng nút mài tráng bình cô quay bằng etyl axetat và pha loãng bằng etyl axetat đến 5,0 ml (VR4). Việc bổ sung etyl axetat này không được bỏ qua để đảm bảo hòa tan hoàn toàn dư lượng.

Để xác định các dư lượng thuốc bảo vệ thực vật riêng rẽ, thì có thể cài đặt dụng cụ để thu được một lượng nhỏ hơn, phù hợp với chất phân tích tương ứng, theo các giá trị nêu trong Bảng 3.

6.4.4 Làm sạch bổ sung để xác định GC: Sắc ký trên cột nhỏ silica gel

6.4.4.1 Chuẩn bị cột

Nhồi cột sắc ký (6.3.5) theo thứ tự sau: nút bông thủy tinh (6.2.23), 1,0 g silica gel đã khử hoạt tính (6.2,22), lớp natri sulfat (6.2,19) dày từ 5 mm đến 10 mm, nút bông thủy tinh. Trước khi sử dụng, tráng cột bằng 5 ml n-hexan và loại bỏ dịch rửa giải. Ngay sau khi n-hexan rút khỏi đỉnh lớp silica gel, cho dung dịch mẫu lên đỉnh cột, theo 6.4.4.3.

6.4.4.2 Kiểm tra hiệu quả chiết của silica gel

Cho lên cột đã được rửa sơ bộ trong 6.4.4.1 theo thứ tự sau: 1,0 ml dung dịch chứa 0,05 µg/ml HCB, 0,10 µg/ml lindan, 0,20 µg/ml heptaclo epoxit, 0,25 µg/ml α-endosulfan, 0,25 µg/ml dieldrin và 1,25 µg/ml endosulfan sulfat trong n-hexan. Với điều kiện lả hoạt tính của silica gel được điều chỉnh đúng, các chất phân tích được bổ sung có mặt sau khi rửa giải như trong 6.4.4.3 và sử dụng phép phân tích sắc ký khí bắt giữ điện tử trong các phân đoạn sau đây:

...

- dịch rửa giải 2: Heptaclo epoxit (lượng còn lại), α-endosulfan (lượng còn lại), endosulfan sulfat (từ 95 % đến 100 %), dieldrin (100 %).

6.4.4.3 Phân đoạn dịch chiết mẫu

Dùng pipet lấy 2,5 ml (V_R5) dung dịch thu được trong 6.4.3.4 cho vào bình cầu đáy tròn cổ dài và thêm 5 ml isooctan. Cho bay hơi cẩn thận đến 1 ml (không để đến khô) trên bộ cô quay (quay chậm, chỉ nhúng nhẹ bình cầu). Nếu dung dịch này vin còn etyl axetat, thì lạl thêm isooctan và làm bay hơi.

Dùng pipet lấy dung dịch còn lạl sau khi bay hơi cho lên cột silica gel đã rửa sơ bộ trong 6.4.4.1 và tráng rửa bằng khoảng 1 ml n-hexan. Sau đó tráng rửa bình bằng 2 ml chất rửa giải 1 (6.2.13), ngay khi hexan đã rút khỏi đỉnh cột nhồi, cho nước tráng lên cột. Lúc này thu lấy dịch rửa giải vào ống nghiệm chia độ. Sau đó tiếp tục rửa giải bằng 6 ml chất rửa giải 1 và đổ đầy chất rửa giải 1 vào ống thu nhận đến 10 ml (V_end). Dung dịch thu được này là dịch rửa giải 1.

Tráng rửa bình cầu đã được sử dụng để làm bay hơi dịch rửa giải GPC bằng 2 ml toluen (chất rửa giải 2) (6.2.14). Sau đó cho dịch rửa này sang cột. Thu lấy dung dịch vào ống nghiệm chia độ thứ hai và rửa giải bằng 6 ml toluen. Đổ đầy toluen vào ống thu nhận thứ hai đến 10 ml (V_end) để thu được dịch rửa giải 2. Tiếp tục chạy sắc ký theo cùng quy trình được thực hiện liên tục với chất rửa giải 3 (6.2.15), chất rửa giải 4 (6.2.16) và axeton (chất rửa giải 5) (6.2.17). Mỗi lần, tráng rửa bình bằng 2 ml, rửa giải tiếp bằng 6 ml và pha loãng dịch rửa giải đến 10 ml (V_end) để thu được dịch rửa giải 3, 4 và 5. Một ví dụ về sự phân bổ các chất phân tích trong các dịch rửa giải khác nhau được nêu trong Bảng 3. Các thuốc bảo vệ thực vật có thể được tinh sạch bằng phương pháp nêu trong Bảng 3.

Bảng 3 - Dải thể tích rửa giải trong sắc ký thẩm thấu gel và sự phân bố các chất phân tích trong các dịch rửa giải từ cột sắc ký silica gel

Chất phân tích

Dải thể tích rửa giải GPC

...

1 ^t

2 ^u

3 ^v

4 ^w

5 ^x

3,4,5-Trimethacarb

từ 100 đến 140

...

Acephate

từ 115 đến 145

...

từ 120 đến 220

Aclonifen

từ 115 đến 145

...

Acrinathrin ^a

từ 70 đến 120

...

Alachlor

từ 125 đến 150

Aldrin

từ 120 đến 150

...

Ametryn

từ 115 đến 190

...

Amidithion

từ 115 đến 145

Anilazine ^b

...

Anthraquinone

từ 145 đến 185

...

Atrazine

từ 110 đến 135

...

từ 130 đến 160

Azinphos-metyl

từ 145 đến 180

...

Azoxystrobin

từ 120 đến 155

...

Bendiocarb

từ 130 đến 160

Benfluralin

từ 100 đến 130

...

Bensulfuron-metyl

từ 100 đến 150

...

Benthiavalicarb-isopropyl ^a

từ 60 đến 110

Benzoylprop-etyl

...

Bifenox

từ 115 đến 150

...

Bifenthrin ^a

từ 090 đến 120

...

từ 100 đến 130

Bitertanol

từ 100 đến 130

...

Boscalid

từ 105 đến 130

...

Bromacil ^c

từ 105 đến 140

Bromophos

từ 120 đến 150

...

Bromophos-etyl

từ 110 đến 140

...

Bromopropylate

từ 095 đến 135

Bromoxynil octanoate

...

Buprofezin ^a

từ 90 đến 120

...

Butocarboxim-sulfoxide

từ 120 đến 160

...

từ 105 đến 140

Camphechlor (Toxaphene)

từ 110 đến 150

...

Captafol ^d

từ 120 đến 150

...

Captan ^d

từ 120 đến 150

Carbaryl

từ 125 đến 170

...

Carbendazim

từ 135 đến 200

...

Carbofuran

từ 125 đến 155

Carbophenothion

...

Carbophenothion-metyl

từ 120 đến 160

...

Chinomethionat

từ 170 đến 200

...

từ 170 đến 200

Chlorbenside ^e

từ 120 đến 155

...

Chlorbenside sulfone

từ 130 đến 160

...

α-Chlordane

từ 110 đến 140

γ-Chlordane

từ 100 đến 130

...

Chlorfenapyr ^a

từ 085 đến 105

...

Chlorfenprop-metyl

từ 125 đến 150

Chlorfenson

...

Chlorfenvinphos

từ 110 đến 140

...

Chlorfluazuron ^a

từ 80 đến 110

...

từ 130 đến 155

Chlormephos

từ 115 đến 145

...

Chlorobenzilate

từ 100 đến 135

...

Chloroneb

từ 145 đến 170

Chloropropylate

từ 100 đến 135

...

Chlorsulfuron

từ 110 đến 150

...

Chlorothalonil

từ 125 đến 165

Chlorotoluron

...

Chloroxuron

từ 130 đến 155

...

Chlorpropham

từ 110 đến 135

...

từ 110 đến 140

Chlorpyrifos-metyl

từ 120 đến 150

...

Chiortbal-dimetyl

từ 135 đến 160

...

Chlorthiophos

từ 115 đến 155

Cinosulfuron

từ 100 đến 150

...

Clodinafop-propargyl

từ 100 đến 125

...

Clofentezine ^a

từ 85 đến 190

Clomazone

...

Cloquintocet-1 -mexyl

từ 105 đến 130

...

Coumaphos

từ 135 đến 165

...

từ 105 đến 145

Crufomate

từ 100 đến 140

...

Cyanazine

từ 110 đến 135

...

Cyanofenphos

từ 115 đến 145

Cyanophos

từ 115 đến 150

...

Cycloate

từ 125 đến 150

...

Cyfluthrin ^a

từ 090 đến 120

λ-Cyhalothrin^a

...

Cymoxanil ^f

từ 110 đến 130

...

Cypermethrin

từ 100 đến 135

...

từ 100 đến 120

Cyprodinil

từ 105 đến 135

...

o,p'-DDD

từ 110 đến 140

...

p,p'-DDD

từ 100 đến 140

o,p'-DDE

từ 120 đến 150

...

p,p'-DDE

từ 120 đến 150

...

o,p'-DDT

từ 120 đến 150

p,p'-DDT

...

DEF ^g

từ 115 đến 135

...

Deltamethrin

từ 100 đến 135

...

từ 125 đến 155

Demeton-S-metyl sulfone

từ 120 đến 150

...

Demeton-S sulfone ^h

từ 115 đến 140

...

Demeton-S sulfoxide ⁱ

từ 140 đến 170

N-Desethyl-pirimiphos-metyl

từ 120 đến 155

...

Desmedipham

từ 100 đến 120

...

Dialifos

từ 110 đến 140

Di-allate

...

Diazinon

từ 105 đến 135

...

Dìchlobenil

từ 125 đến 155

...

từ 110 đến 140

Dichlofluanid ^l

từ 100 đến 140

...

p,p'-Dichlorobenzophenone ^k

từ 125 đến 155

...

Dichlorvos

từ 115 đến 140

Diclofop-metyl

từ 135 đến 165

...

Dicloran

từ 105 đến 145

...

Dicofol ^l

từ 100 đến 150

Dicrotophos

...

Dieldrin

từ 120 đến 150

...

Diethofencarb

từ 105 đến 130

...

từ 110 đến 140

Diflubenzuron

từ 110 đến 135

...

Diflufenican

từ 105 đến 125

...

Dimefox

từ 120 đến 155

Dimethachlor

từ 135 đến 165

...

Dimethoate

từ 120 đến 150

...

Dimetilan

từ 120 đến 180

Dimoxystrobin ^a

...

Dinitramine ^m

từ 105 đến 130

...

Dinobuton

từ 110 đến 140

...

từ 100 đến 120

Dioxathion

từ 110 đến 140

...

Diphenylamin

từ 130 đến 160

...

Disulfoton ⁿ

từ 115 đến 150

Disulfoton sulfone

từ 110 đến 140

...

Disulfoton sulfoxide

từ 120 đến 150

...

Ditalimfos

từ 120 đến 150

Diuron

...

Edifenphos

từ 130 đến 160

...

α-Endosulfan

từ 110 đến 150

...

từ 110 đến 150

Endosulfan sulfate

từ 100 đến 140

...

Endrin

từ 130 đến 160

...

EPN

từ 135 đến 160

Ethiofencarb-sulfone

từ 110 đến 170

...

Ethion

từ 100 đến 140

...

Ethofumesate

từ 110 đến 135

Ethoprophos

...

Etrimfos

từ 105 đến 140

...

Famophos

từ 125 đến 155

...

từ 95 đến 115

Fenamidone

từ 105 đến 140

...

Fenamiphos

từ 105 đến 140

...

Fenarimol

từ 125 đến 150

Fenazaquin

từ 105 đến 145

...

Fenchlorphos

từ 120 đến 150

...

Fenhexamid

từ 100 đến 140

Fenitrothion

...

Fenoxycarb

từ 120 đến 145

...

Fenpiclonil

từ 100 đến 130

...

từ 100 đến 120

Fenpropimorph

từ 90 đến 120

...

Fenson

từ 130 đến 160

...

Fensulfothion

từ 120 đến 150

Fenthion

từ 130 đến 160

...

Fenvalerate

từ 105 đến 135

...

Fluazifop-P-butyl

từ 105 đến 130

Flubenzimine ^{j a}

...

Fluchloralin

từ 100 đến 120

...

Flucythrinat ^a

từ 090 đến 120

...

từ 090 đến 120

Fluoroglycofen-etyl ^a

từ 090 đến 115

...

Fluotrimazole

từ 100 đến 140

...

Fluquinconazol

từ 095 đến 125

Flurtamone ^a

từ 085 đến 105

...

Flusilazol

từ 105 đến 135

...

Flutriafol

từ 115 đến 135

Fluvalinate

...

Folpet

từ 140 đến 180

...

Fonofos

từ 120 đến 150

...

từ 120 đến 150

Fuberidazole ^m

từ 120 đến 160

...

Furathiocarb

từ 105 đến 135

...

Genite

từ 135 đến 165

Haloxyfop-ethoxyetyl

từ 70 đến 110

...

Haloxyfop-metyl

từ 100 đến 160

...

α-HCH

từ 120 đến 150

β-HCH

...

δ-HCH

từ 100 đến 130

...

ε-HCH

từ 105 đến 135

...

từ 110 đến 140

cis-Heptachlor epoxide

từ 125 đến 155

...

trans-Heptachlor epoxide

từ 125 đến 155

...

Heptenophos

từ 120 đến 150

Hexachlorobenzene

từ 140 đến 165

...

Hexaconazol

từ 105 đến 135

...

Hexaflumuron ^a

từ 70 đến 110

Hexythiazox

...

Imazalil ⁱ^m

từ 120 đến 150

...

Imidacloprid

từ 120 đến 160

...

từ 95 đến 120

lodofenphos

từ 120 đến 150

...

loxynil

từ 125 đến 155

...

Iprodione

từ 115 đến 145

Iprovalicarb ^a

từ 085 đến 110

...

Isobenzan

từ 105 đến 140

...

Isocarbamid

từ 130 đến 165

Isodrin

...

Isopro palin

từ 110 đến 135

...

Isoproturon

từ 115 đến 135

...

từ 100 đến 140

lodfenphos

từ 120 đến 150

...

δ-Keto-endrin

từ 135 đến 165

...

Kresoxim-metyl

từ 120 đến 155

Lenacil

từ 130 đến 160

...

Leptophos

từ 120 đến 150

...

Lindane (γ-HCH)

từ 110 đến 140

Linuron

...

Malaoxon

từ 110 đến 140

...

Malathion

từ 110 đến 140

...

từ 115 đến 145

Mecarbam

từ 105 đến 145

...

Mefenpyr-dietyl

từ 100 đến 130

...

Mepanipyrim

từ 110 đến 140

Mepronil

từ 110 đến 140

...

Mephosfolan

từ 140 đến 170

...

Merphos ^o

từ 125 đến 145

Metalaxyl

...

Metazachlor

từ 125 đến 150

...

Metconazol

từ 85 đến 115

...

từ 150 đến 180

Methacrifos

từ 125 đến 165

...

Methamidophos

từ 120 đến 150

...

Methidathion

từ 130 đến 165

Methiocarb

từ 120 đến 150

...

Methomyl

từ 95 đến 175

...

Methoprotryne

từ 115 đến 140

Methoxychlor

...

Metolachlor

từ 130 đến 160

...

Metolcarb

...

từ 90 đến 140

Metribuzin

từ 125 đến 150

...

Mevinphos

từ 120 đến 150

...

Mirex

từ 130 đến 160

Monocrotophos

từ 115 đến 140

...

Monolinuron

từ 125 đến 150

...

Morphothion

từ 130 đến 170

Naled ^p

...

Napropamid

từ 135 đến 165

...

Nicosulfuron

từ 100 đến 150

...

từ 115 đến 145

Nitrofen

từ 135 đến 165

...

Nìtrothal-isopropyl

từ 105 đến 135

...

Nuarimol

từ 130 đến 155

Octachlorodipropyl ether (S 421)

từ 110 đến 130

...

Omethoate

từ 140 đến 160

...

Oxadiazon

từ 115 đến 145

Oxadixyl

...

Oxamyl

từ 140 đến 165

...

Oxychlordane (Octachlor epoxide)

từ 100 đến 160

...

từ 135 đến 165

Paraoxon

từ 110 đến 140

...

Paraoxon-metyl

từ 140 đến 170

...

Parathion

từ 110 đến 140

Parathion-metyl

từ 120 đến 150

...

Penconazol

từ 110 đến 140

...

Pendimethalin

từ 125 đến 155

Pentachloroaniline

...

Pentachloroanisole

từ 125 đến 160

...

Pentachloro benzene

từ 125 đến 165

...

từ 115 đến 145

Perthane

từ 110 đến 140

...

Phenkapton

từ 115 đến 145

...

Phenmedipham

từ 100 đến 120

Phenthoate

từ 115 đến 150

...

Phorate ^a

từ 115 đến 145

...

Phosalone

từ 110 đến 140

Phosphamidon

...

Phoxim

từ 120 đến 150

...

Picoxystrobin

từ 100 đến 130

...

từ 100 đến 130

Pirimicarb

từ 130 đến 170

...

Pirimiphos-etyl

từ 100 đến 135

...

Pirimiphos-metyl

từ 105 đến 145

Prochloraz

từ 120 đến 150

...

Procymidone

từ 120 đến 150

...

Profenofos

từ 130 đến 155

Profluralin

...

Promecarb

từ 110 đến 135

...

Pnopachlor

từ 125 đến 150

...

từ 105 đến 130

Propham

từ 100 đến 180

...

Propiconazole

từ 120 đến 150

...

Propoxur

từ 110 đến 130

Propyzamide

từ 95 đến 125

...

Proquinazid

từ 95 đến 160

...

Prosulfocarb

từ 120 đến 145

Prosulfuron

...

Prothiofos

từ 105 đến 145

...

Pyrazophos

từ 110 đến 140

...

từ 100 đến 130

Pyridaben

từ 95 đến 125

...

Pyrifenox

từ 125 đến 165

...

Pyrimethanil

từ 140 đến 170

Pyriproxyfen

từ 105 đến 135

...

Quinalphos

từ 115 đến 155

...

Quinmerac

từ 115 đến 145

Quinoxyfen

...

Quintozene

từ 135 đến 165

...

Quizalofop-P-etyl

từ 110 đến 140

...

từ 120 đến 160

Resmethrine ^f

từ 100 đến 130

...

Salithion

từ 125 đến 165

...

Silthiofam

từ 90 đến 120

Simazine

từ 95 đến 135

...

Spinosyn A (Spinosad)

từ 75 đến 110

...

Spirodiclofen ^a

từ 80 đến 120

Spiroxamin ^r^,^a

...

strobane T

từ 125 đến 160

...

Sulfotep

từ 100 đến 130

...

từ 115 đến 155

Tebuconazol ^a

từ 90 đến 120

...

Tebufenpyrad

từ 105 đến 145

...

Tebutam

từ 110 đến 150

Teflubenzuron ^a

từ 90 đến 115

...

Tecnazene

từ 130 đến 160

...

Terbacil

từ 120 đến 145

Terbufos

...

Terbuthylazin

từ 105 đến 130

...

Terbutryn

từ 115 đến 175

...

từ 130 đến 160

Tetrachlorvinphos

từ 120 đến 140

...

Tetradifon

từ 120 đến 150

...

Tetramethrin

từ 120 đến 150

Tetrasul

từ 125 đến 155

...

Thiabendazol

từ 130 đến 160

...

Thiacloprid

từ 110 đến 180

Thiamethoxam

...

Thifensulfuron-metyl

từ 110 đến 150

...

Thiodicarb

từ 130 đến 180

...

từ 120 đến 150

Thiofanox-sulfoxide

từ 110 đến 150

...

Thionazin

từ 120 đến 150

...

Toldofos-metyl

từ 130 đến 165

Tolylfluanid ⁱ

từ 105 đến 135

...

Triadimefon

từ 100 đến 130

...

Triadimenol

từ 100 đến 130

Tri-allate

...

Triamiphos

từ 125 đến 160

...

Triasulfuron

từ 100 đến 150

...

từ 120 đến 140

Triazoxide

từ 165 đến 195

...

Trichlorfonⁱ

từ 100 đến 140

...

Trichloronat

từ 110 đến 140

Trifloxystrobin ^a

từ 90 đến 110

...

Triflumizol ^a

từ 85 đến 105

...

Trifluralin

từ 100 đến 130

Triflusulfuron-metyl ^a

...

Triform

...

Triticonazol

từ 100 đến 125

...

từ 100 đến 130

Zoxamid ^a

từ 85 đến 125

...

CHÚ THÍCH 1: Các con số trong bảng cho thấy mức thu hồi: 5 = trên 90 %; 4 = khoảng từ 60 % đến 90 %; 3 = khoảng từ 30 % đến 60 %; 2 = khoảng từ 10 % đến 30 %; 1 = nhỏ hơn 10 %; 0 = không thu hồi được.

CHÚ THÍCH 2: Có một số chất như ametryn, clofentezine, triflusulfuron-metyl, triazoxide, v.v...Có thể rửa giải rất chậm, do đó có thể xuất hiện trong những lần chạy tiếp theo nếu các thể tích "thu nhận" và "rửa" được chọn là rất thấp.

^a Giả sử rằng chất này rửa giải rất sớm trong GPC nên hao hụt độ thu hồi.

^b Chiết mẫu phân tích bằng cách bổ sung kali axetat, đối với GC, bơm một phần dung dịch mẫu có bổ sung axit axetic.

^c Chiều cao pic tùy thuộc vào dung môi.

^d Cột sắc ký khi đã được ổn định tốt.

...

^f Được phân tích bằng GC/MS.

^g Cũng từ Merphos.

^h Bơm dung dịch chuẩn trong 2 min sau khi bơm dung dịch mẫu.

ⁱ Độ thu hồi được cải thiện khi được rửa giải thêm bằng 8 ml axeton.

^j Chiết phần mẫu thử có bổ sung axit xitric và axit oxalic.

^k Sự phân hủy sản phẩm của dicofol.

^l Sự phân hủy p,p'-dichlorobenzophenone.

^m Đối với việc chuẩn bị mẫu, tiến hành tránh hoàn toàn ánh sáng.

ⁿ Sau sắc ký trên silica gel, quan sát được sulfoxld trong dịch rửa giải 5.

...

^p Khi chạy sắc ký trên silica gel, quan sát được các độ thu hồi khác nhau.

^q Một phần bị phân hủy trong quá trình chạy sắc ký trên silica gel.

^r Chất rửa giải 5 cần 12 ml axeton để rửa giải hoàn toàn chất phân tích này.

^s Silica gel dịch rửa giải: nếu không có dữ liệu, các chất thường được xác định trực tiếp từ dịch chiết GPC

^t Dịch rửa giải 1: n-Hexan-toluen với tỷ lệ 65:35 (phần thể tích).

^u Dịch rửa giải 2: toluen.

^v Dịch rửa giải 3: toluen-axeton với tỷ lệ 95:5 (phần thể tích).

^w Dịch rửa giải 4: toluen, axeton với tỷ lệ 80:20 (phần thể tích).

^x Dịch rửa giải 5: axeton.

...

Sử dụng hệ thống sắc ký khí thích hợp để xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm halogen hữu cơ, phospho hữu cơ và nitơ hữu cơ như trong TCVN 8424-3.

Bơm một lượng (V_i) các dịch rửa giải thu được trong 6.4.4.3 vào máy sắc ký khí. Đối với phép phân tích có detector phổ khối lượng, detector quang phổ ngọn lửa và detector ion hóa nhiệt, thì cũng có thể bơm một lượng (V_i) dung dịch thu được trong 6.4.3.4 (V_R4) vào máy sắc ký khí. Trong trường hợp này, không sử dụng cột nhỏ silica gel, trong Công thức (3) không sử dụng V_end và V_R5.

6.6 Sắc ký lỏng-phổ khối lượng hai lần (LC-MS/MS)

Sử dụng hệ thống LC-MS/MS thích hợp để xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật như mô tả trong TCVN 8424-3.

Bơm một lượng (V_i) dịch rửa giải thu được trong 6.4.3.4 (V_R4) vào LC-MS/MS dịch rửa giải GPC được hòa với hỗn hợp dung môi thích hợp cho HPLC. Do đó, hệ số pha loãng của bước trao đổi dung môi này tùy thuộc vào khối lượng mẫu có trong đó để đảm bảo nồng độ nền mẫu là không đổi trong dịch chiết cuối cùng cần bơm vào HPLC. Dữ liệu đánh giá xác nhận thu được với nồng độ nền mẫu là 0,585 g/ml. Để thu được nồng độ như vậy, thì sơ đồ pha loãng phụ thuộc vào khối lượng mẫu. Ví dụ về khối lượng mẫu khác nhau như sau:

Đối với phần mẫu thử 25 g, lấy một lượng 0,5 ml (V_R5) từ dịch rửa giải GPC thu được trong 6.4.3.4 (V_R4) và cho bay hơi đến khô bằng bộ cô quay dung môi. Thêm 0,5 ml metanol và cẩn thận hòa tan dư lượng bằng bể siêu âm, nhưng tránh làm bay hơi và làm nóng metanol. Sau khi hòa tan lại hoàn toàn thì thêm 0,5 ml dung dịch axit axetic 0,1 % (6.2.12) và trộn kỹ. Hệ số pha loãng (V_end/V_R5) trong 1 ml (V_end) dịch chiết cuối cùng thu được là 2.

Đối với phần mẫu thử 50 g, lấy một lượng 0,5 ml (V_R5) từ dịch rửa giải GPC thu được trong 6.4.3.4 (V_R4) và cho bay hơi đến khô bằng bộ cô quay dung môi. Thêm 1,0 ml metanol và cẩn thận hòa tan dư lượng bằng bể siêu âm, nhưng tránh làm bay hơi và làm nóng metanol. Sau khi hòa tan lại hoàn toàn thì thêm 1,0 ml dung dịch axit axetic 0,1 % (6.2.12) và trộn kỹ. Hệ số pha loãng (V_end/V_R5) trong 2 ml (V_end) dịch chiết cuối cùng thu được là 4.

Đối với phần mẫu thử 100 g, lấy một lượng 0,5 ml (V_R5) từ dịch rửa giải GPC thu được trong 6.4.3.4 (V_R4) và cho bay hơi đến khô bằng bộ cô quay dung môi. Thêm 2,0 ml metanol và cẩn thận hòa tan dư lượng bằng bể siêu âm, nhưng tránh làm bay hơi và làm nóng metanol. Sau khi hòa tan lại hoàn toàn thì thêm 2,0 ml dung dịch axit axetic 0,1 % (6.2.12) và trộn kỹ. Hệ số pha loãng (V_end/V_R5) trong 4 ml (V_end) dịch chiết cuối cùng thu được là 8.

CHÚ THÍCH: Tùy thuộc vào độ nhạy của hệ thống LC-MS/MS được sử dụng, mà hệ số pha loãng thích hợp có thể khác đi.

...

Dư lượng, R, của một chất phân tích đã được nhận biết, được biểu thị bằng miligam trên kilogam, tính theo Công thức (2):

(2)

Trong đó:

(3)

Trong đó:

là khối lượng của phần mẫu thử, tính bằng gam (g);

...

là thể tích của axeton và nước được thêm vào trong bước chiết 6.4.1.2 hoặc 6.4.1.3, cộng với nước có trong mẫu thử, tính bằng mililit (ml);

f₃

là hệ số co thể tích do việc trộn axeton với nước (tổng lượng nước thêm vào và nước có trong phần mẫu thử) trong 6.4.2.1 và hao hụt bổ sung của axeton trong pha nước khi chiết phân đoạn trong 6.4.2.2. Các giá trị điển hình f₃ là 0,98 đối với 6.4.2.1 và 0,95 đối với 6.4.2.2;

V_R1

là phần thể tích V_EX được sử dụng để chiết phân đoạn trong 6.4.2, tính bằng mililit (ml);

V_R2

là thể tích dung dịch còn lại sau khi cho bay hơi được chuẩn bị cho sắc ký thẩm thấu gel bằng phương pháp mô tả trong 6A3.4, tính bằng miliiit (ml);

V_R3

là phần thể tích V_R2 được bơm cho sắc ký thấm thấu gel (thể tích của vòng bơm mẫu), tính bằng mililit (ml);

...

là thể tích của dung dịch thu được sau sắc ký thẩm thấu gel bằng quy trình mô tả trong 6.4.3.4, tính bằng mililit (ml);

V_R5

là phần thể tích V_R4 được sử dụng cho sắc ký trong 6.4.4.3 hoặc được sử dụng trong bước hòa lạl trong 6.6, tính bằng mililit (ml);

V_End

là thể tích cuối cùng của dịch rửa giải thu được trong 6.4.4.3 hoặc thể tích cuối cùng thu được trong 6.6 sau khi hòa tan lại, tính bằng mililit (ml); End

V_i

là phần thể tích V_End hoặc thể tích V_R4 được bơm vào máy sắc ký khí hoặc thể tích V_end được bơm vào máy sắc ký lỏng tương ứng, tính bằng microlit (µl);

W_S_t

là lượng chất phân tích được bơm cùng với dung dịch chuẩn, tính bằng nanogam (ng);

...

là diện tích pic thu được từ V_i;

F_St

là chiều cao pic thu được từ W_St.

6.8 Nghiên cứu cộng tác

Các cặp nền mẫu và thuốc bảo vệ thực vật đã được nghiên cứu cộng tác [7] được nêu trong Bảng 4.

Bảng 4 - Các nền mẫu và thuốc bảo vệ thực vật được thử nghiệm bằng phương pháp N

Cà rốt

Khoai tây

...

Rau chân vịt

Cà chua

Dưa chuột

Quả có múi

Ngũ cốc

Các loại hạt, quả bơ

Đậu vàng

Nho khô

3,4,5-Trimethacarb

...

Acephate

...

Acetamiprid

...

Aclonifen

...

Acrinathrin

...

Aldrin

...

Ametryn

...

Atrazin

...

Azinphos-metyl

...

Azoxystrobin

...

Bendiocarb

...

Bensulfuron-metyl

...

Benthiavalicarb-isopropyl

...

Bifenthrin

...

Bitertanol

...

Boscalid

...

Bromacil

...

Bromophos

...

Bromopropylate

...

Bupirimat

...

Buprofezin

...

Butocarboxim-suifoxide

...

Butoxycarboxime

...

Caplah

...

Carbaryl

...

Carbendazim

...

Carbofuran

...

Chinomethionat

...

Chlorfenapyr

...

Chlorfenprop-metyl

...

Chlorfenvinphos

...

Chlorfluazuron

...

Chloridazon

...

Chlorsulfuron

...

Chlorothalonil

...

Chlorpropham

...

Chlorpyrifos

...

Chlozolinat

...

Cinosulfuron

...

Clodinafop-propargyl

...

Clofentenzine

...

Clomazone

...

Cloquintocet-1-mexyl

...

Cycloat

...

Cyhalothrin

...

Cyflulhrin

...

Cypermethrin

...

Cyproconazol

...

Cyprodinil

...

o, p'-DDE

...

p, p'-DDE

...

o, p'- DDT

...

p, p'-DDT

...

Deltamethrin

...

Demeton-S-metylsulfon

...

Desmedipham

...

Diazinon

...

Dichlobenil

...

Dichlofluanid

...

Diclofop-metyl

...

Dido ran

...

Dichlorvos

...

Dicofol

...

Dieldrin

...

Diethofencarb

...

Difenoconazole

...

Diflubenzuron

...

Diflufenican

...

Dimethachlor

...

Dimethoat

...

Dimetilan

...

Dimoxystrobin

...

Diphenylamin

...

Disulfoton

...

Ditalimfos

...

Diuron

...

α-endosulfan

...

β-endosulfan

...

Endosulfan sulfate

...

Endrin

...

Ethiofencarb-sulfone

...

Ethion

...

Ethofumesate

...

Famoxadone

...

Fenamidone

...

Fenarimol

...

Fenazaquin

...

Fenhexamid

...

Fenitrothion

...

Fenoxycarb

...

Fenpiclonil

...

Fenpropathrin

...

Fenpropimorph

...

Fenvalerat

...

Fluazifop-P-butyl

...

Flucythrinat

...

Fludioxonil

...

Fluoroglycofen-etyl

...

Fluquinconazole

...

Flurtamone

...

Flusilazol

...

Flutriafol-

...

Fluvalinat

...

Folpet

...

Furathiocarb

...

Haloxyfop-Ethoxyetyl

...

Haloxyfop-metyl

...

HCB

...

α-HCH

...

β-HCH

...

Lindane (ү-HCH)

...

Heptachlor

...

Heptachlor epoxide

...

Hexaconazol

...

Hexaflumuron

...

Hexythiazox

...

Imazaiil

...

Imidacloprid

...

Indoxacarb

...

Iprodione

...

Iprovalicarb

...

Isoproturon

...

isoxaflutole

...

Jodfenphos

...

Kresoxim-metyl

...

Linuron

...

Malathion

...

Mecarbam

...

Mefenpyr-dietyl

...

Mepanipyrim

...

Mepronil

...

Metalaxyl

...

Metazachlor

...

Metconazole

...

Methabenzthiazuron

...

Methacrifos

...

Methamidophos

...

Methidathion

...

Methiocarb

...

Methomyl

...

Methoxychlor

...

Metolachlor

...

Metolcarb

...

Metrafenon

...

Metribuzin

...

Mevinphos

...

Monocrotophos

...

Napropamide

...

Nicosulfuron

...

Nuarimol

...

Oxadixyl

...

Oxamyl

...

Oxydemeton-metyl

...

Parathion

...

Parathion-metyl

...

PCB 28

...

PCB 138

...

Penconazol

...

Pendimathalin

...

Permethrin

...

Phenmedipham

...

Phosalone

...

Phosphamidon

...

Picoxystrobin

...

Pirimicarb

...

Pirimiphos-metyl

...

Pnocbloraz

...

Procymidone

...

Profenofos

...

Promecarb

...

Propham

...

Propiconazol

...

Propoxur

...

Propyzamid

...

Proquinazid

...

Prosulfocarb

...

Prosulfuron

...

Pyrazophds

...

Pyridaben

...

Pyrifenox

...

Pyrimethanil

...

Pyriproxyfen

...

Quinalphos

...

Quinmerac

...

Quinoxyfen

...

Quintozene

...

Quizalofop-etyl

...

Silthiofam

...

Simazin

...

Spinosyn A (Spinosad)

...

Spirodiclofen

...

Spiro xamine

...

Sulfdtep

...

Tebuconazol

...

Tebufenpyrad

...

Tebutam

...

Teflubenzuron

...

Terbacil

...

Terbuthylazin

...

Tetradifon

...

Thiabendazol

...

Thiadoprid

...

Thiamethoxam

...

Thifensulfuron-metyl

...

Thiodicarb

...

Thiofanox-sulfone

...

Thiofanox-sulfoxide

...

Tolclofos-metyl

...

Triadimefon

...

Triadimenol

...

Triallat

...

Triasulfuron

...

Triazophos

...

Trichloronat

...

Trifloxystrobin

...

Triflumizol

...

Trifluralin

...

Triforin

...

Triticonazole

...

Vinclozolin

...

Zoxamide

...

CHÚ DẪN:

+ = dữ liệu thu được từ các phép thử thành thạo;

X = dữ liệu thu được từ các nghiên cứu đánh giá hiệu lực phương pháp thử nghiệm liên phòng.

Dữ liệu nghiên cứu xác nhận dựa vào Tài liệu tham khảo [7]: dữ liệu độ thu hồi riêng lẻ được liệt kê trong Tài liệu tham khảo [7].

6.9 Khả năng áp dụng

Các loại thuốc bảo vệ thực vật có thể phân tích bằng phương pháp này được nêu trong Bảng 3. Nông sản và thực phẩm được thử nghiệm bằng phương pháp này dược liệt kê trong Bảng 5.

Bảng 5 - Nông sản và thực phẩm được thử nghiệm bằng phương pháp N

Táo

Cà phê, dạng nguyên liệu

...

Gia vị

Quả bơ

Dưa chuột

Hành tây

Rau chân vịt

Chuối

Cải xoăn

Đào

Dâu tây

...

Nho đỏ không hạt

Hạt lạc

Củ cải đường

Bia

Nho

Lê

Ớt ngọt

Cà rốt

Bắp cải

...

Chè và sản phẩm tương tự chè

Súp lơ

Hoa hublong

Dứa

Thuốc lá

Ngũ các

Su hào

Mận

Cà chua

...

Rau diếp

Khoai tây

Rượu vang

Quả có múi

Dưa vàng

Nho khô

Sản phẩm cacao

Nước quả nho

...

7 Phương pháp P: Chiết bằng etyl axetat và làm sạch bằng sắc ký thẩm thấu gel, nếu cần

7.1 Nguyên tắc

Phần mẫu thử đã cắt nhỏ và đồng hóa được chiết bằng etyl axetat cùng với natri sulfat trong ống mẫu. Sau khi lắc và siêu âm, ly tâm ống mẫu. Phần dịch lọc thô không cần làm sạch có thể được bơm trực tiếp vào máy sắc ký khí hoặc sắc ký lỏng hoặc nếu cần thì được tinh sạch bằng sắc ký thẩm thấu gel trên BioBeads®S-X3 dùng hỗn hợp etyl axetat và xyclohexan làm chất rửa giải. Dịch rửa giải được cô đặc để xác định bằng sắc ký khí hoặc sắc ký lỏng.

7.2 Thuốc thử

7.2.1 Yêu cầu chung

Sử dụng các thuốc thử có độ tinh khiết thích hợp để phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật theo TCVN 8424-1.

7.2.2 Etyl axetat

7.2.3 Natri sulfat

...

7.2.4 Xyclohexan

7.2.5 Hỗn hợp rửa giải GPC: xydohexan/etyl axetat với tỷ lệ 1:1 (phần thể tích)

7.2.6 Bio Beads® S-X3, cỡ hạt từ 38 µm đến 75 µm (từ 200 mesh đến 400 mesh).

7.2.6 Natri hydro cacbonat.

7.3 Thiết bị, dụng cụ

Sử dụng các thiết bị, dụng cụ theo TCVN 8424-1 và cụ thể như sau:

7.3.1 Máy đồng hóa.

7.3.2 Bộ làm bay hơi dung môi, có nồi cách thủy

7.3.3 Dụng cụ dùng cho GPC, ví dụ: GPC Autoprep® 1001 hoặc 1002, được trang bị cột sắc ký, đường kính trong 25 mm, dài 50 cm và các vòng bơm mẫu 5 ml (V_R1); cột được nhồi 50 g resin BioBeads S-X3®, đã được làm trương nở qua đêm trong hỗn hợp rửa giải GPC, cột cao khoảng 32 cm đã được nhồi như mô tả trong 7.4.3.1.

...

7.3.5 Máy ly tâm.

7.3.6 Xyranh, ví dụ: xyranh dung tích 10 ml dùng một lần và xyranh có lọc, PTFE cỡ lỗ 0,20 µm.

7.4 Cách tiến hành

7.4.1 Chuẩn bị mẫu thử

Cắt nhỏ mẫu thử và đồng hóa (7.3.1) kỹ.

7.4.2 Chiết

Cân 10 g (m) mẫu đã chuẩn bị cho vào ống ly tâm (7.3.4), thêm 3 g natri hydro cacbonat (7.2.7), một lượng thích hợp ít nhất 10 g natri sulfat (7.2.3) để hấp thụ phần nước có trong mẫu (xem Bảng A.1 về hàm lượng nước) và 20 ml (V_EX) etyl axetat. Lắc kỹ 1 min và siêu âm 3 min.

Nếu việc nghiền mẫu là chưa đủ hoặc dư lượng không dễ chiết được ra khỏi nền mẫu, thì có thể kéo dài thời gian chiết (ví dụ: 20 min bằng máy lắc cơ học) hoặc dùng máy trộn tốc độ cao (ví dụ: Ultra-Turax®).

Ly tâm (7.3.5) trong 3 min ở 3 000g. Tách và lọc dịch lọc thô qua bộ lọc PTFE cỡ lỗ 0,20 µm (7.3.6).

...

7.4.3 Làm sạch bằng sắc ký thấm thấu gel (nếu cần)

7.4.3.1 Nhồi cột thẩm thấu gel

Đề Bio-Beads® (7.2.6) (khoảng 50 g) trương nở qua đêm trong hỗn hợp rửa giải GPC (7.2.5). Sau đó rót tất cả huyền phù cùng một lúc vào cột (dung tích khoảng 180 ml). Ngay sau khi lớp nền gel đã ổn định (không có bọt khí) đến mức xấp xỉ 32 cm, thì chèn pittông, hạ thấp xuống đến mức nền và xoay vào vị trí. Nếu lớp nền gel bị lún xuống mức thấp hơn sau khi thao tác kéo dài, thì phải chỉnh pittông cho phù hợp (theo hướng dẫn của nhà sản xuất).

7.4.3.2 Kiểm tra thể tích rửa giải

Đối với mỗi cột thẩm thấu gel trước khi sử dụng lần đầu, cần phải kiểm tra các điều kiện rửa giải trên vài chất phân tích có khoảng thể tích rửa giải thấp hơn và cao hơn và trên các dịch chiết thô thích hợp. Để thực hiện điều này, nạp đầy các vòng mẫu bằng dịch chiết thô hoặc hỗn hợp các dung dịch chuẩn, rửa giải theo mô tả trong 7.4.3.3 và xác định bằng phương pháp phân tích thích hợp mặc dù các chất phân tích được thêm vào đã được thu hồi hoàn toàn hoặc các chất gây nhiễu sinh ra do các tạp chất chưa được tách. Tương tự, phải kiểm tra các cột sau khi đã qua một khoảng thời gian sử dụng dài.

7.4.3.3 Làm sạch dịch chiết thô

Thêm 5,0 ml (V_R2) xyclohexan vào 5,0 ml (V_R1) dịch chiết etyl axetat (7.4.2). Lắc khoảng 20 s rồi lọc qua giấy lọc nhanh và bơm 5 ml (V_R3) dịch lọc vào một vỏng bơm mẫu của máy sắc ký thẩm thấu gel.

Rửa giải cột thẩm thấu gel bằng hỗn hợp rửa giải GPC với tốc độ 5,0 ml/mln. Bộ phận chuyển mạch của máy sắc ký thẩm thấu gel được điều chỉnh để kiểm tra thể tích dịch rửa giải. Thông thường được cài đặt như sau:

- chế độ thải (dump) chuyển sang 16 min để loại bỏ 80 ml;

...

- chế độ rửa chuyển sang 2 min để rửa cột dùng 10 ml.

Cô đặc thể tích thu được đến khoảng 1 ml trên bộ cô quay (quay chậm, ngâm nhẹ bình cầu), dùng pipet cho lượng này vào ống nghiệm chia độ được đậy bằng nút mài, tráng rửa bộ cô quay bằng etyl axetat và pha loãng bằng etyl axetat đến 2,5 ml (V_end). Việc bổ sung etyl axetat không được bỏ qua để đảm bảo hòa tan hoàn toàn dư lượng.

Nếu các chất phân tích được phân tích mà rửa giải sớm trong GPC, thì sử dụng dịch chiết thô hoặc cần đến phần thu nhận GPC rộng hơn.

7.5 Sắc ký khí

Sử dụng hệ thống sắc ký khí thích hợp nêu trong TCVN 8424-3 và bơm một lượng dịch chiết thu được trong 7.4.2 hoặc 7.4.3.3.

7.6 Sắc ký lỏng

Sử dụng hệ thống sắc ký lỏng thích hợp nêu trong TCVN 8424-3 và bơm một lượng thích hợp, ví dụ: 2 µl hoặc ít hơn dịch chiết thu được trong 7.4.2 hoặc 7.4.3.3.

7.7 Tính kết quả

Dư lượng, R, của một chất phân tích đã được nhận biết, được biểu thị bằng miligam trên kilogam, tính theo Công thức (4):

...

(4)

Trong đó: f₄=1 (nếu không cần bước 7.4.3) hoặc f₄ được tính bằng Công thức (5) trong trường hợp làm sạch dịch chiết thô bằng GPC:

(5)

Trong đó:

F_A

là diện tích pic thu được từ V_i;

W_St

là lượng hợp chất được bơm cùng dung dịch chuẩn, tính bằng nanogam (ng);

...

là thể tích etyl axetat được thêm vào bước chiết 7.4.2, tính bằng mililit (ml);

F_St

là diện tích pic thu được từ W_St;

V_i

là phần thể tích được bơm vào máy sắc ký khi hoặc máy sắc ký lỏng, tính bằng mililit (ml);

là khối lượng của phần mẫu thử, tính bằng gam (g);

V_R1

là phần thể tích V_Ex được sử dụng trong 7.4.3.3, tính bằng mililit (ml);

...

là thể tích xyclohexan được thêm vào V_R1 trong 7.4.3.3, tính bằng mililit (ml);

V_end

là thể tích cuối cùng thu được trong 7.4.3.3 sau khi hòa tan lại, tính bằng mililit (ml);

V_R3

là phần thể tích V_R1 + V_R2 được bơm vào sắc ký thẩm thấu gel (thể tích vòng bơm mẫu), tính bằng mililit (ml).

7.8 Dữ liệu thử nghiệm thành thạo

Tất cả các cặp nền mẫu và thuốc bảo vệ thực vật sau đây đã được thử nghiệm thành thạo mà không làm sạch.

Nền mẫu: tỏi tây, quýt.

Thuốc bảo vệ thực vật: Xem Bảng 6.

...

Aldicarb

Ethion

Methidathion

Pyriproxyfen

Azinphos-metyl

Fenpropathrin

Methomyl

Spinosyn A

Carbendazim

...

Orthophenylphenol

Splnosyn D

Chlorpyrifos

Imidacloprid

Oxamyl

Thiabendazole

Deltamethrin

Indoxacarb

Pendimethalin

...

Diazinon

Kresoxim-metyl

Phosalone

Tolylfluanid

Dimethoate

Malathion

Prochloraz

Triflumuron

EPN

...

Prothiofos

7.9 Khả năng áp dụng

Các loại nông sản và thực phẩm đã được thử nghiệm bằng phương pháp này được nêu trong Bảng 7.

Bảng 7 - Nông sản và thực phẩm được thử nghiệm bằng phương pháp P

Táo

Cà rốt

Bắp cải

Cam

...

Quả bơ

Dưa chuột

Tỏi tây

Đào

Cà chua

Chuối

Nho

Rau diếp

...

Thuốc bảo vệ thực vật và các chất chuyển hóa nêu trong Bảng 8 có thể phân tích được bằng GC hoặc LC-MS/MS theo phương pháp này.

Bảng 8 - Các thuốc bảo vệ thực vật và các chất chuyển hóa có thể phân tích được bằng GC hoặc LC-MS/MS theo phương pháp M

Abamectin

Chlorpyrifos

EPN

Acephate

Chlorpyrifos-metyl

Epoxlconazole

Acetamiprid

...

Esfenvalerate

Acibenzolar-S-metyl

Chlorthal-dimetyl

Ethiofencarb

Aclonifan *

Chlozolinate

Ethlofencarb-sulfone

Acrinathrin **

Clofentezine

...

Aldicarb

Clomazone

Ethion

Aldicarb-sultone

Clothianidin

Ethofumesate

Aldicarb-sulfoxide

Coumaphos

Ethoprophos

...

Cyanazin

Etofenprox

Aspon

Cyanofenfos

Etrimfos

Atrazine

Cyanofos

Famoxadone

Atrazine-desetyl

...

Fenamiphos

Atrazine-desisopropyl

Cyfiuthrin

Fenamiphos-Sulfone

Azinphos-etyl

Cyfluthrin, beta-

Fenamiphos-Sulfoxide

Azinphos-metyt

Cypermethrin

...

Azoxystrobin

Cyproconazole

Fenazaquin

Benalaxyl

Cyprodinil

Fenbuconazole

Bendiocarb

Danifos

Fenchlorphos

...

DEET

Fenhexamid

Bentazone

Deltametrin

Fenitrothion

Bifenthrin

Demeton

Fenoxycarb

Binapacryl

...

Fenpiclonil

Biphenyl

Demeton-S-metyl-sulfone

Fenpropathrin

Bitertanol

Demeton-S-metyl-sulfoxide

Fenpropimorph

Boscalid

Desmethyl pirimicarb

...

Bromophos

Desmetryn

Fenson

Bromophos-etyl

Dialifos

Fensulfothion

Bromopropylate

Diazinon

Fensulfothion-oxon

...

Dichlobenil

Fensulfothion-oxon-sulfbne

Bupirimate

Dichlofluanid

Fensulfothion-sulfone

Buprofezin

Dichioroaniline, 3,5-

Fenthion

Butocarboxim

...

Fenthion-oxon

Butocarboxim-sulfoxide

Dichoran

Fenthion-oxon-sulfbne

Butoxycarboxim

Dicrotophos

Fenthion-oxon-sulfbxide

Butralin

Dieldrin

...

Cadusafos

Diethofencarb

Fenthion-sulfoxide

Carbaryl

Difenoconazole

Fenvalerate

Carbendazim

Diflubenzuron

Fipronil

...

Dimethoate

Fluacrypyrim

Carbofuran-3OH

Dimethomorph

Fluazifop-P-butyl

Carbophenothion

Dinobuton

Fluazinam

Carbosulfan

...

Flucythrinate

Carfentrazon-etyl

Dinoseb

Fludioxinll

Chinomethionat

Dinoterb

Fludioxonil

Chlordane, els-

Dioxathion

...

Chlordane, trans-

Diphenamid

Flumetralin

Chlordimeform

Diphenylamine

Fluquinconazole

Chlorfenapyr

Disulfoton

Flusilazole

...

Disulfoton-Sulfone

Flutriafol

Chlorfenvinphos

Disulfoton-sulfoxide

Fonofos

Chlorfluazuron

DMSA

Formothion

Chlormephos

...

Fosthiazate

Chlorobenzilate

DNOC

Furalaxyl

Chlorobromuron

Endosulfan, alpha-

Furathiocarb

Chloropropylate

Endosulfan, beta-

...

Chlorothalonil

Endosulfansulfate

Haloxyfop-Ethoxyetylester

Chlorpropham

Endrin

Haloxyfop-Metyl

Bảng 8 (tiếp theo)

HCH, alpha-

...

Propham

Tetradifon

HCH, beta-

Monocrolophos

Propiconazole

Tetrasul

HCH, delta-

Myclobutanil

Propoxur

...

HCH, gamma-

Napropamide

Pmpyzamide

Thiacloprid

Heptachlor

Nitrofen

Prosulfocarb

Thiametoxam

Heptachlor epoxide

...

Prothioconazole-desthio

Thiodicarb

Heptenophos

Orthophenylphenol

Prothiofos

Thiometon

Hexachlorobenzene

Oxadixyl

Pymetrozine

...

Hexaconazole

Oxamyl

Pyraclofos

Thiometon-sulfoxide

Hexazinone

Oxamyl-Oxime

Pyraclostrobin

Thionazin

Hexythiazox

...

Pyrazophos

Thiophanate-metyl

Imazalil

Paraoxon

Pyridaben

Tolclofos-metyl

Imidacloprid

Paraoxon-Metyl

Pyridaphenthion

...

Indoxacarb

Parathion

Pyrifenox

Triadimefon

Iprodione

Parathion-metyl

Pyrimethanil

Triadimenol

Iprovalicarb

...

Pyriproxyfen

Triamiphos

Isofenphos

Pencycuron

Quinalphos

Triazamate

Isofenphos-metyl

Pendimethaline

Quinoxyfen

...

Isoprocarb

Pentachloroaniline

Quintozene

Trichlorfon

Isopropalin

Pentachloroanisole

Qinzalofop

Trichloronat

Isoproturon

...

Simazine

Trichlonophenol, 2,4,6-

Isoxaben

Permethrin

Spinosyn A

T rifloxystrobin

Jodfenphos

Phenmedipham

Spinosyn D

...

Kresoxim-metyl

Phenothrin

Spiroxamine

Triflumuron

Lambda-Cyhalothrin **

Phenthoate

Sulfentrazone

Trimethacarb, 2,3,5-

Leptophos

...

Sulfotep

Triticonazole

Linuron

Phorate-O-Analogue

tau-Fluvalinate

Vamidothion

Lufenuron

Phorate-Sulfone

TCNB, 2,3,4,5-

...

Malaoxon

Phorate-Sulfoxide

Tebuconazole

Vinclozolin

Malathion

Phosalone

Tebufenozide

Zoxamide

Mecarbam

...

Tebufenpyrad Tecnazene

Mepanipyrim

Phosmet oxon

Teflubenzuron

MephosFolan

Phosphamidon

Tefluthrin

...

Metaflumizone

Phoxim

TEPP

Metalaxyl

Piperonyl Butoxide

Tepraloxydim

Metconazole

...

Terbufos

Methabenzthiazuron

Pinmiphos-Etyl

Terbufos Sulfone

Methamidophos

Pirimiphos-metyl

Terbufos Sulfoxide

...

Methiocarb

Prochloraz

Terbufos-O-sulfone

Methiocarb-sulfone

Procymidone

Terbufos-oxon

Methiocarb-sulfoxide

...

Terbufos-oxon-sulphoxid

Methomyl

Promecarb

Terbutylazine

Methoxychlor

Propamocarb

Terbutryn

...

Methoxyfenozide

Propaquizafop

Tetrachloranilin, 2,3,5,6-

Metidathion

Propargite

Tetrachlorvinphos

Metribuzin

...

Tetraconazole

* Các hợp chất viết bằng chữ nghiêng đã được đánh giá sử dụng GC và tất cả các hợp chất khác sử dụng LC.

** Các hợp chất rửa giải sớm trong GPC (gần với thể tích thải bỏ) và do đó có thể quan sát được hao hụt độ thu hồi.

Phụ lục A

(Tham khảo)

Hàm lượng nước trung bình có trong các loại nông sản và thực phẩm

Bảng A.1 - Hàm lượng nước trung bình có trong các loại nông sản và thực phẩm

...

Hàm lượng nước trung bình (g/100 g)

Bột cacao

Ngũ cốc, gia vị (rau thơm), cà phê (nguyên liệu), chè và sản phẩm tương tự chè

Chuối, cải ngựa

Đậu Hà Lan, nho không hạt (đen), khoai tây, mùi tây, nho

...

Súp lơ trắng, đậu cô-ve, súp lơ xanh, dâu tây, bưởi, cải xoắn, su hào, dưa vàng, cà rốt, nước qua nho, hạt tiêu, đào, nấm, cù cải đỏ, bắp cải tím, rau chân vịt, bắp cải, chanh tây, củ cải đường (ăn củ), hành tây

Rau diếp xoăn, rau xà lách xoăn, dưa chuột, củ cải, rau đại hoàng, rau diếp, cần tây, măng tây, cà chua

Thư mục tài liệu tham khảo

[1] Luke, Milton A.; Froberg, Jerry E.; Masumoto, Herbert T., Extraction and clean-up of organochlorine, organophosphate, organonitrogen and hydrocarbon pesticides in produce for determination by gas-liquid chromatography. J. Assoc. Off. Anal. Chem. 58,1020 -1026,1975

[2] Luke, Milton A.; Froberg, Jerry E.; Doose, Gregory M.; Masumoto, Herbert T. Improved multiresidue gas chromatographic determination of organophosphorus, organonitrogen and organohalogen pesticides in produce, using flame photometric and electrolytic conductivity detectors. J. Assoc. Off. Anal. Chem. 64,1187-1195 (1981)

...

[4] Specht, W.: Organochlorine, organophosphorus, nitrogen-containing and other pesticides. In DFG, Manual of Pesticide Residue Analysis, VCH Weinheim, Method s 19, in Vol.1 (1987), pp. 383, and Vol.2 (1992), pp. 317

[5] Specht W., Pelz, S., Gilsbach, W.: Gas-chromatographic determination of pesticide residues after clean-up by gel-permeation chromatography and mini-silica gel-column chromatography. Replacement of dichloromethane by ethyl acetate/cyclohexane in liquid-liquid partition and simplified conditions for extraction and liquid-liquid partition, Fresenius J. Anal. Chem. 353,183-190 (1995)

[6] Analytical Methods for Residues of Pesticides in Foodstuffs, Sixth edition, The Hague (1996)

[7] Methode L 00.00-34 Untersuchung von Lebensmitteln - Modulare Multimethode zur Bestimmung von Pflanzenschutzmitteln in Lebensmitteln, Erweiterte Neufassung der DFG-Methode S 19, Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 64 Lebensmittel-, Bedarfsgegenstände- und Futtermittelgesetzbuch LFGB (Method L 00.00-34 Food analysis - Modular Multiple Analytical Method for the Determination of Pesticide Residues in Foodstuffs, Extended and Revised Version of the DFG Method S 19, Collection of Official Methods under Article 64 of the German Federal Food and Feed Code LFGB)