Pepton từ casein
Natriclorua
Nước
|
1,0
g
8,5
g
1
000 ml
|
5.2.1.2 Chuẩn bị
Hòa tan các thành phần
trong nước, đun nóng nếu cần.
Chỉnh pH sao cho sau
khi khử trùng, pH là 7 ± 0,2 ở 25oC, nếu cần.
5.2.2 Dung dịch đệm
pepton
5.2.2.1 Thành phần
Pepton từ các mô động
vật
Natri clorua
Dinatri hydro
phosphat ngậm 12 phân tử nước (Na2HPO4.12H2O)
Kali dihydro phosphat
(KH2PO4)
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
10,0
g
5,0
g
9,0
g
1,5
g
1000
ml
5.2.2.2 Chuẩn bị
Hòa tan các thành phần
trong nước, đun nóng nếu cần.
Chỉnh pH sao cho sau
khi khử trùng, pH là 7 ± 0,2 ở 25oC, nếu cần.
5.3 Dịch pha loãng dùng
cho các mục đích đặc biệt
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
CHÚ THÍCH: Các nguyên tắc
cụ thể, xem TCVN 6507-2 (ISO 6887-2)
5.4 Phân phối và khử
trùng dịch pha loãng
Phân phối dịch pha
loãng (5.2 hoặc 5.3) với lượng cần thiết để chuẩn bị các huyền phù ban đầu vào
các bình (6.4) có dung tích thích hợp.
Phân phối dịch pha
loãng (5.2 hoặc 5.3) với lượng cần thiết để chuẩn bị các dung dịch pha loãng thập
phân vào các ống nghiệm (6.5) hoặc các bình (6.4) sao cho sau khi khử trùng
trong mỗi ống nghiệm hoặc bình chứa 9,0 ml. Sai số cho phép đo của thể tích cuối
cùng này sau khi khử trùng không được vượt quá ± 0,2%.
CHÚ THÍCH: Nếu cần phải
đếm một vài nhóm vi sinh vật sử dụng các môi trường cấy khác nhau, thì cũng có
thể cần phải phân phối tất cả các dung dịch pha loãng (hoặc một số) với các lượng
nhiều hơn 9,0 ml, do đó kích thước các ống nghiệm (6.5) và bình (6.4) cũng phải
được qui định tương ứng.
Đậy nắp các ống nghiệm
hoặc các bình.
Khử trùng 15 phút trong
nồi hấp áp lực ở 121oC.
6. Thiết bị và dụng cụ
thủy tinh
Sử dụng các thiết bị
thí nghiệm vi sinh thông thường [xem TCVN 6404 (ISO 7218)] và cụ thể là:
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Xem TCVN 6404 (ISO
7218).
6.2 Thiết bị trộn
6.3 Máy khuấy cơ
Xem TCVN 6404 (ISO
7218).
6.4 Bình hoặc lọ có nắp
vặn, có
dung tích thức hợp
6.5 Ống nghiệm, có dung tích thích hợp
6.6 Pipet chia độ xả hết,
có
dung tích danh định 1 ml và 10 ml, được chia vạch theo 0,1 ml và 0,5 ml tương ứng.
6.7 pH mét, có thể đọc được đến ± 0,01
đơn vị pH ở 25oC, có thể đo chính xác đến ± 0,1 đơn vị pH.
6.8 Cân, có thể cân chính xác đến
0,01 g.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Tiến hành lấy mẫu theo
tiêu chuẩn riêng tương ứng với sản phẩm. Nếu không có tiêu chuẩn riêng, thì các
bên có liên quan tự thỏa thuận về vấn đề này.
8. Chuẩn bị mẫu thử
Việc chuẩn bị mẫu thử
theo tiêu chuẩn riêng phù hợp với sản phẩm tương ứng. Nếu không có tiêu chuẩn
riêng, thì các bên có liên quan tự thỏa thuận về vấn đề này.
9. Cách tiến hành
9.1 Phần mẫu thử và huyền
phù ban đầu (dung dịch pha loãng ban đầu)
Cân một lượng m g
với sai số cho phép ± 5% hoặc đong một thể tích V ml với sai số cho phép
± 5% (tối thiểu là 10 g hoặc 10 ml, trừ khi có qui định khác), của phần mẫu thử
đại diện (xem điều 8) cho vào một chén đựng vô trùng hoặc túi bằng chất dẻo vô
trùng.
Cho một lượng dịch pha
loãng 9 x m g hoặc 9 x V ml. Lượng thêm này có thể được cân hoặc
đong với sai số cho phép là ± 5%.
CHÚ THÍCH 1: Trong một
số trường hợp cụ thể, đặc biệt là đối các sản phẩm có huyền phù ban đầu 1 + 9
quá sánh hoặc quá đặc thì có thể cần phải tăng thêm dịch pha loãng. Điều này phải
được tính đến đối với các thao tác tiếp theo và/hoặc phải được tính đến trong
phần tính kết quả.
CHÚ THÍCH 2: Dung dịch
pha loãng ban đầu này quyết định một phần giá trị giới hạn của phép định lượng,
điều này cũng phụ thuộc vào kỹ thuật sử dụng (ví dụ, kỹ thuật rót đĩa với 1 ml
chất cấy của huyền phù 1/10, có giới hạn này là 10 vi sinh vật trong 1 gam). Nếu
cần, trong một số sản phẩm cụ thể để số đếm thấp hơn giới hạn này thì có thể sử
dụng một lượng dịch pha loãng nhỏ hơn1). Cần chú ý rằng việc cấy huyền phù ban
đầu này có thể gặp khó khăn do không cân bằng về tỷ lệ chất cấy/môi trường cấy
(ức chế sự phát triển vi sinh vật do nồng độ các thành phần của thực phẩm tăng).
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Đồng hóa hỗn hợp theo
các khuyến cáo trong TCVN 6404 (ISO 7218).
Để các hạt to lắng xuống
trong 15 phút, nếu cần. Có thể sử dụng các hệ thống lọc để có kết quả tương
đương.
Trong trường hợp định
lượng các bào tử, việc xử lý nhiệt huyền phù ban đầu, ví dụ 10 phút ở 80oC
cần được thực hiện ngay sau khi chuẩn bị và làm nguội nhanh.
9.2 Các dung dịch pha
loãng thập phân tiếp theo
Dùng pipet vô trùng lấy
1 ml huyền phù ban đầu với sai số đo2) ± 5% cho vào một ống nghiệm chứa 9 ml
dung dịch pha loãng vô trùng ở nhiệt độ thích hợp.
CHÚ THÍCH: Nếu cần một
thể tích lớn hơn, thì có thể thêm một thể tích xác định (lớn hơn 1 ml) huyền
phù ban đầu với sai số đo ± 5%, vào ống nghiệm chứa một thể tích dịch pha loãng
vô trùng lớn gấp chính lần.
Để có độ chính xác tối
ưu, không nhúng pipet vào huyền phù ban đầu sâu hơn 1 cm.
Không để pipet chứa chất
cấy tiếp xúc với dịch pha loãng vô trùng.
Trộn kỹ, tốt nhất là
dùng máy khuấy cơ (6.3) để trộn trong 5 giây đến 10 giây để thu được dung dịch
pha loãng 10-2.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
9.3 Thời gian tiến hành
Thời gian tính từ lúc
chuẩn bị xong huyền phù ban đầu cho đến khi chất cấy tiếp xúc với môi trường
không vượt quá 45 phút và thời gian kể từ khi chuẩn bị huyền phù ban đầu (9.1)
đến khi bắt đầu chuẩn bị các dung dịch pha loãng thập phân tiếp theo không được
vượt quá 30 phút, trừ khi có qui định khác trong tiêu chuẩn riêng.
CHÚ THÍCH: Nếu nhiệt độ
phòng của phòng thử nghiệm quá cao thì hai khoảng thời gian này phải giảm đi.