Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8131:2009 Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn - Phương pháp phát hiện Shigella Spp

• Số hiệu: TCVN8131:2009
• Loại văn bản: Tiêu chuẩn Việt Nam
• Nơi ban hành: ***
• Người ký: ***
• Ngày ban hành: Năm 2009

Vùng cấy	Bề ngoài	Cho thấy
Cấy đâm sâu	Màu vàng Màu đỏ hoặc không đổi màu Màu đen Có bọt khí hoặc rạn nứt	Lên men glucoza: dương tính Không lên men glucoza: âm tính Sinh hydro sulfua: dương tính Sinh khí
Cấy bề mặt nghiêng	Màu vàng Màu đỏ hoặc không đổi màu	Sử dụng lactoza và/hoặc sacaroza: dương tính Không sử dụng lactoza và sacaroza: âm tính

Bảng 1 - Khẳng định và phân biệt bằng sinh hóa các loài Shigella với Escheriachia coll, các loài Hafnia và Providencia

Phép thử

Escherichia coli

Các loài Hafnia

Providencia

Shigella sonnei

Shigella flexneri

Shigella dysenteriae

Shigella bodil

...

...

...

-

-

-

-

-

-

+

V

+

...

...

...

-

-^e

-^e

+

V

V

-

-

-

...

...

...

-

-

V

-

-

-

-

V

+

...

...

...

-

-

-

-^i

V

+

-

+

-

...

...

...

-

+

-

+

-

V^d(61 %)

V^d (44 %)

V^d (29 %)

+

...

...

...

-

+ (95 %)

-

V^f (50 %)

V^f (11 %)

Axit từ:

V

V

-

...

...

...

V^g (9,4 %)

V^g (4,5 %)

V^g (6,7 %)

+

+

-

+(100 %)

+ (100 %)

+ (100 %)

...

...

...

V

V

-

-^c

-^a

-

-^a

+

+

...

...

...

+ (99 %)

+ ^b (94 %)

-

+ (98 %)

V

V

V

-

V

...

...

...

V

V

V

-

-^c (25 %)

V (53 %)

-

-

V

...

...

...

-

-

-

-

-

+

-

-

-

...

...

...

V (29 %)

V (42 %)

V

-

V

-^c (15 %)

-

-

-

...

...

...

+

-

-

-

V^h (4,0 %)

V (57 %)

Bảng 2 - Các phép thử sinh hóa bổ sung^a để phân biệt một số chủng Shigella spp. và Escherichia coli

Loài

Phản ứng sinh hóa (phát triển) trong một thời gian ủ xác định

...

...

...

Christensen xitrat

Natri mucat

+ % trong 2 ngày

+ % sau 2 ngày

+ % trong 2 ngày

+ % sau 2 ngày

+ % trong 2 ngày

+ % sau 2 ngày

- (0)

...

...

...

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

...

...

...

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

- (0)

...

...

...

V (6,4)

V (36,7)

V (83,8)

+ (93,5)

V (> 15,3)

V (> 34,2)

+ (91,6)

+ (93,0)

Bảng 3 - Phân biệt bằng tính kháng nguyên trong các loài Shigella

...

...

...

Nhóm kháng nguyên

Serovar (chỉ ra kháng nguyên cụ thể)

S. dysenteriae

A

S. flexneri

B

S. boydii

C

D

...

...

...

Phụ lục A

(Quy định)

Lưu đồ quy trình thử nghiệm

Phụ lục B

(Quy định)

Thành phần và chuẩn bị môi trường nuôi cấy và thuốc thử

20,0 g

...

...

...

2,0 g

5,0 g

1,0 g

1,5 ml

1 000 ml

25,0 mg

1 000 ml

20,0 g

10,0 g

...

...

...

5,0 g

0,03 g

0,001 g

9 g đến 18 g^a

1 000 ml

3,0 g

5,0 g

3,75 g

7,5 g

...

...

...

5,0 g

1,0 g

6,8 g

0,8 g

0,08 g

9 g đến 18 g ^a

1 000 ml

12,0 g

3,0 g

...

...

...

12,0 g

2,0 g

9,0 g

5,0 g

5,0 g

1,5 g

0,1 g

0,065 g

12 g đến 18 g ^a

...

...

...

3,0 g

5,0 g

12 g đến 18 g ^a

1 000 ml

3,0 g

3,0 g

20,0 g

5,0 g

10,0 g

...

...

...

1,0 g

0,3 g

0,3 g

0,024 g

9 g đến 18 g ^a

1 000 ml

3,0 g

5,0 g

4 g đến 9 g ^a

...

...

...

1,0 g

1,0 g

5,0 g

2,0 g

0,012 g

9 g đến 18 g^a

1 000 ml

400 g

1 000 ml

...

...

...

50 ml

5,0 g

3,0 g

1,0 g

0,015 g

1 000 ml

10,0 g

5,0 g

1,0 g

...

...

...

Phân phối các lượng 5 ml môi trường vào các ống cấy hẹp hoặc chai có nắp vặn (6.11).

5,0 g

25 ml

75 ml

6,9 g

khoảng 3 ml

50 ml

0,08 g

15 ml

...

...

...

15 ml

10,0 g

3,0 g

5,0 g

10,0 g

0,04 g

1 000 ml

Phân phối các lượng 5 ml môi trường vào các ống hoặc chai vô trùng (6.11) có kích thước phù hợp.

Kiểm tra vài ống nghiệm đựng từng môi trường hoàn chỉnh về độ vô trùng bằng cách ủ ở 37 ^oC trong 24 h.

...

...

...

B.12 Dung dịch nước muối

B.12.1 Thành phần

8,5 g

1 000 ml

Phân phối các lượng 10 ml dung dịch vào các bình hoặc chai có nắp vặn.

2,0 g

5,0 g

0,2 g

1,0 g

...

...

...

0,08 g

9 g đến 18 g ^a

1 000 ml

Phân phối các lượng khoảng 8 ml môi trường vào các ống nghiệm (6.11).

3,0 g

0,2 g

0,5 g

0,1 g

0,4 g

...

...

...

5,0 g

0,08 g

0,012 g

9 g đến 18 g ^a

1 000 ml

Phân phối môi trường này vào các ống nghiệm (6.11) đến một phần ba ống, đậy nắp.

10,0 g

10,0 g

0,024 g

...

...

...

Phân phối các lượng 5 ml môi trường này vào các ống nghiệm (6.11).

10,0 g

0,024 g

1 000 ml

Phân phối các lượng 5 ml môi trường này vào các ống nghiệm (6.11).

Phụ lục C

(Quy định)

Mô tả hình thái và màu sắc khuẩn lạc Shigella trên thạch chọn lọc, về mục đích nhận biết và kiểm soát chất lượng

...

...

...

Các loài vi khuẩn

Thạch chọn lọc

Thạch MacConkey

Thạch XLD

Thạch Hektoen

[1] Theo Ewing W.H. và Lindberg A.A. Serology of the Shigella. Trong: Methods in Microbiology (Ed. Bergan T.), Vol. 14, Acacdemic Press, 1984.