Quy chuẩn Quốc gia QCVN 4-1:2010/BYT phụ gia thực phẩm chất điều vị

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI MONONATRI L-GLUTAMAT

Monosodium L-glutamate, Sodium glutamate

INS 621

ADI không giới hạn

Mononatri L-glutamat monohydrat; Muối mononatri của acid glutamic, monohydrat

6106-04-3

C₅H₈NNaO₄.H₂O

...

...

...

187,13

Tinh thể hoặc bột tinh thể trắng, thực tế không mùi.

Chất điều vị.

Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol, thực tế không tan trong ether.

Phải có phản ứng đặc trưng của glutamat.

Phải có phản ứng đặc trưng của natri.

Không được quá 0,5% (Sấy tại 98^oC trong 5 giờ).

...

...

...

Dung dịch mẫu thử 10% (kl/tt) trong acid hydrocloric 2 N có [a]^D₂₀ trong khoảng +24,8 đến +25,3^o

Không được quá 0,2%.

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần phương pháp thử).

Không được quá 1,0 mg/kg.

Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã làm khô.

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4 - Cân 0,07 g mẫu thử, tiến hành theo hướng dẫn trong chuyên luận thử giới hạn clorid, sử dụng 0,4 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng.

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. Phương pháp sắc ký bản mỏng.

- Mẫu thử : Chuẩn bị dung dịch mẫu thử 0,5%. Lấy 2 µl.

...

...

...

- Dung môi: hỗn hợp n-butanol/acid acetic băng/nước, tỷ lệ thể tích 2/1/1.

- Pha tĩnh hấp thụ : Silicagel.

Dung dịch hồ tinh bột-kali iodid : Đun nóng 0,5 g tinh bột trong 50 ml nước khuấy đều đến khi hồ hóa. Để nguội, thêm 0,5 g kali iodid và thếm nước đến đủ 100 ml.

- Tiến hành chạy sắc ký theo hướng dẫn trong chuyên luận sắc ký bản mỏng (các phương pháp phân tích). Dừng quá trình sắc ký khi tuyến dung môi cách điểm xuất phát khoảng 10 cm, để khô dung môi trong không khí, khoảng 30 phút.

- Đồng thời, chuẩn bị buồng sắc ký tương tự, đặt vào 1 cốc thủy tinh dung tích 50 ml, cho vào cốc 3 g natri hypoclorid, thêm từ từ vào cốc 1 ml acid hydrocloric để tạo khí clor, đậy nắp và để yên trong 30 giây để tạo môi trường khí clor trong buồng. Đặt bản mỏng đã để khô vào buồng sắc ký, đậy nắp và để yên trong 20 phút. Lấy bản mỏng ra khỏi buồng, để yên 10 phút trong không khí và xịt ethanol lên bản mỏng. Sau khi để khô, xịt dung dịch hồ tinh bột-kali iodid lên bản mỏng, quan sát dưới ánh sáng thường ngay sau khi vết chuẩn xuất hiện.

Yêu cầu : Trong sắc ký đồ của mẫu thử không được có vết tương đương vết acid pyrrolidon carboxylic trong sắc ký đồ của chuẩn (độ nhạy 0,2%).

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ.

...

...

...

Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N tương đương với 9,356 mg C₅H₉NNaO₄.H₂O.

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI MONOKALI L-GLUTAMAT

Monopotassium L-glutamate, Potassium glutamate; MPG

INS 622

ADI không giới hạn

...

...

...

Dung dịch mẫu thử 10% (kl/tt) trong acid hydrocloric 2 N có [a]^D₂₀ trong khoảng +22,5 đến +24,0^o

Không được quá 1 mg/kg.

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4

- Cân 0,07 g mẫu thử, tiến hành theo hướng dẫn trong chuyên luận thử giới hạn clorid, sử dụng 0,4 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng.

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. Phương pháp sắc ký bản mỏng.

- Mẫu thử : Chuẩn bị dung dịch mẫu thử 0,5%. Lấy 2 µl.

- Chuẩn : pha dung dịch chuẩn mono natri glutamat 0,5% chứa 2,5 mg acid pyrrolidon carboxylic.

- Dung môi: hỗn hợp n-butanol/acid acetic băng/nước, theo tỷ lệ thể tích tương ứng 2/1/1.

...

...

...

Dung dịch hồ tinh bột-kali iodid : Đun nóng 0,5 g tinh bột trong 50 ml nước khuấy đều đến khi hồ hóa. Để nguội, thêm 0,5 g kali iodid và thếm nước đến đủ 100 ml.

- Tiến hành chạy sắc ký theo hướng dẫn trong chuyên luận sắc ký bản mỏng (các phương pháp phân tích). Dừng quá trình sắc ký khi tuyến dung môi cách điểm xuất phát khoảng 10 cm, để khô dung môi trong không khí, khoảng 30 phút.

- Đồng thời, chuẩn bị buồng sắc ký tương tự, đặt vào 1 cốc thủy tinh dung tích 50 ml, cho vào cốc 3 g natri hypoclorid, thêm từ từ vào cốc 1 ml acid hydrocloric để tạo khí clor, đậy nắp và để yên trong 30 giây để tạo môi trường khí clor trong buồng. Đặt bản mỏng đã để khô vào buồng sắc ký, đậy nắp và để yên trong 20 phút. Lấy bản mỏng ra khỏi buồng, để yên 10 phút trong không khí và xịt ethanol lên bản mỏng. Sau khi để khô, xịt dung dịch hồ tinh bột-kali iodid lên bản mỏng, quan sát dưới ánh sáng thường ngay sau khi vết chuẩn xuất hiện.

Yêu cầu : Trong sắc ký đồ của mẫu thử không được có vết tương đương vết acid pyrrolidon carboxylic trong sắc ký đồ của chuẩn (độ nhạy 0,2%).

- Thử theo JECFA monograph 1 - vol. 4

- Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ.

Cân khoảng 200 mg (chính xác đến mg) mẫu thử đã được làm khô trước, hòa tan trong 6 ml acid formic, thêm 100 ml acid acetic băng. Chuẩn độ với dung dịch acid percloric 0,1 N, xác định điểm kết thúc chuẩn độ bằng đo thế. Tiến hành làm mẫu trắng song song để hiệu chỉnh nền

Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N tương đương với 10,162 mg C₅H₈KNO₄.H₂O.

...

...

...

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI CALCI di-L-GLUTAMAT

Monocalcium di-L-glutamate, Calcium glutamate;

INS 623

ADI không giới hạn

...

...

...

- Mẫu thử : Chuẩn bị dung dịch mẫu thử 0,5%. Lấy 2 µl.

- Chuẩn : pha dung dịch chuẩn mono natri glutamat 0,5% chứa 2,5 mg acid pyrrolidon carboxylic.

- Dung môi: hỗn hợp n-butanol/acid acetic băng/nước, tỷ lệ thể tích 2/1/1.

- Pha tĩnh hấp thụ : Silicagel.

Dung dịch hồ tinh bột-kali iodid : Đun nóng 0,5 g tinh bột trong 50 ml nước khuấy đều đến khi hồ hóa. Để nguội, thêm 0,5 g kali iodid và thếm nước đến đủ 100 ml.

- Tiến hành chạy sắc ký theo hướng dẫn trong chuyên luận sắc ký bản mỏng (các phương pháp phân tích). Dừng quá trình sắc ký khi tuyến dung môi cách điểm xuất phát khoảng 10 cm, để khô dung môi trong không khí, khoảng 30 phút.

- Đồng thời, chuẩn bị buồng sắc ký tương tự, đặt vào 1 cốc thủy tinh dung tích 50 ml, cho vào cốc 3 g natri hypoclorid, thêm từ từ vào cốc 1 ml acid hydrocloric để tạo khí clor, đậy nắp và để yên trong 30 giây để tạo môi trường khí clor trong buồng. Đặt bản mỏng đã để khô vào buồng sắc ký, đậy nắp và để yên trong 20 phút. Lấy bản mỏng ra khỏi buồng, để yên 10 phút trong không khí và xịt ethanol lên bản mỏng. Sau khi để khô, xịt dung dịch hồ tinh bột-kali iodid lên bản mỏng, quan sát dưới ánh sáng thường ngay sau khi vết chuẩn xuất hiện.

Yêu cầu : Trong sắc ký đồ của mẫu thử không được có vết tương đương vết acid pyrrolidon carboxylic trong sắc ký đồ của chuẩn (độ nhạy 0,2%).

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4.

...

...

...

Cân khoảng 250 mg (chính xác đến mg) mẫu thử đã được làm khô trước, hòa tan trong 6 ml acid formic, thêm 100 ml acid acetic băng. Chuẩn độ với dung dịch acid percloric 0,1 N, xác định điểm kết thúc chuẩn độ bằng đo thế. Tiến hành làm mẫu trắng song song để hiệu chỉnh nền

Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N tương đương với 8,308 mg C₁₀H₁₆CaN₂O₈. Tính hàm lượng dựa trên chế phẩm khan.

PHỤ LỤC 5

5’-Guanylic acid; Guanylic acid; GMP

INS 626

ADI không giới hạn

...

...

...

85-32-5

C₁₀H₁₄N₅O₈P

363,22

Tinh thể trắng hoặc không màu, bột tinh thể trắng; không mùi

Chất điều vị

Ít tan trong nước, thực tế không tan trong ethanol.

Dung dịch mẫu thử 1/50000 trong acid hydrocloric 0,01 N có cực đại hấp thụ tại 256±2 nm. Tỷ số A₂₅₆/A₂₆₀ trong khoảng từ 0,95 đến 1,03 và tỷ số A₂₈₀/A₂₆₀ trong khoảng từ 0,63 đến 0,71.

...

...

...

Phải có phản ứng đặc trưng của phosphat hữu cơ.

Không được quá 1,5%

(sấy ở 120 ^oC trong 4 giờ).

Dung dịch mẫu thử 1/400 có pH từ 1,5 đến 2,5 .

Không phát hiện bằng phương pháp sắc ký.

Không được quá 1 mg/kg.

Không thấp hơn 97,0% và không được quá 102,0% tính theo chế phẩm đã làm khô.

...

...

...

- Dịch thử là dung dịch mẫu thử 1/400.

- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4

- dùng 2 ml dung dịch mẫu thử 1/400.

Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4. Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ.

Cân khoảng 0,5 g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử hòa tan trong acid hydrocloric 0,01 N và định mức đến 1000 ml. lấy 10 ml dung dịch này pha loãng với acid hydrocloric 0,01 N vừa đủ để thu được 250 ml. Xác định độ hấp thụ quang của dung dịch này trong cuvet 1 cm tại bước sóng 260 nm và sử dụng dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng.

Tính hàm lượng % C₁₀H₁₄N₅O₈P trong mẫu thử theo công thức sau:

...

...

...

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID 5’-INOSINIC

5’- Inosinic acid; Inosinic acid; IMP

INS 630

ADI không giới hạn

Acid Inosin-5’-monophosphoric

131-99-7

C₁₀H₁₃N₄O₈P

...

...

...

Tinh thể trắng hoặc không màu, bột tinh thể trắng; không mùi

Chất điều vị

Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol.

Dung dịch mẫu thử 1/50000 trong acid hydrocloric 0,01 N có cực đại hấp thụ tại 250±2 nm. Tỷ số A₂₅₀/A₂₆₀ trong khoảng từ 1,55 đến 1,65 và tỷ số A₂₈₀/A₂₆₀ trong khoảng từ 0,20 đến 0,30.

Phải có phản ứng đặc trưng của ribose.

Phải có phản ứng đặc trưng của phosphat hữu cơ.

Không được quá 3,0% (sấy tại 120 ^oC trong 4 giờ).

...

...

...

Không phát hiện bằng phương pháp sắc ký.

Không được quá 1 mg/kg.

Không thấp hơn 97,0% và không được quá 102,0% tính theo chế phẩm đã làm khô.

- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4

- Dịch thử là dung dịch mẫu thử 1/400.

- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4

- dùng 1 ml dung dịch mẫu thử 1/200.

...

...

...

- Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ.

Cân khoảng 0,5 g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử hòa tan trong acid hydrocloric 0,01 N và định mức đến 1000 ml. lấy 10 ml dung dịch này pha loãng với acid hydrocloric 0,01 N vừa đủ để thu được 250 ml. Xác định độ hấp thụ quang của dung dịch trong cuvet 1 cm tại bước sóng 250 nm và sử dụng dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng.

Tính hàm lượng % C₁₀H₁₃N₄O₈P trong mẫu thử theo công thức sau:

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI MALTOL

INS 636

ADI = 0 - 1 mg/kg thể trọng

...

...

...

3-hydroxy-2-methyl-4-pyron

118-71-8

C₆H₆O₃

126,11

Bột tinh thể trắng có mùi caramel bơ ngào đường.

Chất điều vị, trợ hương, hương liệu.

Ít tan trong nước, tan trong ethanol và propylen glycol.

...

...

...

Phổ hấp thụ tử ngoại của dung dịch mẫu thử 10 mg/l trong acid hydrocloric 0,1 N có 1 cực đại hấp thụ tại 274 nm.

Không được quá 0,5%

Không được quá 0,2%. (Cân 5 g mẫu).

Không được quá 1 mg/kg.

Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm khan.

- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Phương pháp Karl-Fischer.

...

...

...

- Mẫu thử: Cân 5 g .

- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Xác định bằng kỹ thuật AAS-ICP/AES thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần Các phương pháp chung, tạp chất kim loại.

Dung dịch chuẩn

Cân 50 mg (chính xác) chuẩn Maltol USP, cho vào bình định mức 250 ml, hòa tan và định mức đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N và lắc đều. Dùng pipet lấy 5 ml cho vào bình định mức 100 ml, pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N, lắc đều.

Dung dịch định lượng

Cân 50 mg (chính xác) mẫu thử, cho vào bình định mức 250 ml, hòa tan và định mức đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N và lắc đều. Dùng pipet lấy 5 ml cho vào bình định mức 100 ml, pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N, lắc đều.

Tiến hành thử

...

...

...

Tính hàm lượng % của maltol trong mẫu thử theo công thức sau:

% Maltol = 100 x W_S x A_A / (A_S x W_A)

Trong đó:

A_A là độ hấp thụ quang của dung dịch mẫu (dung dịch định lượng)

A_S là độ hấp thụ quang của dung dịch chuẩn

W_A là khối lượng mẫu trong dung dịch định lượng (mg)

W_S là khối lượng chuẩn trong dung dịch chuẩn (mg)

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ETHYL MALTOL

...

...

...

ADI = 0 - 2 mg/kg thể trọng

Ethyl maltol thu được bằng cách tổng hợp hóa học

2-Ethyl-3-hydroxy-4-pyron

4940-11-8

C₇H₈O₃

140,14

Bột tinh thể trắng có mùi kẹo bông.

Chất điều vị, trợ hương, hương liệu.

...

...

...

Ít tan trong nước, tan trong ethanol và propylen glycol.

89^o - 93^o.

Phổ hấp thụ tử ngoại của dung dịch mẫu thử 10 mg/l trong acid hydrocloric 0,1 N có 1 cực đại hấp thụ tại 276 nm.

Không được quá 0,5% .

Không được quá 0,2%.

Không được quá 1 mg/kg.

Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm khan.

...

...

...

- Phương pháp Karl Fischer

- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4

- Cân 5 g mẫu

- Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Xác định bằng kỹ thuật AAS-ICP/AES thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần Các phương pháp chung, tạp chất kim loại.

Dung dịch chuẩn

Cân 50 mg (chính xác) chuẩn Ethyl maltol USP, cho vào bình định mức 250 ml, hòa tan và pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N và lắc đều. Dùng pipet lấy 5 ml cho vào bình định mức 100 ml, pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N, lắc đều.

Dung dịch mẫu thử

...

...

...

Tiến hành thử

Xác định độ hấp thụ quang của dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu thử tại 276 nm sử dụng cuvet đo 1-cm bằng thạch anh, acid hydrocloric 0,1 N là mẫu trắng.

Tính hàm lượng % của Ethyl maltol trong mẫu thử theo công thức sau:

% Ethyl maltol = 100 x W_S x A_A / (A_S x W_A)

Trong đó:

A_A là độ hấp thụ quang của dung dịch mẫu thử

A_S là độ hấp thụ quang của dung dịch chuẩn

W_A là khối lượng mẫu trong dung dịch định lượng (mg)

W_S là khối lượng chuẩn trong dung dịch chuẩn (mg)