Tiêu chuẩn TCVN 13848-1:2023 về Xác định hydrocacbon clo hóa trong da - Phần 1

• Số hiệu: TCVN13848-1:2023
• Loại văn bản: Tiêu chuẩn Việt Nam
• Nơi ban hành: ***
• Người ký: ***
• Ngày ban hành: Năm 2023

Trong đó

A_SCCP-S

là tổng diện tích pic của của các SCCP trong chất chuẩn hiệu chuẩn;

A_intStd-S

là diện tích của chuẩn nội trong chuẩn hiệu chuẩn;

a

là dộ dốc của hàm tuyến tính

b

là giao của hàm tuyến tính;

...

...

...

là nồng độ của các SCCP trong chất chuẩn hiệu chuẩn, μg/ml;

C_int.Std-S

là nồng độ của chất chuẩn nội trong chất chuẩn hiệu chuẩn, μg/ml.

Hàm lượng các SCCP trong da được tính theo Công thức (2) theo phần khối lượng, w, tính bằng mg/kg.

(2)

Trong đó:

A_SCCP-mẫu

là tổng diện tích pic của của các SCCP trong mẫu;

...

...

...

là diện tích của chất chuẩn nội trong mẫu;

a

là dộ dốc của hàm tuyến tính

b

là giao của hàm tuyến tính;

V

là thể tích cuối, ml;

m

là khối lượng của mẫu, g;

...

...

...

là nồng độ của chất chuẩn nội trong mẫu, μg/ml

9.5  Độ chụm

Với phương pháp này, có thể đạt được giới hạn định lượng 100 mg/kg.

10  Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm các thông tin sau:

a) viện dẫn tiêu chuẩn này;

b) tất cả các chi tiết cần thiết để nhận diện mẫu da được thử;

c) ngày thử:

d) kỹ thuật phân tích đã sử dụng để phát hiện và xác nhận;

...

...

...

f) các sai khác bất kỳ theo thỏa thuận hoặc theo phương pháp khác so với quy trình quy định.

Phụ lục A

(tham khảo)

Các thông số vận hành phân tích sắc ký khí (GC-ECNI-MS)

A.1  Các điều kiện GC-ECNI-MS đề xuất

Cột:

không phân cực (5 % phenyl metyl siloxan, chiều dài: 25m, đường kính trong: 0,25 mm, độ dày màng: 0,25 μm)

Khí mang:

...

...

...

Nhiệt độ buồng bơm

250 °C, không chia dòng, không chia thời gian: 1,5 min

Thể tích bơm

1 μl

Chương trình nhiệt độ

120 °C, lên đến 300 °C tại 12 °C/min, 300 °C trong 5 min

độ trễ dung môi: 4 min

tổng thời gian chạy: 20 min

Điều kiện MS:

...

...

...

Nguồn ion: 150 °C

tứ cực: 120 °C

Điều kiện ion hóa hóa học (CI):

Khí Cl: metan 5,5 (nghĩa là > 99,999 5 % CH₄)

Van Cl: 40 %

A.2  Tối ưu hóa hệ thống GC-ECNI-MS

Hệ thống phải được tối ưu hóa để có tỷ lệ tín hiệu tốt hoặc nhiễu. Nếu tốc độ quét không được chọn chính xác, đường nền nhiễu có thể ngăn cản việc giải thích hình dạng pic. Trong trường hợp này, nên cài đặt tốc độ quét nhanh hơn, ví dụ: 2^3.

A.3  Hiệu chuẩn và tính toán

Bảng A.1 - Tín hiệu ion m/z để định lượng và định tính

...

...

...

Chất

Định lượng/định tính

1

lindane

325/327

255/253

...

...

...

255/257

2

Các SCCP (C₁₀ đến C₁₃)

347/349

361/363

...

...

...

389/391

Phụ lục B

(tham khảo)

Thông số vận hành phân tích sắc ký lỏng (LC-MS/MS)

B.1  Giới thiệu

Có thể sử dụng hệ thống sắc ký lỏng ghép khối phổ đơn tứ cực (LC-MS] hoặc ba tứ cực (LC-MS/MS) nếu chứng minh được độ chính xác của phép đo tương đương với phương pháp GC-ECNI-MS.

...

...

...

Sử dụng các thiết bị phòng thí nghiệm thông thường và cụ thể là các thiết bị sau.

B.2.1  Cân phân tích, cân chính xác đến 0,1 mg.

B.2.2  Lọ kín, có nắp, 20 ml, thích hợp để chiết bằng hỗn hợp metanol/THF (1:1).

B.2.3  Bể siêu âm, có hệ thống điều nhiệt, có khả năng duy trì nhiệt độ (60 ± 5) °C.

CHÚ THÍCH: Tần số 40 KHz là phù hợp.

B.2.4  Pipet

B.2.5  Bình định mức, 2 ml,

B.2.6  Thiết bị bay hơi, ví dụ máy cô quay bay hơi chân không hoặc thiết bị gia nhiệt kiểm soát dòng khí trên chết lỏng.

B.2.7  Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) ghép khối phổ ba tứ cực (LC-MS/MS)

...

...

...

B.3  Thuốc thử

nếu không có quy định khác, chỉ sử dụng các hóa chất cấp phân tích.

B.3.1  Metanol, số CAS 67-56-1.

B.3.2  Tetrahydrofuran (THF), số CAS 109-99-9.

B.3.3  n-hexan, số CAS 110-54-3.

B.3.4  Các dung dịch chuẩn, SCCP, từ C₁₀ đến C₁₃, với mức độ clo hóa khác nhau, nồng độ mỗi dung dịch 100 μg/ml.

B.3.4.1  Các SCCP từ C₁₀ đến C₁₃, 55,5% Cl, cấp tinh khiết kỹ thuật.

B.3.4.2  Các SCCP từ C₁₀ đến C₁₃, 63% Cl, cấp tinh khiết kỹ thuật, số CAS 85535-84-8.

CHÚ THÍCH  Các dung dịch hiệu chuẩn SCCP này có bán sẵn trên thị trường.

...

...

...

Chuyển 533 μl dung dịch chuẩn các SCCP từ C₁₀ đến C₁₃ 55,5% Cl (B.3.4.1) và 467 μl dung dịch chuẩn các SCCP từ C₁₀ đến C₁₃ 63% Cl (B.3.4.2) vào bình định mức 2 ml (B.2.5) và làm đầy đến vạch mức bằng hỗn hợp metanol/THF (1:1). Sử dụng chất chuẩn hiệu chuẩn có hàm lượng clo 59% này để định lượng tất cả các mẫu, không phụ thuộc vào mức độ clo hóa của mẫu.

B.5  Chiết da và chuẩn bị dung dịch phân tích

Cân (0,5 ± 0,001) g mẫu da bằng cân phân tích (B.2.11), cho vào bình kín (B.2.2). Thêm 10 ml n-hexan (B.3.3) và đậy nắp bình. Chiết mẫu trong (60 ± 2) min ở (60 ± 5) °C trong bể siêu âm (B.2.3).

Thu hồi phần nổi phía trên và cô đặc bằng thiết bị bay hơi (B.2.6) đến khô. Phần cặn được pha đến 2 ml bằng hỗn hợp metanol/THF (1:1). Dung dịch thu được được lọc bằng màng lọc polyamit (B.2.8) và cho vào lọ để phân tích HPLC (B.2.7).

B.6  Các thông số thiết bị cho LC-MS/MS

Cột HPLC: cột C₁₈ pha ngược với nắp TMS, 100 x 2,1 mm, 2,6 μm.

Chất rửa giải A: nước

Chất rửa giải B: metanol

Chương trình Gradient: như được nêu trong Bảng B.1.

...

...

...

Thời gian

% A

% B

min

0,01

40

60

...

...

...

0

100

22,00

40

60

30,00

Dừng (stop)

Dừng (stop)

Tốc độ dòng: 0,2 ml/min

...

...

...

Quét: 80 Da đến 1000 Da

lon lựa chọn (Selected ion monitoring (SIM)): Kết quả được đánh giá là tổng diện tích các tín hiệu SIM được báo cáo trong Bảng B.2.

Bảng B.2 - ion m/z đối với các SCCP (STD C10 đến C13, hàm lượng Cl 55,5 %)

C₁₀Cl₈

415,10 đến 417,10 đến 419,10

C₁₂Cl₇

407,05 đến 409,05

C₁₃Cl₆

387,10 đến 389,10

...

...

...

421,05 đến 423,05

Ví dụ về sắc ký đồ của chất chuẩn các SCCP (C10 đến C13, hàm lượng Cl 55,5 %) sử dụng LC-MS/MS nêu trong Hình B.1.

Hình B.1 - Ví dụ sắc ký đồ phân tích các chấtSCCP bằng LC-MS/MS

B.7  Tính toán

Hàm lượng các SCCP trong da được được tính theo đường chuẩn thu được từ dung dịch hiệu chuẩn các SCCP (B.4) và trong khoảng từ 2,5 μg/ml đến 20 μg/ml.

Kết quả được tính bằng phần khối lượng, vv, tính bằng mg/kg theo công thức (B.1):

(B.1)

...

...

...

C_SCCP  là nồng độ các SCCP thu được từ đường chuẩn, μg/ml

V  là thể tích cuối cùng, ml;

m_s  là khối lượng của mẫu, g.

Phụ lục C

(tham khảo)

Phương pháp tích phân sử dụng việc đánh giá hình dạng pic (PSE) và GC-ECNI-MS

C.1  Giới thiệu

Phương pháp PSE là phương pháp được chấp nhận để xác định diện tích các pic (9.1) đối với các sắc ký đồ phức tạp. sắc ký đồ các kết quả phân tích ở tiêu chuẩn này được lấy từ ISO 22818. Hình dạng pic điển hình của sắc ký đồ chất chuẩn hiệu chuẩn được so sánh với sắc ký đồ của các mẫu thử đối với cùng ion m/z.

...

...

...

Sắc ký đồ ion tổng (TIC) phải bằng khoảng 59 % dung dịch chuẩn các SCCP (c = 50 μg/ml) liên quan đến độ hấp thụ (chiều cao).

C.3  Đánh giá hình dạng pic (PSE)

Các pic được đánh giá bằng cách tham chiếu với các pic tương ứng với chuẩn hiệu chuẩn (xem Hình C.1 đến Hình C.4), liên quan đến thời gian lưu, hình dạng pic và tỷ lệ định lượng/định tính như sau:

- phân phối cực đại pic và toàn bộ hình dạng được đánh giá trực quan

- Phải loại bỏ hoàn toàn các pic không phù hợp, (xem Hình C.4).

- đối với các pic khớp một phần, chỉ tích phân diện tích phù hợp (xem Hình C.3, ví dụ đối với m/z 347).

- các pic khớp được tích phân trong toàn bộ khoảng thời gian lưu của chúng (xem Hình C.2). Nếu phát hiện thấy có tín hiệu chồng lấn hoặc nhiễu rõ ràng, chúng phải loại trừ khỏi tích phân càng nhiều càng tốt.

C.4  Tỷ lệ định lượng/định tính

Tỷ lệ định lượng/định tính phải tương ứng với tỷ lệ của chuẩn (chấp nhận sai lệch ± 30%).

...

...

...

lon định tính C₁₁Cl₇ (m/z 363) có thể chỉ ra sự quá tải lớn đối với mẫu có hàm lượng các SCCP cao. lon định lượng C₁₂Cl₇ (m/z 375) có thể chỉ ra sự quá tải lớn đối với mẫu có hàm lượng các MCCP cao.

C.6  Nhiễu của Hình C.1 đến Hình C.4

Hình C.1 chỉ ra việc sử dụng các vết ion chất chuẩn các SCCP 59 %CI.

Hình C.2 nêu các ví dụ các mẫu khớp với chất chuẩn các SCCP 59 %CI.

Hình C.3 nêu các ví dụ các mẫu khớp một phần với chất chuẩn các SCCP 59 %CI.

Hình C.4 nêu các ví dụ các mẫu không khớp với chất chuẩn các SCCP 59 %CI.

CHÚ DẪN

X thời gian, min

...

...

...

Hình C.1 - Chất chuẩn các SCCP 59 % Cl, các vết ion khác nhau

Trong mỗi hình từ Hình C.2 đến Hình C.4, sắc ký đồ trên biểu thị chất chuẩn, sắc ký đồ dưới biểu thị mẫu.

CHÚ DẪN

X thời gian, min

Y độ hấp thụ, counts

Hình C.2 - Ví dụ các mẫu khớp với chất chuẩn các SCCP 59 % Cl, trên là sắc ký đồ chất chuẩn, dưới là sắc ký đồ mẫu

CHÚ DẪN

...

...

...

Y  độ hấp thụ, counts

Hình C.3 - Ví dụ các mẫu khớp một phần với chất chuẩn các SCCP 59 %CI, trên là sắc ký đồ chất chuẩn, dưới là sắc ký đồ mẫu

CHÚ DẪN

X  thời gian, min

Y  độ hấp thụ, counts

Hình C.4 - Ví dụ các mẫu không khớp với chất chuẩn các SCCP 59 % Cl, trên là sắc ký đồ chất chuẩn, dưới là sắc ký đồ mẫu

Thư mục tài liệu tham khảo

...

...

...

[2] Regulation EU 1907/2006 (REACH), Candidate list of substances of very high concern (SVHC), Ortober 2008. https://echa.europa.eu/candidate-list-table

[3] COMMISSION REGULATION (EU) 2015/2030, of 13 November 2015 amending Regulation (EC) No 850/2004 of the European Parliament and of the Council on persistent organic pollutants as regards Annex I. https://eur-lex.europa.eu/legal-content/en/txt/pdf

[4] UNITED NATIONS, Stockholm Convention on Persistent Organic Pollutants (POP). Annex A, 2017. http://chm.pops.int/theConvention/ThePOPs/AIIPOPs/tabid/2509/Default.aspx