Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11835:2017 về Mật ong - xác định dư lượng carbendazim bằng sắc lỏng khối phổ

• Số hiệu: TCVN11835:2017
• Loại văn bản: Tiêu chuẩn Việt Nam
• Nơi ban hành: ***
• Người ký: ***
• Ngày ban hành: Năm 2017

STT	Nồng độ chuẩn trong mẫu (µg/kg)	Thể tích chuẩn (4.15) thêm vào (µl)	Thể tích chuẩn (4.14) thêm vào (µl)	Thể tích nội chuẩn (4.18) thêm vào (µl)
1	0	0		100
2	7,5	75		100
3	15	150		100
4	30		30	100
5	60		60	100
6	120		120	100

7.4.1  Tính hệ số tín hiệu

Tính cho chất cần phân tích theo công thức:

RF=

Sp

Sp_IS

Trong đó: RF: hệ số tín hiệu;

Sp: tổng diện tích pic của các ion con của chất cần phân tích;

...

...

...

7.4.2  Xây dựng đường chuẩn

Xây dựng phương trình bậc nhất giữa hệ số tín hiệu với nồng độ chất chuẩn bổ sung vào mẫu và chuẩn bị mẫu theo mục 7.4. Phương trình đường chuẩn có dạng có dạng: RF = ax + b. Trong đó:

RF là hệ số tín hiệu, tính theo điều 7.4.1;

x là nồng độ chất chuẩn, tính theo đơn vị µg/l;

b là điểm cắt của đường chuẩn với trục tung;

a là hệ số góc của đường chuẩn.

8  Cách tiến hành

8.1  Chiết mẫu và làm sạch mẫu

Cho 10 ml nước cất vào mẫu thử (7.1). Thêm 10 ml 1% axit axetic trong axetonitril (4.11), lắc bằng máy vortex (5.4) trong 1 min, lắc bằng máy lắc ngang (5.6) trong 15 min. Thêm 1 g natri axetat (4.6) và 4 g magie sulfat (4.7), tiếp tục lắc bằng máy voltex (5.4) trong 1 min. Ly tâm ống bằng máy ly tâm (5.3) trong 10 min ở tốc độ 4000 r/min. Hút dịch chiết lớp trên, lọc bằng màng lọc (5.14), đưa vào lọ đựng mẫu (5.11). Tiến hành phân tích trên hệ thống LC-MS/MS (5.1).

...

...

...

8.2.1  Yêu cầu chung

Chuẩn hóa các điều kiện của sắc ký lỏng như tốc độ dòng, thành phần pha động, nhiệt độ cột và các điều kiện của đầu dò MS/MS như điện thế mao quản, điện thế đầu cone, năng lượng va chạm, tốc độ khí va chạm để mỗi chất phân tích thu được tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu (S/N) lớn hơn 3 cho các phân mảnh ion và luôn tồn tại 4 điểm nhận dạng (IP) bao gồm 1 ion mẹ, 2 ion con; không có píc nhiễu tại vị trí của píc phân tích.

8.2.2  Điều kiện trên LC

Nhiệt độ cột: (40 ± 5) °C

Tốc độ dòng: 0,2 ml/min

Thể tích bơm mẫu: 5 µl

Thời gian phân tích: 10 min

Pha động: Chạy theo chương trình gradient thể hiện theo Bảng 2

Bảng 2 - Điều kiện gradient cho hệ thống LC

...

...

...

Kênh A

Kênh B

Nước + 0,01% axit formic

Axetonitril + 0,01% axit formic

0,0

0,2

95

0,5

0,2

...

...

...

6,0

0,2

5

7,0

0,2

5

7,5

0,2

95

...

...

...

0,2

95

8.2.3  Điều kiện trên MS:

Kiểu ion hóa:

ESI (+)

Nhiệt độ nguồn ion hóa:

150 °C

Nhiệt độ hóa hơi dung môi:

500 °C

...

...

...

600 l/h

Tốc độ dòng khí qua khối nón:

50 l/h

Áp suất khí va chạm:

Argon, p = 2,93x10^-^3 mbar

Điện thế mao quản:

2,0 kV

Bảng 3 - Điều kiện phân mảnh MS/MS

STT

...

...

...

Thời gian lưu

(min)

Ion mẹ

(m/z)

Ion con

(m/z)

Năng lượng va chạm CE

(eV)

Năng lượng (Sample Cone)

...

...

...

1

Thiophanate-metyl

5,2

343,2

310,9

18

20

150,9*

10

...

...

...

Carbendazime

3,5

191,9

159,9*

28

24

131,9

18

3

...

...

...

3,5

194,8

159,9

16

24

Ghi chú: ion ký hiệu (*) dùng để định lượng.

8.3  Trình tự bơm mẫu

- Bơm dung môi kiểm tra máy: Axetonitril (4.2);

- Bơm các dung dịch để dựng đường chuẩn;

...

...

...

- Bơm mẫu kiểm soát;

- Bơm mẫu thử.

9  Tính và biểu thị kết quả

9.1  Tính kết quả

Dư lượng chất phân tích trong mẫu thử được tính theo phương pháp đường chuẩn. Hàm lượng chất phân tích trong mẫu được tính theo công thức sau:

Trong đó:

C là hàm lượng chất phân tích có trong mẫu, tính bằng microgam trên kilogam (µg/kg);

C_x là nồng độ chất phân tích được suy ra từ đường chuẩn, tính bằng microgam trên lít (µg/l);

...

...

...

F là hệ số pha loãng mẫu khi đo (nếu không pha loãng, F = 1);

m là khối lượng mẫu thử, tính bằng gam (g).

9.2  Biểu thị kết quả

Kết quả được biểu thị bằng đơn vị µg/kg (ppb) đến hai số sau dấu phẩy.

10  Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ:

- Thông tin cần thiết về việc nhận biết đầy đủ mẫu thử;

- Phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu có;

- Phương pháp thử đã sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này;

...

...

...

- Kết quả thử nghiệm thu được.

Thư mục tài liệu tham khảo

[1] Qui trình nội bộ VS1/QT/95/TD “Mật ong - Xác định dư lượng carbendazim bằng phương pháp sắc ký lỏng ghép hai lần khối phổ”

[2] De'bora Tomasini, Maicon R.F. Sampaio, Sergiane S. Caldas, Jaqueline G. Buffon, Fa'bio A. Duarte, Ednei G. Primel, "Simultane ous determ ination of pesticides and 5-hydroxy metyl furfural in honey by the modified QuEChERS method and liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry”, Elsavier (2012).

[3] AOAC 2012 Appendix F; Guidline for Standard Method Performance Requirements.

[4] EFSA Journal 2012; 10(4)2685.