Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10715-2:2015 về Dầu mỡ động vật và thực vật - bơ cacao trong bơ cacao và sôcôla thông dụng - Phần 2

• Số hiệu: TCVN10715-2:2015
• Loại văn bản: Tiêu chuẩn Việt Nam
• Nơi ban hành: ***
• Người ký: ***
• Ngày ban hành: Năm 2015

Pref,i	là phần trăm triacylglycerol thứ i trong CRM bơ cacao (từ các diện tích pic);
Aref,i	là diện tích pic của triacylglycerol thứ i trong CRM bơ cacao;
	là tổng các diện tích pic của POP, POS, POO, SOS, SOO trong CRM bơ cao cacao;
Fi	là hệ số đáp ứng detector của triacylglycerol thứ i trong CRM bơ cacao;
wref,i	là phần khối lượng của triacylglycerol thứ i trong CRM bơ cacao như đã nêu trong giấy chứng nhận, tính bằng phần trăm (%).

Báo cáo kết quả đến hai chữ số thập phân.

9.2. Tính phần trăm của các triacylglycerol

Tính phần trăm của các triacylglycerol POP, POS, POO, SOS và SOO trong mẫu thử bằng công thức sau:

                           (3)

Trong đó

w_{test, i}     là phần khối lượng của triacylglycerol thứ i trong mẫu thử, tính bằng phần trăm (%);

A_{test, i}     là diện tích pic tương ứng với triacylglycerol thứ i trong mẫu thử;

F_i          là hệ số đáp ứng xác định được trong 9.1.

9.3. Tính hàm lượng CBE trong bơ cacao

...

...

...

c_CBE,CB = 37,439 + 1,175 x POP - 1,939 x POS - 0,121 x POO + 0,982 x SOS - 0,097 x SOO   (4)

Báo cáo các kết quả đến hai chữ thập phân, tính bằng gam trên 100 g.

Công thức (4) được thiết lập bằng cách sử dụng bộ hiệu chuẩn 798 của hỗn hợp CB/CBE chứa 10 %, 15 % và 20 % CBE. Việc sử dụng CRM bơ cacao trong phương pháp này là bắt buộc để hiệu chuẩn và kiểm tra sự phù hợp của hệ thống đảm bảo độ ổn định của các kết quả thu được từ các phòng thử nghiệm riêng rẽ và tính giao hoán của quy trình đã được soạn thảo ^[4].

Trong 99 % các trường hợp đã sử dụng chất béo bán sẵn trên thị trường, sai số dự đoán không quá ± 2,60 % liên quan đến bơ cacao.

9.4. Tính hàm lượng CBE trong sôcôla

Hàm lượng CBE cuối cùng trong sản phẩm sôcôla, c_{CBE, choc}, biểu thị bằng gam CBE trên 100 g sôcôla, được tính bằng Công thức (5):

                                     (5)

Trong đó

c_fat là tổng hàm lượng chất béo của sôcôla, tính bằng gam trên 100 g, xác định được trong 8.1;

...

...

...

Báo cáo các kết quả đến hai chữ thập phân.

Trong 99 % các trường hợp đã sử dụng chất béo bán sẵn, trên thị trường để tạo hỗn hợp, sai số dự đoán không quá ± 0,78 % liên quan đến sôcôla (hàm lượng chất béo của sôcôla được giả định là 30 %).

10. Yêu cầu đối với qui trình

10.1. Yêu cầu chung

Các chi tiết của qui trình sắc ký phụ thuộc vào nhiều yếu tố khác: thiết bị, loại cột, tuổi cột và nhà cung cấp cột, cách lấy dung dịch thử, cỡ mẫu và detector. Có thể sử dụng chiều dài, nhãn hiệu cột khác nhau và các thể tích bơm có thể được thay đổi, nếu đáp ứng được các yêu cầu của phép thử phù hợp của hệ thống (10.2).

10.2. Sự phù hợp hệ thống

Sử dụng CRM bơ cacao (4.1) để kiểm tra sự phù hợp của hệ thống tách.

a) Độ phân giải

Hệ thống tách HR-GC phải có khả năng tách các cặp POS/POO và SOS/SOO có độ phân giải sắc ký ít nhất 1,0. Nếu không, cần tối ưu hóa các điều kiện sắc ký (ví dụ: cỡ mẫu, nhiệt độ cột, dòng khí mang).

...

...

...

Để kiểm tra việc giả định hệ số đáp ứng detector ion hóa ngọn lửa của các triacylglycerol không chênh lệch đáng kể, CRM bơ cacao phải được phân tích ở các điều kiện GC chuẩn. Kinh nghiệm cho thấy rằng đối với hệ thống sắc ký hoạt động tốt thì hệ số đáp ứng đối với năm triacylglycerol chính (POP, POS, POO, SOS, SOO) dao động trong dải từ 0,80 đến 1,20.

11. Độ chụm

11.1. Phép thử liên phòng thử nghiệm

Các chi tiết của phép thử liên phòng thử nghiệm về độ chụm được nêu trong Phụ lục A. Các giá trị thu được từ phép thử liên phòng thử nghiệm này có thể không áp dụng cho các dải nồng độ và các nền mẫu khác với các dải nồng độ và các nền mẫu đã nêu.

11.2. Độ lặp lại

Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử nghiệm độc lập, riêng rẽ, thu được khi sử dụng cùng một phương pháp thử, tiến hành trên cùng một vật liệu thử, thực hiện trong cùng một phòng thử nghiệm, do một người phân tích, sử dụng cùng thiết bị, trong một khoảng thời gian ngắn, không được quá 5 % các trường hợp lớn hơn 0,721 g/100 g liên quan đến bơ cacao và 0,216 g/100 g liên quan đến sôcôla trong sản phẩm cuối cùng (với giả định rằng hàm lượng chất béo của sôcôla là 30 %).

Các giá trị về giới hạn lặp lại, r, như tìm thấy trong nghiên cứu kiểm tra đánh giá được nêu trong Bảng A.2 đến A.4.

11.3. Độ tái lập

Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử nghiệm riêng rẽ thu được khi sử dụng cùng một phương pháp thử, tiến hành trên cùng một vật liệu thử, thực hiện trong các phòng thử nghiệm khác nhau, do những người khác nhau thực hiện, sử dụng các thiết bị khác nhau, không được quá 5 % các trường hợp lớn hơn 1,719 g/100 g liên quan đến bơ cacao và 0,516 g/100 g liên quan đến sản phẩm sôcôla cuối cùng (với giả định rằng hàm lượng chất béo của sôcôla là 30 %).

...

...

...

12. Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm:

a) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu;

b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết;

c) phương pháp thử đã sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này;

d) mọi chi tiết thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc được coi là tùy chọn, cùng với mọi tình huống bất thường có thể ảnh hưởng đến kết quả;

e) kết quả thử nghiệm thu được hoặc nếu đáp ứng yêu cầu về độ lặp lại thì nêu kết quả cuối cùng thu được.

Phụ lục A

...

...

...

Các kết quả của phép thử liên phòng thử nghiệm

Phương pháp đã được đánh giá xác nhận năm 2002 trong phép thử liên phòng thử nghiệm Châu Âu với 13 nước tham gia ^[5] [6]. Phương pháp đã được đánh giá xác nhận về các mức CBE, khoảng 5 % CBE trong sôcôla; nghĩa là hỗn hợp của 5 g, 25 g và 30 g CBE/100 g bơ cacao tương ứng 4,5 g, 7,5 g và 9,0 g CBE trong sôcôla (hàm lượng chất béo của sôcôla được giảm định là 30 %).

Bảng A.1 cho thấy các điều kiện GC thích hợp3). Một ví dụ về triacyglycerol của CRM bơ cao cao nêu trong Hình A.1. Các kết quả về độ chụm nêu trong Bảng A.2 đến A.4.

Bảng A.1 - Các điều kiện GC thích hợp đã được dùng để phân tích triacylglycerol trong bơ cacao, CBE, hỗn hợp CB/CBE và sôcôla

Phương pháp có thể thực hiện

1

2

3

4

...

...

...

Đặc tính của cột:

- Pha tĩnh

- chiều dài (m)

- đường kính (mm)

- độ dày màng (mm)

DB-17HT

30

0,25

...

...

...

RTx-65TG

30

0,25

0,1

CB-TAP

25

0,25

...

...

...

RTx-65TG

30

0,25

0,1

CB

25

0,25

...

...

...

Chế độ nhiệt độ (lò cột)

- nhiệt độ bơm (^oC)/thời gian giữ nhiệt (min)

80/2

340/1

280/0

...

...

...

340/0

- tốc độ chương trình 1 (^oC/min)

50

1

10

50

1

- nhiệt độ 1 (^oC)/thời gian giữ nhiệt (min)

...

...

...

-

320/0

330/2

-

- tốc độ chương trình 2 (^oC/min)

30

-

2

1

...

...

...

- nhiệt độ 2 (^oC)/thời gian giữ nhiệt (min)

-

-

-

-

-

- tốc độ chương trình 3 (^oC/min)

-

-

...

...

...

-

-

- nhiệt độ cuối cùng (^oC)/thời gian giữ nhiệt (min)

350/30

360/3

360/6

350/5

360/10

- nhiệt độ bơm (^oC)

...

...

...

390

370

Chương trình nhiệt độ của lò (oven track)

360

- nhiệt độ detector (^oC)

360

370

370

355

...

...

...

Chế độ bơm

Khí mang:

- loại

- áp suất (kPa)

- tốc độ dòng (ml/min)

OCI

H₂

-

...

...

...

chia dòng

H₂

120

-

chia dòng

H₂

100

...

...

...

OCI

He

-

0,8

chia dòng

He

150

...

...

...

Mẫu:

- nồng độ (mg/ml)

- thể tích được bơm (ml)

0,3

0,5

50

0,1

...

...

...

12,5

0,6

0,3

0,5

1

Bảng A.1 (kết thúc)

...

...

...

6

7

8

9

10

11

Đặc tính của cột:

- Pha tĩnh

- chiều dài (m)

...

...

...

- độ dày màng (mm)

RTX-65 TG

30

0,25

0,1

CB-TAP

25

...

...

...

0,1

DB-17HT

30

0,25

0,15

CB-TAP

25

...

...

...

0,1

CB-TAP

25

0,25

0,1

CB-TAP

25

...

...

...

0,1

Chế độ nhiệt độ (lò cột)

- nhiệt độ bơm (^oC)/thời gian giữ (min)

...

...

...

100/0,1

50/2

200/2

100/1

200/2

- tốc độ chương trình 1 (^oC/min)

15

70

50

...

...

...

30

12

- nhiệt độ 1 (^oC)/thời gian giữ (min)

360/0

-

300/1

320/0

300/2

-

...

...

...

1

-

10

1

30

-

- nhiệt độ 2 (^oC)/thời gian giữ (min)

-

-

...

...

...

-

-

-

- tốc độ chương trình 3 (^oC/min)

-

-

0/5

-

-

...

...

...

- nhiệt độ cuối cùng (^oC)/thời gian giữ (min)

370

350/21

345/26

360/10

340/35

350/10

- nhiệt độ bơm (^oC)

390

...

...

...

50

65-220-370

100

- nhiệt độ detector (^oC)

390

360

360

370

...

...

...

360

Chế độ bơm

chia dòng

OCI

OCI

OCI

OCI

OCI nóng

Khí mang:

...

...

...

- áp suất (kPa)

- tốc độ dòng (ml/min)

H₂

150

-

H₂

-

...

...

...

H₂

120

-

He

90

-

...

...

...

150

-

H₂

-

2,4

Mẫu:

- nồng độ (mg/ml)

- thể tích bơm (ml)

...

...

...

10

0,5

15

0,5

0,5

0,5

...

...

...

0,1

0,5

0,4

0,65

0,3

Nhận biết pic: 1, PPP; 2, MOP; 3, PPS; 4, POP; 5, PLP; 6, chưa nhận biết; 7, PSS; 8, POS; 9, POO; 10, PLS; 11, PLO; 12, không xác định; 13, SSS; 14, SOS; 15, SOO; 16, SLS + OO; 17, SLO; 18, không xác định; 19, không xác định; 20, SOA; 21, AOO.

...

...

...

Cột GC:

25 m x 0,25 mm cột mao quản silica nung chảy được phủ 0,1 mm Chrompack TAP

Nhiệt độ sấy:

100 ^oC giữ được trong 1 min; 30 ^oC/min đến 340 ^oC giữ được trong 35 min

Bơm:

Bơm lên cột lạnh

Detector (FID):

360 ^oC

Khí mang:

...

...

...

Lượng được bơm:

0,5 ml của dung dịch 0,5 mg/ml

Các chữ viết tắt:

PPP: Tripalmitin

SSS: Tristearin

MOP: 1-Margaroyl-2-oleoyl-3-palmitoylglycerol

SOS: 1,3-Distearoyl-2-oleoylglycerol

PPS: 1,2-Dipalmitoyl-3-stearoylglycerol

SOO: 1-Stearoyl-2,3-dioleoylglycerol

...

...

...

SLS: 1,3-Distearoyl-2- linoleoyl glycerol

PLP: 1,3-Dipalmitoyl-2-linoleoylglycerol

OOO: Triolein

PSS: 1-Palmitoyl-2,3-distearoylglycerol

SLO: 1- Stearoyl -2-linoleoyl-3-oleoylglycerol

POS: 1-Palmitoyl-2-oleoyl-3-stearoylglycerol

SOA: 1-Stearoyl-2-oleoyl-arachidoylglycerol

POO: 1-Palmitoyl-2,3-dioleoylglycerol

AOO: 1-Arachidoyl-2,3- dioleoylglycerol

...

...

...

Hình A.1 - Triacylglycerol của CRM bơ cacao

Bảng A.2 - Dữ liệu về độ chụm đối với mẫu sôcôla và hỗn hợp CB/CBE đã được chuẩn bị có CB từ Grenada và CBE loại PFM/(cây hạt mỡ + lllipe’) (35 % và 65 % phần khối lượng)

Mẫu

Mẫu sôcôla

Mức thấp

Mức trung bình

Mức cao

Số lượng các phòng thử nghiệm

...

...

...

Số lượng các kết quả được chấp nhận

13

1

12

13

1

12

13

0

...

...

...

13

0

13

Giá trị trung bình, g CBE /100 g

CB Giá trị thực, g CBE/100 g CB

Độ chênh lệch, g CBE/100 g CB

13,992

-

-

...

...

...

14,790

-0,352

24,798

24,920

0,122

29,563

30,010

0,447

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r, g/100 g

...

...

...

Giới hạn lặp lại, r [=2,83 x s_r], g/100 g

0,258

1,84

0,721

0,167

1,11

0,469

0,181

0,73

...

...

...

0,222

0,75

0,623

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R, g/100 g

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, %

Giới hạn tái lập, R [=2,83 x s_R], g/100 g

0,614

4,39

1,719

...

...

...

2,36

1,000

0,410

1,65

1,148

0,541

1,83

1,514

Bảng A.3 - Dữ liệu về độ chụm đối với hỗn hợp CB/CBE được chuẩn bị có CB từ Ghana và CBE loại PFM/Cây hạt mỡ (50 % và 50 % phần khối lượng)

...

...

...

Mức thấp

Mức trung bình

Mức cao

Số lượng các phòng thử nghiệm

Số lượng các phòng thử nghiệm ngoại lệ

Số lượng các kết quả được chấp nhận

13

2

11

...

...

...

1

12

13

0

13

Giá trị trung bình, g CBE /100 g

CB Giá trị thực, g CBE/100 g CB

Độ chênh lệch, g CBE/100 g CB

16,627

...

...

...

-1,557

25,871

24,900

-0,971

30,686

30,010

-0,676

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r, g/100 g

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, %

...

...

...

0,214

1,29

0,599

0,258

1,00

0,722

0,158

0,51

0,442

...

...

...

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, %

Giới hạn tái lập, R [=2,83 x s_R], g/100 g

0,229

1,37

0,640

0,427

1,65

1,196

0,452

...

...

...

1,265

Bảng A.4 - Dữ liệu về độ chụm đối với hỗn hợp CB/CBE được chuẩn bị có CB từ Bờ Biển Ngà và CBE của PFM/cây chai/cây xoài (50 %, 25 % và 25 % phần khối lượng)

Mẫu

Mức thấp

Mức trung bình

Mức cao

Số lượng các phòng thử nghiệm

Số lượng các phòng thử nghiệm ngoại lệ

Số lượng các kết quả được chấp nhận

...

...

...

0

13

13

1

12

13

0

13

Giá trị trung bình, g CBE /100 g

...

...

...

Độ chệch, g CBE/100 g CB

15,655

14,970

-0,685

24,170

24,970

0,800

28,535

29,960

...

...

...

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r, g/100 g

Độ chênh lệch tương đối lặp lại, %

Giới hạn lặp lại, r [=2,83 x s_r], g/100 g

0,223

1,43

0,625

0,189

0,78

0,530

...

...

...

0,78

0,621

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R, g/100 g

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, %

Giới hạn tái lập, R [=2,83 x s_R], g/100 g

0,309

1,98

0,866

0,356

...

...

...

0,997

0,406

1,42

1,138

THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO

[1] Directive 2000/36/EC of the European Parliament and of the council of 23 June 2000 relating to cocoa and chocolate products intended for human consumption. Offcial Journal, L 197, 03/80/2003,19-25

[2] KOEBER, R., BUCHGRABER, M., ULBERTH, F., BACAROLO, R., BERNREUTHER, A., SCHIMMEL, H., ANKLAM, E. and PAUWELS, J. The certification of the content of five triglycerides in cocoa butter, 2003, EUR 20781 EN, ISBN 92-894-6036-9

[3] Official methods of analysis of AOAC international, AOAC Official method 963.15: Fat in Cacao products, 1995

...

...

...

[5] BUCHGRABER, M. ULBERTH, G. and ANKALAM, E. Method validation fo detection and quantification of cocoa butter equivalents in cocoa butter ans plain chocolate. J. AOAC Internat., 87, 2004, pp. 1164-1172

[6] BUCHGRABER, M. and ANKALAM, E. Validation for the detection of cocoa butter equivalents in cocoa butter and plain chocolate, 2003, EUR 20685 EN, ISBN 92-894-5510-1

[7] TCVN 2625 (ISO 5555), Dầu mỡ động vật và thực vật - Lấy mẫu

^1) Giấy lọc trung bình S&S 589 là một ví đụ về sản phẩm phù hợp bán sẵn.

^2) Philips HR2833 là ví dụ về thiết bị bán sẵn.

Thông tin này đưa ra tạo thuận tiện cho nghười sử dụn tiêu chuẩn và không ấn định phải sử dụng sản phẩm này.

^3) Các loại cột này là các ví dụ về các sản phẩm phù hợp bán sẵn. Thông tin này đưa ra tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định phải sử dụng sản phẩm này.