Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11599:2016 về Thịt và sản phẩm thịt - Xác định dư lượng ractopamin

• Số hiệu: TCVN11599:2016
• Loại văn bản: Tiêu chuẩn Việt Nam
• Nơi ban hành: ***
• Người ký: ***
• Ngày ban hành: Năm 2016

- Cột:	Cột HPLC (4.25)
- Bước sóng:	Bước sóng kích thích ở 226 nm, bước sóng phát xạ 306 nm
- Nhiệt độ cột:	Nhiệt độ phòng
- Pha động (3.20)
- Tốc độ dòng:	1,0ml/min
- Thể tích bơm:	100 μl
- Thời gian chạy:	15 min.

6.5.2  Sự phù hợp hệ thống

6.5.2.1  Tỷ lệ tín hiệu/nhiễu của dung dịch chuẩn 5 ng/ml phải tối thiểu bằng 10.

6.5.2.2  Pic ractopamin phải được phân giải tốt ra khỏi bề mặt dung môi và rửa giải từ 4 min đến 8 min.

6.5.2.3  Hệ số đuôi, T, đối với pic chuẩn ractopamin 10 ng/ml tối đa là 1,8, trong đó T được xác định bằng Công thức (1):

(1)

Trong đó

W_0,10 là chiều rộng pic ở 10 % chiều cao pic;

f là chiều rộng tính từ cực đại pic đến mép của 10 % chiều cao pic.

...

...

...

- Bơm dung dịch chuẩn phân giải (3.28), dùng các điều kiện như mô tả trong phương pháp.

- Hệ số phân giải (R_s) đối với pic bên cạnh, được tính bằng Công thức (2):

(2)

Trong đó

t₁ và t₂ là thời gian lưu của hai chất thứ nhất và thứ hai;

w₁ và w₂ là chiều rộng của pic thứ nhất và thứ hai.

Trong đó, nếu tỷ lệ tín hiệu/nhiễu không đáp ứng yêu cầu trong 6.5.2.1, thì detector có thể không đủ để phân tích ở mức được yêu cầu theo phương pháp này. Nếu không đáp ứng các điều kiện được quy định từ 6.5.2.2 đến 6.5.2.4, thì có thể cần thay đổi pha động hoặc có thể thay cột.

CHÚ THÍCH Việc giảm nồng độ axetonitril trong pha động làm tăng độ phân giải ractopamin ra khỏi ritodrin.

...

...

...

6.5.3.1  Đối với hệ thống HPLC được sử dụng, kiểm tra xác nhận rằng các yêu cầu đối với sự phù hợp hệ thống được đáp ứng.

6.5.3.2  Bơm riêng dung dịch chuẩn và bơm riêng từng dung dịch chiết mẫu. Nên bơm dãy chất chuẩn khi bắt đầu và khi kết thúc bơm từng đợt phân tích.

6.5.3.3  Đo diện tích pic của ractopamin trong chất chuẩn và dung dịch mẫu. Dựng đường chuẩn tuyến tính, dùng tất cả các độ đáp ứng chuẩn. Từ đường chuẩn, tính nồng độ từng dung dịch chiết mẫu, biểu thị bằng nanogam trên mililit (ng/ml).

6.5.3.4  Nếu diện tích pic của ractopamin trong mẫu vượt quá điểm cao nhất của đường chuẩn thì dịch chiết cuối cùng phải được pha loãng và được bơm lại song song với một dãy chuẩn.

6.5.3.5  Nên dội mạnh cột bằng hỗn hợp dung môi/nước [axetonitril hoặc metanol-nước, 80 + 20 (thể tích)] sau mỗi lần chạy để loại bỏ nền mẫu còn lại ra khỏi cột.

7  Tính kết quả

7.1  Nồng độ ractopamin hydroclorua trong mẫu thử, X₁, biểu thị bằng nanogam trên gam (ng/g), được tính theo Công thức (3):

(3)

...

...

...

A là diện tích pic HPLC của mẫu;

B là giao điểm của đường chuẩn với trục tung;

C là độ dốc của đường chuẩn (diện tích/ml/ng);

D là độ tinh khiết của chất chuẩn đối chứng, tính bằng gam (g);

F là khối lượng mẫu, tính bằng gam (g);

E là tổng thể tích dịch chiết tương ứng với phần mẫu thử, tính bằng mililit (ml), được tính bằng Công thức (4):

(4)

Trong đó

...

...

...

N là thể tích dịch chiết đã sử dụng, tính bằng mililit (ml);

G là thể tích dịch lọc cuối cùng, tính bằng miliiit (ml).

7.2  Nồng độ ractopamin tự do trong mẫu thử, X₂, biểu thị bằng nanogam trên gam (ng/g), được tính theo Công thức (5):

X₂ = X₁ x 0,89476

(5)

Trong đó 0,89476 là tỉ lệ khối lượng phân tử giữa ractopamin tự do và ractopamin hydroclorua.

CHÚ THÍCH: Công thức dựa trên giả định rằng đường chuẩn chưa được hiệu chính đối với độ tinh khiết của chất chuẩn. Nhiều hệ thống dữ liệu sắc ký tự động hiệu chính đường chuẩn về độ tinh khiết nếu thực hiện lắp đặt. Nếu áp dụng việc hiệu chính như vậy hoặc nếu dung dịch chuẩn gốc được hiệu chính đối với độ tinh khiết thì không cần hiệu chính độ tinh khiết của chất chuẩn đối chứng (D). Nếu mẫu là mẫu thu hồi được bổ sung và hệ thống dữ liệu hiệu chính đường chuẩn đối với độ tinh khiết, thì mẫu thu hồi phải được hiệu chính đối với độ tinh khiết của chất chuẩn bổ sung.

8  Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ:

...

...

...

b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết;

c) phương pháp thử đã sử dụng và viện dẫn tiêu chuẩn này;

d) mọi thao tác không được quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc những điều được coi là tự chọn, và bất kỳ chi tiết nào có ảnh hưởng tới kết quả;

e) kết quả thử nghiệm thu được.

1) Sản phẩm của Gelest, Inc., Morrisville, PA, USA. Thông tin này được đưa ra nhằm tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định sử dụng các sản phẩm này. Có thể sử dụng các sản phẩm tương tự nếu cho kết quả tương đương.

2) Sản phẩm của Zymark, Hopkinton, MA, USA. Thông tin này được đưa ra nhằm tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định sử dụng các sản phẩm này. Có thể sử dụng các sản phẩm tương tự nếu cho kết quả tương đương.

3) Sản phẩm của Waters, Milford, MA, USA. Thông tin này được đưa ra nhằm tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định sử dụng các sản phẩm này. Có thể sử dụng các sản phẩm tương tự nếu cho kết quả tương đương.

4) Sản phẩm của Bellefont, PA, USA. Thông tin này được đưa ra nhằm tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn và không ấn định sử dụng các sản phẩm này. Có thể sử dụng các sản phẩm tương tự nếu cho kết quả tương đương.