TIÊU CHUẨN QUỐC GIA
TCVN 9125:2011
ISO 6866:1985
THỨC ĂN CHĂN
NUÔI - XÁC ĐỊNH GOSSYPOL TỰ DO VÀ TỔNG SỐ
Animal feedings
stuffs - Determination of free and total
gossypol
Lời nói đầu
TCVN 9125:2011 hoàn toàn tương đương với
ISO 6866:1985;
TCVN 9125:2011 do Cục Chăn nuôi biên
soạn, Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường
Chất lượng thẩm định, Bộ
Khoa học và Công nghệ công bố.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Animal feedings
stuffs - Determination of free and total
gossypol
1. Phạm vi áp dụng
Tiêu chuẩn này quy định phương
pháp xác định hàm lượng gossypol tự do, gossypol tổng số và các chất có
liên quan về mặt hóa học trong thức ăn chăn nuôi.
2. Lĩnh vực áp dụng
Phương pháp này áp dụng cho hạt bông
và khô dầu hạt bông dạng bột và dạng đóng bánh và hỗn hợp thức ăn chăn nuôi có chứa
các chất này.
Giới hạn phát hiện đối với gossypol tự
do là 20 mg/kg và
gossypol tổng số là 50 mg/kg.
3. Tài liệu viện dẫn
Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết
cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với
các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối
với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất,
bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có).
TCVN 4325 (ISO 6497), Thức ăn chăn
nuôi - Lấy mẫu.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
4. Nguyên tắc
Chiết gossypol với sự có mặt của
3-aminopropan-1-ol bằng hỗn hợp của
2-propanol và hexan để xác
định gossypol tự do hoặc bằng dimetylformamit để xác định gossypol tổng số. Sử dụng
anilin để
chuyển
gossypol thành gossypol-dianilin. Đo độ hấp thụ tại bước sóng có độ hấp thụ cực
đại (khoảng từ 435 nm đến 445 nm)
5. Thuốc thử
Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết
phân tích. Nước
sử dụng phải là nước đã khử khoáng hoặc nước
có độ tinh khiết tương đương.
5.1. 2-propanol/ n-hexan, hỗn hợp 60
+ 40 tính theo thể
tích.
5.2. Dung môi A
Cho vào bình định mức 1 000 ml khoảng
500 ml hỗn hợp 2-propanol/hexan (5.1), 2 ml 3-aminopropan-1-ol, 8 ml axit
axetic băng và 50 ml nước. Thêm hỗn hợp 2-propanol/hexan đến vạch.
Thuốc thử này chỉ bền trong một tuần.
5.3. Dung môi B
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Thuốc thử này chỉ bền trong 1 tuần.
5.4. Anilin
Nếu độ hấp thụ đo được trong phép thử
trắng vượt quá 0,022, thì chưng cất anilin trên bột kẽm, loại bỏ 10 % phần dịch
cất đầu tiên và cuối cùng. Khi được bảo quản trong chai thủy tinh nâu có nút đậy
kín
để
trong tủ lạnh (từ 0 °C đến 4 °C) thì thuốc thử
này bền được vài tháng.
6. Thiết bị, dụng cụ
Sử dụng các thiết bị, dụng cụ của
phòng thử nghiệm thông
thường và cụ thể như
sau:
6.1. Máy nhào trộn, có tần số
quay khoảng 35 min-1, hoặc máy lắc khác.
6.2. Máy đo phổ, thích hợp để
đo ở bước sóng từ 435 nm đến 445 nm, có cuvet đường quang 10 mm.
6.3. Bình định mức, dung tích
25 ml và 50 ml.
6.4. Bình nón, dung tích 50
ml, 100 ml và 250 ml.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Lấy mẫu phòng thử nghiệm theo TCVN
4325 (ISO 6497).
8. Cách tiến
hành
8.1. Chuẩn bị mẫu thử
Chuẩn bị mẫu thử theo TCVN 6952 (ISO
6498)
8.2. Phần mẫu thử
Khối lượng của phần mẫu thử phụ thuộc
vào hàm lượng gossypol dự kiến. Để xác định gossypol tự do trong hạt bông, khô
dầu hạt bông, dạng bột và dạng bánh
thì khối lượng phần mẫu thử không vượt quá 1 g; đối với hỗn hợp thức ăn chăn nuôi
thì lấy 5 g. Để xác định gossypol tổng số, thì khối lượng của phần mẫu thử phải trong khoảng từ 0,5 g đến
5 g.
CHÚ THÍCH: Khối lượng
phần mẫu thử phải đủ lớn để có lượng gossypol tự do trong 8.3.1.2 hoặc lượng
gossypol tổng số trong 8.3.2.4 trong từng phần dịch lọc.
8.3. Phép xác định
8.3.1. Xác định gossypol tự
do
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
8.3.1.2. Dùng pipet chuyển các
lượng dịch lọc bằng nhau có chứa từ 50 mg đến 100 mg gossypol vào hai bình định mức 25 ml (6.3) (C và D). Nếu
cần, thêm 10 ml dung môi A (5.2).
8.3.1.3. Cho hỗn hợp
2-propanol/hexan (5.1) qua phễu vào bình C đến vạch và trộn.
Dung dịch này được sử dụng làm
dung dịch đối chứng dùng khi đo dung dịch mẫu thử.
8.3.1.4. Dùng pipet chuyển vào
hai bình định mức 25 ml (E và F), mỗi bình 10 ml dung môi A (5.2).
8.3.1.5. Thêm hỗn hợp
2-propanol/hexan (5.1) vào bình E đến vạch và trộn.
Dung dịch này được sử dụng làm dung dịch
đối chứng khi đo dung dịch mẫu trắng.
8.3.1.6. Thêm 2,0 ml anilin
(5.4) vào các bình D và F. Giữ nóng 30 min trên nồi cách thủy đang sôi để hiện
màu.
8.3.1.7. Làm nguội đến nhiệt độ
phòng, thêm hỗn hợp 2-propanol/hexan (5.1) đến vạch, trộn rồi để yên 1 h.
8.3.1.8. Đo độ hấp thụ của
dung dịch thử trắng (bình F; 8.3.1.7) dựa vào dung dịch đối chứng (bình E;
8.3.1.5) và độ hấp thụ của dung dịch thử (bình D; 8.3.1.7) dựa vào dung dịch đối
chứng (bình C; 8.3.1.3) dùng máy đo phổ (6.2) ở bước sóng có độ hấp thụ cực đại (khoảng từ
435 nm đến 445 nm).
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
8.3.2. Xác định gossypol tổng
số
8.3.2.1. Chuyển phần mẫu thử
(8.2) vào bình định mức 50 ml và thêm 10 ml dung môi B (5.3)
8.3.2.2. Chuyển 10 ml dung môi
B (5.3) vào bình định mức 50 ml (6.3) thứ hai.
8.3.2.3. Giữ nóng hai bình
(8.3.2.1 và 8.3.2.2) trong 30 min trên nồi cách thủy đang sôi.
Làm nguội đến nhiệt độ phòng thêm hỗn
hợp 2-propanol/hexan (5.1) đến vạch, trộn và để yên cho lắng xuống trong khoảng
từ 10 min đến 15 min, sau đó lọc và thu dịch lọc vào bình nón 50 ml (6.4).
8.3.2.4. Dùng pipet chuyển vào
hai bình định mức
25 ml có chứa 40 mg tới 200 mg gossypol 2 ml phần
dịch lọc thu được từ phần mẫu thử nghiệm và chuyển vào hai bình định mức
25 ml khác mỗi bình 2 ml phần dịch lọc thu được từ bình thứ hai (mẫu trắng).
Thêm hỗn hợp 2-propanol/hexan (5.1) vào bình đựng
dung dịch thử và bình đựng mẫu thử trắng đến vạch.
Dung dịch này được dùng làm dung dịch
đối chứng.
8.3.2.5. Thêm 2,0 ml anilin
(5.4) vào hai bình đựng dung dịch mẫu trắng và dung dịch thử còn lại. Làm
nóng 30 min trên nồi cách thủy đun sôi đến khi hiện màu. Làm nguội đến nhiệt độ
phòng, thêm hỗn hợp 2-propanol/hexan (5.1) đến vạch, trộn và sau đó để yên 1 h.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
8.4. Số lần xác định
Tiến hành hai phép xác định trên cùng
một mẫu thử.
9. Biểu thị kết
quả
9.1. Phương pháp tính và
công thức
Hàm lượng gossypol tự do và gossypol tổng
số, tính bằng miligam trên kilogam sản phẩm tính được bằng công thức sau:
Trong đó:
A là độ hấp thụ chính
xác (8.3.1.9 hoặc 8.3.2.6);
m là khối lượng phần mẫu
thử (8.2), tính bằng gam (g);
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
a là hệ số hấp thụ khối
lượng riêng (62,5 cm-1.g-1.l đối với
gossypol tự do; 60,0 cm-1.g-1.l đối với
gossypol tổng số).
Lấy kết quả trung bình của hai phép
xác định (xem 8.4) nếu đáp ứng điều kiện về độ lặp lại (xem 9.2).
9.2. Độ lặp lại
Chênh lệch tuyệt đối giữa các kết quả
của hai phép xác định, được tiến hành đồng thời hoặc liên tiếp nhanh trên cùng
mẫu thử, không được vượt quá:
15 % (tương đối) giá trị trung bình đối
với hàm lượng gossypol nhỏ hơn 500
mg/kg;
75 mg/kg (tuyệt đối) đối với hàm lượng
gossypol từ 500 mg/kg đến 750 mg/kg;
10 % (tương đối) giá trị trung bình đối
với hàm lượng gossypol lớn hơn 750 mg/kg.
10. Báo cáo thử nghiệm
Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ phương
pháp đã sử dụng và kết quả thu được. Báo cáo cũng phải đề cập đến các chi tiết
thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc tùy chọn cùng với các chi tiết
bất thường nào khác có thể ảnh hưởng tới kết quả.
...
...
...
Bạn phải
đăng nhập hoặc
đăng ký Thành Viên
TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.
Mọi chi tiết xin liên hệ:
ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66