Tiêu chuẩn TCVN 7140:2025 quy định phương pháp sắc ký lớp mỏng để phát hiện phẩm màu tổng hợp có trong thịt

• Số hiệu: TCVN7140:2025
• Loại văn bản: Tiêu chuẩn Việt Nam
• Nơi ban hành: ***
• Người ký: ***
• Ngày ban hành: Năm 2025

TIÊU CHUẨN QUỐC GIA

TCVN 7140:2025

ISO 13496:2021

THỊT VÀ SẢN PHẨM THỊT - PHÁT HIỆN VÀ XÁC ĐỊNH PHẨM MÀU

Meat and meat products - Detection and determination of colouring agents

Lời nói đầu

TCVN 7140:2025 thay thế TCVN 7140:2002;

TCVN 7140:2025 hoàn toàn tương đương với ISO 13496:2021;

TCVN 7140:2025 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F8 Thịt và sản phẩm thịt biên soạn, Viện Tiêu chuẩn Chất lượng Việt Nam đề nghị, Ủy ban Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng Quốc gia thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố.

...

...

...

THỊT VÀ SẢN PHẨM THỊT - PHÁT HIỆN VÀ XÁC ĐỊNH PHẨM MÀU

Meat and meat products - Detection and determination of colouring agents

1  Phạm vi áp dụng

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp sắc ký lớp mỏng để phát hiện và phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để xác định các phẩm màu tổng hợp có trong thịt và sản phẩm thịt.

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp HPLC làm phương pháp chuẩn.

Tiêu chuẩn này có thể áp dụng cho thịt và các sản phẩm từ thịt, bao gồm các sản phẩm thịt gia súc và gia cầm.

Phương pháp sắc ký lớp mỏng có thể phát hiện được các phẩm màu sau đây:

- Tartrazin

- Patent Blue V

...

...

...

- Indigotin

- Sunset Yellow FCF

- Brilliant Black PN

- Amaranth

- Black 7984

- Ponceau 4R

- Fast Green FCF

- Erythrosin

- Blue VRS

...

...

...

Phương pháp HPLC có thể phát hiện các phẩm màu sau đây:

- Tartrazin

- Allura Red AC

- Amaranth

- Brilliant Blue FCF

- Ponceau 4R

- New Red

- Sunset Yellow FCF

- Carmoisin

...

...

...

- Indigotin

Sắc ký đồ của các phẩm màu chuẩn đối chứng này được nêu trong Phụ lục D.

2  Tài liệu viện dẫn

Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có).

TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng để phân tích trong phòng thí nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử.

ISO 4793, Laboratory sintered (fritted) filters - Porosity grading, classification and designation (Phễu lọc thủy tinh xốp dùng trong phòng thử nghiệm - Độ xốp, phân loại và thiết kế).

AOAC 950.61 1), Total color in color additives. Titrimetric method (Phẩm màu tổng số trong phụ gia thực phẩm. Phương pháp chuẩn độ)

3  Thuật ngữ và định nghĩa

Trong tiêu chuẩn này sử dụng thuật ngữ và định nghĩa sau đây:

...

...

...

Phát hiện phẩm màu (detection of colouring agents)

Việc phát hiện sự có mặt hay không có mặt các phẩm màu theo phương pháp được quy định trong tiêu chuẩn này.

4  Nguyên tắc

4.1  Phương pháp sắc ký lớp mỏng

Phẩm màu được chiết ra khỏi phần mẫu thử bằng nước nóng và được hấp phụ vào bột polyamid. Các phẩm màu đã chiết được tinh sạch bằng sắc ký cột và các phẩm màu được rửa giải ra khỏi cột. Phẩm màu được nhận biết bằng sắc ký lớp mỏng.

4.2  Phương pháp HPLC

Phẩm màu được chiết ra khỏi phần mẫu thử bằng nước nóng và được hấp phụ vào bột polyamid. Phẩm màu đã chiết được tách bằng sắc ký pha đảo của thiết bị HPLC. Các phẩm màu được nhận biết theo thời gian lưu và định lượng bằng phương pháp chuẩn ngoại.

5  Lấy mẫu

Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải đúng là mẫu đại diện và không bị hư hỏng hoặc không bị biến đổi chất lượng trong quá trình vận chuyển hoặc bảo quản.

...

...

...

6  Chuẩn bị mẫu thử

Đồng hoá mẫu phòng thử nghiệm bằng thiết bị thích hợp (7.2.1). Chú ý sao cho nhiệt độ của mẫu thử không tăng quá 25 °C. Nếu sử dụng máy xay thì cho xay mẫu ít nhất hai lần.

Cho đầy mẫu đã chuẩn bị vào vật chứa kín khí. Đậy nắp vật chứa và bảo quản sao cho tránh được sự giảm chất lượng và thay đổi thành phần của mẫu. Phân tích mẫu càng sớm càng tốt, nhưng phải trong 24 h sau khi mẫu đã đồng hoá.

7  Phương pháp sắc ký lớp mỏng

7.1  Thuốc thử

Chỉ sử dụng các thuốc thử loại tinh khiết phân tích, trừ khi có quy định khác.

7.1.1  Nước, đạt ít nhất là nước loại 3 của TCVN 4851 (ISO 3696)

7.1.2  Ether dầu mỏ, có dải nhiệt độ sôi từ 40 °C đến 60 °C.

7.1.3  Methanol.

...

...

...

7.1.5  Acid acetic, 100 % phần khối lượng, ρ₂₀ = 1,050 g/ml.

7.1.6  Trinatri citrat ngậm hai phân tử nước.

7.1.7  Propan-1-ol.

7.1.8  Ethyl acetat.

7.1.9  2-Methyl-2-propanol.

7.1.10  Acid propionic.

7.1.11  Dung dịch rửa giải dùng cho sắc ký cột

Trộn 95 thể tích methanol (7.1.3) với 5 thể tích dung dịch amoniac (7.1.4).

7.1.12  Acid acetic, dung dịch 50 % trong methanol.

...

...

...

7.1.13  Bột polyamid, cỡ hạt từ 0,05 mm đến 0,16 mm.

7.1.14  Cát, hạt mịn, đã được rửa sạch bằng acid chlorhydric, trung hòa và nung kết.

7.1.15  Phẩm màu chuẩn đối chứng

Độ tinh khiết của các phẩm màu chuẩn có thể thay đổi, vì vậy cần phải biết độ tinh khiết của các phẩm màu được sử dụng làm chất chuẩn. Độ tinh khiết được xác định bằng phương pháp nêu trong AOAC 950.61.

CHÚ THÍCH  Có thể sử dụng phẩm màu thực phẩm đã được chứng nhận làm chất chuẩn.

7.1.16  Dung dịch chuẩn đối chứng dùng cho sắc ký lớp mỏng

Tạo riêng rẽ các dung dịch trong nước của từng phẩm màu chuẩn đối chứng (7.1.15) có hàm lượng phẩm màu chuẩn khoảng 1 g/lit.

Chuẩn bị các dung dịch Indigotin trong ngày sử dụng. Các dung dịch khác bền ít nhất ba tháng (dung dịch Erythrosin thì trong một tháng) khi được bảo quản ở nơi tối.

7.1.17  Dung môi rửa giải dùng cho sắc ký lớp mỏng: dung dịch I

...

...

...

Trộn 80 thể tích dung dịch citrat này với 20 thể tích dung dịch amoniac (7.1.4) và 12 thể tích methanol (7.1.3).

Để tránh nhiễu hoặc giảm nhiễu do safflor hoặc saffran, nên sử dụng dung dịch sắc ký II (7.1.18).

7.1.18  Dung môi rửa giải dùng cho sắc ký lớp mỏng: dung dịch II

Trộn 6 thể tích propan-1-ol (7.1.7) với một thể tích ethyl acetat (7.1.8) và ba thể tích nước.

7.1.19  Dung môi rửa giải dùng cho sắc ký lớp mỏng: dung dịch III

Trộn 50 thể tích 2-methyl-2-propanol (7.1.9) với 12 thể tích acid propionic (7.1.10) và 38 thể tích nước.

7.2  Thiết bị, dụng cụ

Sử dụng các thiết bị, dụng cụ thông thường của phòng thử nghiệm và cụ thể như sau.

7.2.1  Thiết bị đồng hoá bằng điện hoặc bằng cơ, có khả năng đồng hóa mẫu phòng thử nghiệm.

...

...

...

7.2.2  Ống ly tâm.

7.2.3  Bình đáy phẳng, dung tích 250 ml, có nắp thủy tinh mài.

7.2.4  Bình cầu đáy tròn, dung tích 100 ml, có khớp nối thủy tinh mài.

7.2.5  Máy ly tâm, hoạt động ở gia tốc hướng tâm khoảng 2 000g.

7.2.6  Thiết bị cô quay.

7.2.7  Cột sắc ký, bằng thủy tinh gắn bộ lọc và có vòi, dài khoảng 20 cm, đường kính khoảng 30 mm, cỡ lỗ của bộ lọc từ 40 μm đến 100 μm (độ xốp P 100 theo ISO 4793).

Cho một ít bông thủy tinh vào cột và thêm 1 g đến 2 g cát (7.1.14).

7.2.8  Bình chứa bằng chất dẻo, dung tích khoảng 10 ml, có nắp đậy.

7.2.9  Tấm bản mỏng, được phủ một lớp bột cellulose dày 0,10 mm, hoặc tương đương. Sử dụng các tấm bán sẵn thích hợp.

...

...

...

7.2.11  Máy đo pH, đo chính xác đến 0,1 đơn vị pH.

7.3  Cách tiến hành

CẢNH BÁO - Nếu mẫu chứa Indigotin thì trong suốt quá trình phân tích, nhiệt độ không được vượt quá 35 °C. Indigotin trong dung dịch sắc ký I bị phân hủy từng phần, do đó nên sử dụng dung dịch sắc ký II.

CẢNH BÁO - Erythrosin rất nhạy với ánh sáng. Khi phải tạm dừng phân tích, các dung dịch và các tấm bản mỏng phải được bảo quản nơi tối. Cũng tương tự đối với Indigotin.

7.3.1  Phần mẫu thử

Cân 5 g mẫu thử đã chuẩn bị (xem Điều 6), chính xác đến 0,1 g, cho vào ống ly tâm (7.2.2).

Đối với các mẫu có chất béo, tiến hành theo 7.3.2.

Đối với các mẫu không có chất béo, tiến hành theo 7.3.3.

7.3.2  Mẫu có chất béo

...

...

...

Lặp lại thao tác này ba lần.

7.3.3  Mẫu không có chất béo

Cho 25 ml nước sôi (xem cảnh báo ở trên) và trộn đều. Thêm 25 ml dung dịch rửa giải (7.1.11).

Kiểm tra pH là 9 ± 0,5 bằng máy đo pH (7.2.11). Nếu không đạt, chỉnh pH bằng acid acetic (7.1.5) hoặc dung dịch amoniac (7.1.4).

Trộn đều. Làm lạnh mẫu trong tủ đông lạnh trong 15 min (để tránh bị đục).

Ly tâm (7.2.5) trong 10 min với gia tốc hướng tâm khoảng 2 000g.

Gạn dung dịch trong vào bình cầu đáy phẳng (7.2.3). Đối với trường hợp Indigotin, sử dụng bình cầu đáy tròn (7.2.4).

Thêm 5 ml nước vào ống ly tâm có chứa phần cặn. Trộn và thêm 10 ml dung dịch rửa giải (7.1.11). Trộn đều và ly tâm như trên.

Lặp lại quy trình này cho đến khi tất cả các phẩm màu được chiết ra khỏi mẫu, sau đó gộp tất cả các dịch chiết với nhau.

...

...

...

Thêm 25 ml nước sôi (xem cảnh báo) và trộn đều.

7.3.4  Chuyển các phẩm màu vào bột polyamid

Sử dụng acid acetic (7.1.5) hoặc dung dịch amoniac (7.1.4) để chỉnh pH trong khoảng từ 4 đến 5.

Thêm 1 g bột polyamid (7.1.13) vào dung dịch còn ấm (xem cảnh báo). Lắc mạnh trong 1 min.

Để bột lắng.

Kiểm tra để biết chắc rằng phẩm màu không còn trong dung dịch. Nếu dung dịch có màu, thêm một ít bột polyamid và lắc mạnh.

CHÚ THÍCH  Một số phẩm màu tự nhiên (xem Phụ lục B) không hấp phụ hoàn toàn lên bột polyamid, để lại dung dịch có màu ngay cả khi tất cả các phẩm màu tổng hợp đều hấp phụ hoàn toàn. Đưa ra quyết định dựa vào loại mẫu có hoặc không có mặt các phẩm màu tự nhiên như vậy.

Lắc và chuyển huyền phù còn ấm vào cột sắc ký (7.2.7).

Tráng bình đáy phẳng ba lần, mỗi lần dùng 10 ml nước nóng (xem cảnh báo) và cho từng phần nước tráng vào cột. Rửa tiếp cột ba lần, mỗi lần dùng 10 ml nước nóng (xem cảnh báo) và cuối cùng rửa ba lần, mỗi lần dùng 5 ml methanol (7.1.3). Nếu phẩm màu tự nhiên được rửa giải, tiếp tục rửa cột bằng methanol cho đến khi methanol chảy ra không còn màu.

...

...

...

Đặt bình cầu (7.2.4) dưới cột và rửa giải màu ra khỏi bột polyamid bằng các phần 5 ml dung dịch rửa giải (7.1.11) ở tốc độ dòng 2 ml/min, cho đến khi polyamid mất màu.

Cho bay hơi dịch rửa giải đến khô bằng thiết bị cô quay (7.2.6) ở nhiệt độ tối đa là 35 °C (xem cảnh báo).

Thêm 1,0 ml hoặc 2,0 ml dung dịch rửa giải (7.1.11) tùy thuộc vào hàm lượng, số lượng phẩm màu và hòa tan cặn. Chuyển dung dịch màu vào vật chứa bằng chất dẻo (7.2.8).

7.3.6  Tách sắc ký bản mỏng

7.3.6.1  Bản mỏng đối chứng tiêu chuẩn

Chuẩn bị ba tấm sắc ký lớp mỏng đối chứng tiêu chuẩn. Sử dụng micropipet (7.2.10), phân phối từng dung dịch chuẩn (7.1.16), mỗi dung dịch chấm một điểm khoảng 5 μl (đường kính d < 5 mm) một cách riêng rẽ lên mỗi tấm (7.2.9). Hiện màu từng dung dịch một cách riêng rẽ, mỗi dung dịch dùng một dung môi pha động (7.1.17, 7.1.18 và 7.1.19) trong bình triển khai sắc ký cho đến khi vệt màu trên tấm sắc ký đạt đến khoảng từ 10 cm đến 12 cm so với vạch xuất phát. Lấy các tấm sắc ký ra khỏi bình và làm khô trong không khí để trong tủ hút. Bảo quản các tấm này ở nơi tối. Các điểm chấm này có thể ổn định trong vài năm, trừ trường hợp đối với Indigotin.

7.3.6.2  Mẫu

Dùng micropipet (7.2.10) lấy một lượng dung dịch mẫu (xem 7.3.5) vừa đủ lên tấm sắc ký lớp mỏng (7.2.9). Dùng máy sấy tóc để sấy khô. Đối với Indigotin thì làm khô trong không khí.

Cho hiện màu tấm sắc ký này trong bình triển khai sắc ký cho đến khi quãng đường di chuyển của vệt màu đạt khoảng từ 10 cm đến 12 cm, sử dụng dung môi pha động thích hợp (7.1.16, 7.1.17 hoặc 7.1.1 8); nghĩa là dung dịch cho tách màu tốt nhất phát hiện được trong mẫu (xem Điều 1). Đôi khi cần phải chuẩn bị tấm mẫu thứ hai và cho hiện màu một trong hai chất rửa giải khác để thu được sự tách màu tốt nhất.

...

...

...

So sánh các vết chấm mẫu với bản mỏng đối chứng tiêu chuẩn thích hợp (xem 7.3.6.1).

Nên sử dụng các lượng khác nhau của các dung dịch mẫu trong trường hợp hỗn hợp các phẩm màu, vì các phẩm màu có thể có mặt với các nồng độ khác nhau trong trạng thái cô đặc.

Vết màu bị nhòe thường do bước tinh sạch chưa tốt. Trong trường hợp đó, hấp phụ lại phẩm màu bằng chất hấp phụ, rửa bằng nước nóng và tách chất hấp phụ ra như mô tả ở trên.

7.3.7  Khẳng định

Khẳng định việc định danh các phẩm màu bằng cách chạy sắc ký phần dung dịch mẫu (xem 7.3.6.2) trong hỗn hợp phẩm màu chuẩn đã được nhận biết trong sắc ký đồ ban đầu.

Nếu còn nghi ngờ, rửa giải phẩm màu từ tấm sắc ký bằng dung dịch trung tính (nước hoặc ethanol, hoặc dung dịch amoni acetat 0,2 g/lit), acid (acid chlorhydric 0,1 mol/lit) và kiềm (dung dịch natri hydroxide 0,1 mol/lit) và so sánh phổ hấp thụ của phẩm màu với phổ hấp thụ của chất chuẩn. Xem phổ hấp thụ nêu trong Phụ lục C.

8  Phương pháp HPLC

8.1  Thuốc thử

Chỉ sử dụng các thuốc thử loại tinh khiết phân tích, trừ khi có quy định khác.

...

...

...

8.1.2  Amoni acetat.

8.1.3  Dung dịch amoni acetat (0,02 mol/lit).

Cân 1,54 g amoni acetat (8.1.2), thêm lượng nước thích hợp để hòa tan và pha loãng bằng nước đến 1 000 ml. Lọc qua màng lọc cỡ lỗ 0,45 μm (8.2.2).

8.1.4  Methanol, dung dịch 10 % trong nước.

Trộn 10 thể tích methanol (7.1.3) với 90 thể tích nước (7.1.1).

8.1.5  Dung dịch chuẩn gốc (1 mg/ml)

Pha riêng các dung dịch của từng phẩm màu chuẩn đối chứng (7.1.15) trong methanol 10 % (8.1.4) với hàm lượng phẩm màu chuẩn khoảng 1 mg/ml.

8.1.6  Dung dịch chuẩn làm việc (50 μg/ml)

Pha loãng dung dịch chuẩn gốc 1 mg/ml (8.1.5) 20 lần với methanol 10 % (8.1.4) và lọc qua màng lọc cỡ lỗ 0,45 μm (8.2.2).

...

...

...

Sử dụng các thiết bị, dụng cụ thông thường của phòng thử nghiệm và cụ thể như sau:

8.2.1  Hệ thống sắc ký HPLC, có bộ điều nhiệt cột và detector UV/khả kiến hoặc detector mảng diod.

8.2.2  Màng lọc (cỡ lỗ: 0,45 μm)

8.3  Cách tiến hành

CẢNH BÁO - Nếu mẫu chứa Indigotin thì trong suốt quá trình phân tích nhiệt độ không được vượt quá 35 °C.

CẢNH BÁO - Erythrosin rất nhạy với ánh sáng. Khi phải tạm dừng phân tích, các dung dịch phải được bảo quản nơi tối. Cũng tương tự đối với Indigotin.

8.3.1  Phần mẫu thử

Cân 5 g mẫu thử đã chuẩn bị (xem Điều 6), chính xác đến 0,001 g, cho vào ống ly tâm (7.2.2).

Đối với các mẫu có chất béo, tiến hành theo 8.3.2.

...

...

...

8.3.2  Mẫu có chất béo

Xem 7.3.2.

8.3.3  Mẫu không có chất béo

Xem 7.3.3.

8.3.4  Chuyển các phẩm màu sang bột polyamid

Xem 7.3.4.

8.3.5  Rửa giải và cô phẩm màu đã tách

Đặt bình (7.2.4) dưới cột và rửa giải các phẩm màu ra khỏi bột polyamid bằng các phần 5 ml dung dịch rửa giải (7.1.11) ở tốc độ rửa giải là 2 ml/min, cho đến khi polyamid mất màu.

Cho bay hơi chất rửa giải đến khô bằng thiết bị cô quay chân không (7.2.6) ở nhiệt độ tối đa là 35 °C (xem cảnh báo).

...

...

...

8.3.6  Phân tích HPLC

8.3.6.1  Điều kiện vận hành

Các điều kiện vận hành như sau:

a) Cột: C18 (5 μm, 4,6 mm × 250 mm).

b) Pha động:

A: Dung dịch amoni acetat 0,02 mol/lit (8.1.3);

B: acetonitril (8.1.1), gradient rửa giải, xem Bảng 1.

c) Nhiệt độ cột: 35 °C

d) Tốc độ dòng: 1,0 ml/min.

...

...

...

f) Dải bước sóng của detector mảng diod: từ 400 nm đến 800 nm, hoặc bước sóng phát hiện detector UV: xem Phụ lục D.

Bảng 1 - Gradient rửa giải

Thời gian

Pha A

Pha B

min

%

%

0

...

...

...

5

3

65

35

7

0

100

10

0

...

...

...

10,1

95

5

21

95

5

8.3.6.2  Xác định

Trong các điều kiện trên, khi thời gian lưu đối với pic của chất cần phân tích trong mẫu giống với thời gian lưu của chất chuẩn thì mẫu có thể được coi như có chứa các phẩm màu tổng hợp. Sắc ký đồ của phẩm màu tổng hợp chuẩn được nêu trong Phụ lục D. Phương pháp được định lượng bằng đường chuẩn ngoại. Độ đáp ứng của các phẩm màu tổng hợp trong dung dịch mẫu phải trong dải tuyến tính của thiết bị.

8.3.6.3  Phép thử song song

...

...

...

8.3.6.4  Phép thử mẫu trắng

Ngoại trừ việc cân mẫu, tiến hành theo quy trình được mô tả ở trên.

8.4  Tính kết quả

Hàm lượng phẩm màu được tính theo Công thức (1):

(1)

Trong đó:

X

là hàm lượng phẩm màu trong mẫu, tính bằng miligam trên kilogam (mg/kg);

...

...

...

là nồng độ của phẩm màu trong dung dịch mẫu, tính bằng miligam trên lít (mg/lit);

V

là thể tích pha loãng cuối cùng của dung dịch mẫu, tính bằng mililit (ml);

m

là khối lượng mẫu, tính bằng gam (g).

Lấy kết quả trừ đi giá trị mẫu trắng.

Biểu thị kết quả tính được là trung bình cộng của hai kết quả thử nghiệm đơn lẻ thu được trong các điều kiện lặp lại. Biểu thị kết quả đến hai chữ số có nghĩa. Kết quả thử liên phòng thử nghiệm được nêu trong Phụ lục E.

8.5  Độ chụm

Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử nghiệm đơn lẻ thu được trong các điều kiện lặp lại không được vượt quá 10 % giá trị trung bình.

...

...

...

Đối với Tartrazin, Amaranth, Ponceau 4R, Sunset Yellow FCF, Erythrosin, Allura Red AC, Brilliant Blue FCF, New Red, Carmoisin và Indigotin, LOD là 0,15 mg/kg và LOQ là 0,5 mg/kg.

9  Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải nêu rõ:

- mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử;

- phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết;

- phương pháp thử đã sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này, nghĩa là TCVN 7140:2025 (ISO 13496:2021);

- mọi chi tiết thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc được coi là tùy chọn, cùng với các chi tiết về mọi sự cố nào có thể ảnh hưởng đến kết quả thử nghiệm;

- kết quả thử nghiệm thu được, bao gồm cả viện dẫn đến việc giải thích cách tính kết quả;

- ngày thử nghiệm.

...

...

...

Phụ lục A

(tham khảo)

Tên đồng danh và mã số phẩm màu tổng hợp, phẩm màu tan trong nước

Bảng A.1 - Tên đồng danh và mã số phẩm màu tổng hợp, phẩm màu tan trong nước

Tên

Tên đồng danh 1

Tên đồng danh 2

C.I^a

Số E^b

...

...

...

Tartrazin

FD&C Yellow số 5

19140

E 102

1934-21-0

Quinolin Yellow

...

...

...

E 104

8004-92-0

Sunset Yellow FCF

FD&C Yellow số 6

15985

E 110

2783-94-0

Amaranth

...

...

...

Naphthol Red S

16185

E 123

915-67-3

Ponceau 4R

New coccine

Cochineal Red A

16255

E 124

...

...

...

Erythrosin

FD&C Red số 3

45430

E 127

16423-68-0

Patent Blue V

...

...

...

E 131

3536-49-0

Indigotin

FD&C Blue số 2

73015

E 132

860-22-0

Brilliant Black PN

...

...

...

28440

E 151

2519-30-4

Black 7984

27755

E 152

...

...

...

Fast Green FCF

FD&C Green số 3

42053

^c

2353-45-9

Blue VRS

...

...

...

^c

^c

Allura Red AC

16035

E129

25956-17-16

Brilliant Blue FCF

...

...

...

42090

E133

3844-45-9

New Red

^c

^c

...

...

...

Carmoisin

Azorubin

14720

E122

3567-69-6

^a C.I: Mã số theo chỉ số màu ^[4].

^b Số E: Số hiện tại trong Cộng đồng châu Âu (EC).

^c Số E: chưa có.

...

...

...

Phụ lục B

(tham khảo)

Khả năng gây nhiễu bởi các phẩm màu

B.1  Phẩm màu không gây nhiễu

Các phẩm màu thực vật hoặc các chất chiết từ thực vật sau đây cho thấy không gây nhiễu đến phương pháp này:

- cỏ linh lăng (alfalfa)

- phức chất đồng chlorophyll

- annatto (bixin và norbixin)

...

...

...

- các anthocyanin

- cúc vạn thọ (marigold)

- củ dền đỏ

- mù tạt

- β-apocarotenal

- oleoresin từ ớt paprika

- ester ethyl của acid β-apocarotenic

- riboflavin

- β-caroten

...

...

...

- canthaxanthin

- cà chua

- chlorophyll

B.2  Các phẩm màu có thể gây nhiễu

Trong một số trường hợp, các phẩm màu tự nhiên có thể gây nhiễu đến phương pháp này. Các thực phẩm sử dụng chúng và các phẩm màu tổng hợp có thể bị ảnh hưởng được nêu trong Bảng B.1.

Bảng B.1 - Các phẩm màu có thể gây nhiễu

Chất

Sử dụng trong thực phẩm

...

...

...

Curcumin

Gia vị, cũng được dùng làm phẩm màu vàng

Quinolin Yellow (E 104)^a

Brilliant Black PN (E 151)^a

Black 7984 (E 152)^a

Safran

Gia vị, quá đắt để sử dụng làm phẩm màu

Erythrosin (E 127)^b

Quinolin Yellow (E 104)^a^,^b

...

...

...

Black 7984 (E 152) ^b

Safflor

Thay cho saffran

Tartrazin (E 102) ^b

^a Gây nhiễu ít và có thể bỏ qua.

^b Để tránh hoặc khử nhiễu do safflor hoặc saffran, nên sử dụng dung dịch sắc ký II (7.1.18).

Phụ lục C

(tham khảo)

...

...

...

Chú dẫn

X

bước sóng, nm

Y

độ hấp thụ

Quinolin yellow

...

...

...

Erythrosin

Tartrazin

Black 7984

Amaranth

Blue VRS

...

...

...

Chú dẫn

X

bước sóng, nm

Y

độ hấp thụ

Sunset yellow FCF

...

...

...

Brilliant Black PN

 

Fast green FCF

Patent Blue V

Ponceau 4 R

Indigitin

...

...

...

Phụ lục D

(tham khảo)

Sắc ký đồ và bước sóng

D.1  Sắc ký đồ của chất chuẩn

Chú dẫn

X  thời gian, phút

...

...

...

Y  độ hấp thụ

1. Tartrazin

2. New Red

...

...

...

4. Indigotin

5. Ponceau 4 R

6. Sunset Yellow FCF

7. Allura Red AC

8. Brilliant Blue FCF

9. Carmoisin

10. Erythrosin

Hình D.1 - Sắc ký đồ (λ: 400 nm đến 800 nm) của Tartrazin, New red, Amaranth, Indigotin, Ponceau 4R, Sunset Yellow FCF, Allura Red AC, Brilliant Blue FCF, Carmoisin và Erythrosin

D.2  Bước sóng phát hiện bằng detector UV được khuyến cáo

...

...

...

Tartrazin:

428 nm

Allura red AC:

508 nm

Amaranth:

525 nm

Brilliant Blue FCF:

628 nm

Poceau 4 R:

...

...

...

New red:

508 nm

Sunset Yellow FCF:

480 nm

Carmoisin:

518 nm

Erythrosin:

531 nm

Indigotin:

...

...

...

Phụ lục E

(tham khảo)

Phép thử liên phòng thử nghiệm

E.1  Khái quát

Phép thử vòng liên phòng thử nghiệm quốc tế trong tiêu chuẩn này được thực hiện từ ngày 27 tháng 6 năm 2020 đến ngày 26 tháng 7 năm 2020. Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia hai phép thử song song, mỗi phòng thử nghiệm năm mẫu.

Phép thử nghiệm do Viện Nghiên cứu Kỹ thuật và Kiểm tra Chất lượng Thượng Hải, Trung Quốc thực hiện, Viện cũng chuẩn bị phân tích thống kê và báo cáo cuối cùng.

Phương pháp thử được mô tả trong tiêu chuẩn này được áp dụng để xác định các phẩm màu trong các mẫu sản phẩm thịt.

Năm loại mẫu thịt khác nhau (A: thịt gà, B: thịt cừu, C: thịt lợn, D: thịt bò; và E: thịt vịt) đã được sử dụng trong phép thử vòng và mỗi loại mẫu có một vài mức trung bình.

...

...

...

E.2.1  Tartrazin

E.2.1.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia xác định hàm lượng Tartrazin trong các mẫu thịt. Kết quả thử nghiệm được nêu trong Bảng E.1.

Bảng E.1 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Tartrazin

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

...

...

...

D

E

1

0,492

0,443

9,07

9,75

2,09

2,17

...

...

...

3,73

0,876

0,900

2

0,512

0,516

10,60

10,13

2,25

...

...

...

4,92

4,91

0,935

0,962

3

0,510

0,503

10,50

10,50

...

...

...

2,20

4,81

4,86

0,929

0,976

4

0,480

0,496

9,62

...

...

...

2,32

2,29

4,63

4,51

0,813

0,931

5

0,481

0,502

...

...

...

9,34

2,48

2,50

4,65

4,65

0,947

0,996

6

0,479

...

...

...

9,83

10,01

2,25

2,64

4,41

4,70

0,866

0,885

7

...

...

...

0,528

10,06

10,52

2,27

2,31

4,57

4,76

0,854

0,886

...

...

...

0,492

0,521

10,32

10,01

2,11

2,52

4,57

4,80

0,951

...

...

...

9

0,479

0,459

9,81

10,10

2,07

2,45

4,60

4,46

...

...

...

0,842

10

0,500

0,532

8,38

8,56

2,67

2,99

4,39

...

...

...

1,279

1,181

11

0,549

0,573

10,68

10,87

2,28

2,51

...

...

...

5,04

0,906

0,925

E.2.1.2  Giá trị trung bình ô

Giá trị trung bình ô (giá trị trung bình đối với mỗi loại mẫu thử) của phép xác định hàm lượng Tartrazin được nêu trong Bảng E.2.

Bảng E.2 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng Tartrazin

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

...

...

...

B

C

D

E

1

0,467 5

9,410

2,130

4,420

...

...

...

2

0,514 0

10,365

2,295

4,915

0,948 5

3

0,506 5

10,500

...

...

...

4,835

0,952 5

4

0,488 0

9,715

2,305

4,570

0,872 0

5

...

...

...

9,285

2,490

4,650

0,971 5

6

0,490 0

9,920

2,445

4,555

...

...

...

7

0,536 0

10,290

2,290

4,665

0,870 0

8

0,506 5

10,165

...

...

...

4,685

0,929 5

9

0,469 0

9,955

2,260

4,530

0,865 5

10

...

...

...

8,470

2,830

4,585

1,230 0

11

0,561 0

10,775

2,395

4,855

...

...

...

E.2.1.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng Tartrazin được nêu trong Bảng E.3.

Bảng E.3 - Chênh lệch tuyệt đối của ô - Hàm lượng Tartrazin

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

...

...

...

E

1

0,049

0,68

0,08

1,38

0,024

2

0,004

...

...

...

0,09

0,01

0,027

3

0,007

0,00

0,03

0,05

0,047

...

...

...

0,016

0,19

0,03

0,12

0,118

5

0,021

0,11

0,02

...

...

...

0,049

6

0,022

0,18

0,39

0,29

0,019

7

0,016

...

...

...

0,04

0,19

0,032

8

0,029

0,31

0,41

0,23

0,043

...

...

...

0,020

0,29

0,38

0,14

0,047

10

0,032

0,18

0,32

...

...

...

0,098

11

0,024

0,19

0,23

0,37

0,019

E.2.1.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.1.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mandel h và k

...

...

...

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.1 - Hàm lượng Tartrazin - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, h, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

...

...

...

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 10 có giá trị bất thường ở mức B, cũng như phòng thử nghiệm số 11 ở mức A, trong khi phòng thử nghiệm số 10 có các giá trị ngoại lệ ở mức C và E. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, phòng thử nghiệm số 10 thu được kết quả thử nghiệm cao hơn nhiều so với tất cả các phòng thử nghiệm khác ở mức C và E, vì vậy hai kết quả này đã bị loại bỏ.

Đồ thị k cho thấy phòng thử nghiệm số 1 có các giá trị bất thường ở mức A và B, cũng như phòng thử nghiệm số 4 ở mức E, trong khi phòng thử nghiệm số 1 có các giá trị ngoại lệ ở mức D. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, chênh lệch tuyệt đối giữa dữ liệu đo được bởi phòng thử nghiệm số 1 ở mức D là lớn nhất, vì vậy kết quả bị loại bỏ.

E.2.1.4.2  Phép thử Cochran

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.4.

Bảng E.4 - Hàm lượng Tartrazin - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

Thông số

Mức j

A

B

...

...

...

D

E

Phép thử Cochran, C

0,356 0

0,377 7

0 313 7

0,305 0

0,543 0

Giá trị bất thường (n = 2)

...

...

...

0,570

0,602

0,602

0,602

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

0,684

0,684

0,718

0,718

...

...

...

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

11

10

10

10

Nếu thống kê phép thử lớn hơn giá trị tới hạn 5 % và nhỏ hơn hoặc bằng giá trị tới hạn 1 % thì mẫu được thử nghiệm được coi là có giá trị bất thường. Nếu thống kê phép thử lớn hơn giá trị tới hạn 1 % thì mẫu được thử nghiệm được coi là có giá trị ngoại lệ.

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.1.4.3  Phép thử Grubb

...

...

...

Bảng E.5 - Hàm lượng Tartrazin - Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô

Mức j

Số lượng phòng thử nghiệm, p

Giá trị đơn thấp

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

Giá trị kép cao

A

11

...

...

...

2,048

0,589 7

0,335 4

B

11

2,183

1,347

0,328 2

0,675 5

...

...

...

10

1,644

1,626

0,445 9

0,429 2

D

10

1,124

1,677

...

...

...

0,398 5

E

10

1,093

1,579

0,701 2

0,488 7

Giá trị bất thường (5 %)

p = 10

...

...

...

2,290

0,186 4

0,186 4

p = 11

2,355

2,355

0,221 3

0,221 3

Giá trị ngoại lệ (1 %)

...

...

...

2,482

2,482

0,1150

0,115 0

p = 11

2,564

2,564

0,144 8

0,144 8

...

...

...

Đối với phép thử Grubb, để phát hiện hai giá trị ngoại lai thì các giá trị ngoại lệ và giá trị bất thường cho các giá trị này cần nhỏ hơn giá trị tới hạn tương ứng là 1 % và 5 %.

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.1.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Tartrazin trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.6.

Bảng E.6 - Hàm lượng Tartrazin - Giá trị tính được của m, s_r, s_R

Thông số

Mức j

mg/kg

A

...

...

...

C

D

E

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

11

10

10

10

...

...

...

0,504

9,90

2,31

4,68

0,909

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,017 5

0,235 9

0,163 7

...

...

...

0,035 8

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,030 4

0,674 0

0,159 7

0,177 1

0,047 1

E.2.1.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

Bảng E.6 cho thấy s_r và s_R có mối tương quan thuận chặt chẽ với m. Phép tính thực tế thể hiện mối tương quan tuyến tính giữa logs_r (hoặc logs_R) với logm, như sau:

...

...

...

R^2 = 0,891 4

logs_R = 0,994 7 logm - 1,249 3,

R^2 = 0,958 4

E.2.1.7  Giá trị cuối cùng của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Tartrazin được đưa ra như sau:

- s_r = 0,041 × m^0^,^89

- s_R = 0,056 × m^0,^99

E.2.2  New Red

E.2.2.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

...

...

...

Bảng E.7 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng New Red

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

...

...

...

0,476

0,522

10,13

10,36

2,05

2,24

4,60

3,91

0,975

...

...

...

2

0,486

0,510

9,87

9,77

2,13

2,19

4,82

4,77

...

...

...

1,016

3

0,487

0,494

9,75

9,78

2,04

2,08

4,62

...

...

...

0,952

0,922

4

0,484

0,543

9,74

9,85

2,17

2,12

...

...

...

4,72

0,963

0,941

5

0,495

0,510

9,71

9,58

2,26

...

...

...

4,61

4,60

0,941

0,920

6

0,551

0,496

10,27

10,64

...

...

...

2,75

4,49

4,57

0,969

0,948

7

0,502

0,461

10,78

...

...

...

2,17

2,76

4,62

4,41

0,882

0,906

8

0,523

0,503

...

...

...

10,21

2,48

2,45

4,84

4,23

0,963

0,902

9

0,507

...

...

...

9,71

10,19

2,54

2,09

4,26

4,59

0,846

0,889

10

...

...

...

0,534

10,44

10,73

2,93

2,78

4,48

4,37

1,121

1,072

...

...

...

0,525

0,493

11,99

9,96

2,60

2,58

4,72

4,87

0,908

...

...

...

E.2.2.2  Giá trị trung bình ô

Giá trị trung bình ô của phép xác định hàm lượng New Red được nêu trong Bảng E.8.

Bảng E.8 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng New Red

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

...

...

...

E

1

0,499 0

10,245

2,145

4,255

0,956 5

2

0,498 0

...

...

...

2,160

4,795

1,005 5

3

0,490 5

9,765

2,060

4,645

0,937 0

...

...

...

0,513 5

9,795

2,145

4,700

0,952 0

5

0,502 5

9,645

2,360

...

...

...

0,930 5

6

0,523 5

10,455

2,555

4,530

0,958 5

7

0,481 5

...

...

...

2,465

4,515

0,894 0

8

0,513 0

10,195

2,465

4,535

0,932 5

...

...

...

0,477 5

9,950

2,315

4,425

0,867 5

10

0,506 0

10,585

2,855

...

...

...

1,096 5

11

0,509 0

10,975

2,590

4,795

0,937 5

E.2.2.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng New Red nêu trong Bảng E.9.

...

...

...

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

1

...

...

...

0,23

0,19

0,69

0,037

2

0,024

0,10

0,06

0,05

...

...

...

3

0,007

0,03

0,04

0,05

0,030

4

0,059

0,11

...

...

...

0,04

0,022

5

0,015

0,13

0,20

0,01

0,021

6

...

...

...

0,37

0,39

0,08

0,021

7

0,041

0,60

0,59

0,21

...

...

...

8

0,020

0,03

0,03

0,61

0,061

9

0,059

0,48

...

...

...

0,33

0,043

10

0,056

0,29

0,15

0,11

0,049

11

...

...

...

2,03

0,02

0,15

0,059

E.2.2.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.2.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mandel h và k

Xem Hình E.3 và Hình E.4.

Chú dẫn

...

...

...

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.3 - Hàm lượng New Red - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, h, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.4 - Hàm lượng New Red - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 1 có giá trị bất thường ở mức D, phòng thử nghiệm số 10 ở mức C và phòng thử nghiệm số 11 ở mức B, trong khi phòng thử nghiệm số 10 có giá trị ngoại lệ ở mức E. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, phòng thử nghiệm số 10 thu được kết quả thử nghiệm cao hơn các phòng thử nghiệm khác ở mức E, vì vậy kết quả bị loại bỏ.

Đồ thị k cho thấy phòng thử nghiệm số 1 có giá trị bất thường ở mức D, phòng thử nghiệm số 7 ở mức C và phòng thử nghiệm số 8 ở mức D, trong khi phòng thử nghiệm số 11 có giá trị ngoại lệ ở mức B. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, chênh lệch tuyệt đối giữa dữ liệu đo được bởi phòng thử nghiệm số 11 ở mức B là lớn nhất, vì vậy kết quả bị loại bỏ.

...

...

...

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.10.

Bảng E.10 - Hàm lượng New Red - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

Thông số

Mức j

A

B

C

D

E

...

...

...

0,181 4

0,397 7

0,429 6

0,453 9

0,271 5

Giá trị bất thường (n = 2)

0,570

0,602

0,570

...

...

...

0,602

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

0,684

0,718

0,684

0,684

0,718

Số lượng các phòng thử nghiệm, p

11

...

...

...

11

11

10

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.2.4.3  Phép thử Grubb

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô của các giá trị thống kê phép thử G nêu trong Bảng E.11.

Bảng E.11 - Hàm lượng New Red - Áp dụng phép thử Grubb cho các giá trị trung bình ô

Mức j

Số lượng phòng thử nghiệm, p

...

...

...

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

Giá trị kép cao

A

11

1,701

1,591

0,402 5

0,602 9

...

...

...

10

1,314

1,440

0,633 2

0,535 2

C

11

1,304

1,996

...

...

...

0,428 1

D

11

1,885

1,389

0,488 1

0,528 2

E

10

...

...

...

1,834

0,335 8

0,509 4

Giá trị bất thường (5 %)

p = 10

2,290

2,290

0,186 4

0,186 4

...

...

...

2,355

2,355

0,221 3

0,221 3

Giá trị ngoại lệ (1 %)

p = 10

2,482

2,482

0,115 0

...

...

...

p = 11

2,564

2,564

0,144 8

0,144 8

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.2.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng New Red trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.12.

Bảng E.12 - Hàm lượng New Red - Các giá trị tính được của m, s_r, s_R

...

...

...

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

...

...

...

11

11

10

Giá trị trung bình chung, m

0,501

10,09

2,37

4,57

0,937

...

...

...

0,029 5

0,212 7

0,191 9

0,218 4

0,026 2

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,025 1

0,373 0

0,276 5

...

...

...

0,041 6

E.2.2.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

Bảng E.12 cho thấy không có sự phụ thuộc rõ rệt giữa s_r, s_R và m. Do đó, m có thể được coi là giá trị trung bình cuối cùng, s_r trung bình của năm nền mẫu là độ lệch chuẩn lặp lại cuối cùng và s_R trung bình của năm nền mẫu là độ lệch chuẩn tái lập cuối cùng.

E.2.2.7  Giá trị cuối cùng của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng New Red được đưa ra như sau:

- s_r = 0,135 7

- s_R = 0,188 4

E.2.3  Amaranth

E.2.3.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

...

...

...

Bảng E.13 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Amaranth

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

...

...

...

0,421

0,445

8,02

9,02

2,01

2,40

4,77

4,26

0,988

...

...

...

2

0,479

0,494

9,57

9,54

2,02

2,22

4,78

4,75

...

...

...

0,989

3

0,489

0,507

9,58

9,73

2,07

2,12

4,58

...

...

...

0,888

0,857

4

0,459

0,489

10,32

10,35

2,27

2,00

...

...

...

4,70

0,836

0,884

5

0,493

0,502

9,81

9,70

2,46

...

...

...

4,45

4,56

0,905

0,884

6

0,439

0,448

8,50

10,08

...

...

...

2,55

3,94

4,34

0,875

0,848

7

0,448

0,474

9,03

...

...

...

2,47

2,46

4,58

4,45

0,853

0,897

8

0,451

0,437

...

...

...

9,44

2,35

2,31

5,00

4,71

0,960

0,980

9

0,470

...

...

...

8,41

8,77

1,98

2,03

4,03

4,35

0,756

0,936

10

...

...

...

0,443

7,90

7,95

2,08

2,59

4,21

4,42

0,932

0,917

...

...

...

0,480

0,485

9,58

9,99

2,24

2,28

4,65

4,57

0,904

...

...

...

E.2.3.2  Giá trị trung bình ô

Giá trị trung bình ô của phép xác định hàm lượng Amaranth được nêu trong Bảng E.14.

Bảng E.14 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng Amaranth

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

...

...

...

E

1

0,433 0

8,520

2,205

4,515

0,979 0

2

0,486 5

...

...

...

2,120

4,765

0,993 0

3

0,498 0

9,705

2,095

4,570

0,872 5

...

...

...

0,474 0

10,335

2,135

4,655

0,860 0

5

0,497 5

9,755

2,480

...

...

...

0,894 5

6

0,443 5

9,290

2,255

4,140

0,861 5

7

0,461 0

...

...

...

2,465

4,515

0,875 0

8

0,444 0

9,480

2,330

4,855

0,970 0

...

...

...

0,446 5

8,590

2,005

4,190

0,846 0

10

0,478 5

7,925

2,335

...

...

...

0,924 5

11

0,482 5

9,785

2,260

4,610

0,915 0

E.2.3.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng Amaranth được nêu trong Bảng E.15.

...

...

...

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

1

...

...

...

1,00

0,39

0,51

0,018

2

0,015

0,03

0,20

0,03

...

...

...

3

0,018

0,05

0,05

0,02

0,031

4

0,030

0,03

...

...

...

0,09

0,048

5

0,009

0,11

0,04

0,11

0,021

6

...

...

...

1,58

0,59

0,40

0,027

7

0,026

0,59

0,01

0,13

...

...

...

8

0,014

0,08

0,04

0,29

0,020

9

0,047

0,36

...

...

...

0,32

0,180

10

0,071

0,05

0,51

0,21

0,015

11

...

...

...

0,41

0,04

0,08

0,022

E.2.3.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.3.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mandel h và k

Xem Hình E.5 và E.6.

Chú dẫn

...

...

...

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.5 - Hàm lượng Amaranth - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, h, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.6 - Hàm lượng Amaranth - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 10 có giá trị bất thường ở mức B, trong khi không tìm thấy giá trị ngoại lệ.

Đồ thị k cho thấy phòng thử nghiệm số 1 có giá trị bất thường ở mức D, phòng thử nghiệm số 6 ở mức C và phòng thử nghiệm số 10 ở mức A, trong khi phòng thử nghiệm số 6 có giá trị ngoại lệ ở mức B, phòng thử nghiệm số 9 ở mức E. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, chênh lệch tuyệt đối giữa dữ liệu đo được bởi phòng thử nghiệm số 6 ở mức B và phòng thử nghiệm số 9 ở mức E là lớn nhất, vì vậy các kết quả bị loại bỏ.

...

...

...

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.16.

Bảng E.16 - Hàm lượng Amaranth - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

Thông số

Mức j

A

B

C

D

E

...

...

...

0,487 8

0,598 4

0,394 2

0,374 0

0,292 8

Giá trị bất thường (n = 2)

0,570

0,602

0,570

...

...

...

0,602

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

0,684

0,718

0,684

0,684

0,718

Số lượng các phòng thử nghiệm, p

11

...

...

...

11

11

10

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.3.4.3  Phép thử Grubb

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô của các giá trị thống kê phép thử G được nêu trong Bảng E.17.

Bảng E.17 - Hàm lượng Amaranth - Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô

Mức j

Số lượng phòng thử nghiệm, p

...

...

...

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

Giá trị kép cao

A

11

1,497

1,305

0,595 0

0,590 5

...

...

...

10

1,884

1,424

0,358 4

0,664 2

C

11

1,581

1,560

...

...

...

0,441 9

D

11

1,672

1,539

0,403 2

0,555 0

E

10

...

...

...

1,553

0,686 0

0,440 2

Giá trị bất thường (5 %)

p = 10

2,290

2,290

0,186 4

0,186 4

...

...

...

2,355

2,355

0,2213

0,221 3

Giá trị ngoại lệ (1 %)

p = 10

2,482

2,482

0,115 0

...

...

...

p = 11

2,564

2,564

0,144 8

0,144 8

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.3.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Amaranth trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.18.

Bảng E.18 - Hàm lượng amaranth - Giá trị tính được của m, s_r, s_R

...

...

...

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

...

...

...

11

11

10

Giá trị trung bình chung, m

0,468

9,30

2,24

4,51

0,915

...

...

...

0,021 7

0,289 1

0,200 4

0,177 8

0,019 8

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,027 8

0,756 8

0,207 2

...

...

...

0,052 5

E.2.3.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

Bảng E.18 cho thấy không có sự phụ thuộc rõ rệt giữa s_r và m. Do đó, m có thể được coi là giá trị trung bình cuối cùng và s_r trung bình của năm nền mẫu là độ lệch chuẩn lặp lại cuối cùng. Phép tính thực tế thể hiện mối tương quan tuyến tính giữa logs_R với logm, như sau:

logs_R = 1,085 6 logm - 1,195 0, R^2 = 0,976 4

E.2.3.7  Giá trị cuối cùng của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Amaranth được đưa ra như sau:

- s_r = 0,141 7

- s_R = 0,064 m^1^,^09

E.2.4  Indigotin

...

...

...

Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia xác định hàm lượng Indigotin trong các mẫu thịt. Kết quả thử nghiệm được nêu trong Bảng E.19.

Bảng E.19 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Indigotin

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

...

...

...

1

0,388

0,338

7,84

8,26

1,99

2,19

4,36

3,60

...

...

...

0,831

2

0,419

0,431

8,36

8,15

1,94

2,07

4,41

...

...

...

0,877

0,933

3

0,434

0,404

8,61

8,94

2,07

2,12

...

...

...

3,94

0,836

0,851

4

0,426

0,406

8,57

8,46

2,07

...

...

...

4,03

4,27

0,853

0,806

5

0,413

0,375

9,01

8,40

...

...

...

2,15

4,37

4,15

0,801

0,844

6

0,375

0,421

7,81

...

...

...

1,87

2,26

3,47

3,55

0,813

0,898

7

0,380

0,367

...

...

...

8,42

2,04

1,81

4,17

3,72

0,827

0,817

8

0,394

...

...

...

8,33

8,08

1,97

2,34

4,31

3,88

0,846

0,829

9

...

...

...

0,390

7,61

8,16

1,71

1,50

3,99

4,37

0,729

0,796

...

...

...

0,399

0,347

8,03

8,32

1,85

2,16

3,77

4,32

0,807

...

...

...

11

0,412

0,371

8,36

8,99

1,82

2,37

4,37

4,08

...

...

...

0,917

E.2.4.2  Giá trị trung bình ô

Giá trị trung bình ô của phép xác định của hàm lượng Indigotin được nêu trong Bảng E.20.

Bảng E.20 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng Indigotin

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

...

...

...

D

E

1

0,363 0

8,050

2,090

3,980

0,840 5

2

...

...

...

8,255

2,005

4,245

0,905 0

3

0,419 0

8,775

2,095

4,145

...

...

...

4

0,416 0

8,515

2,035

4,150

0,829 5

5

0,394 0

8,705

...

...

...

4,260

0,822 5

6

0,398 0

8,060

2,065

3,510

0,855 5

7

...

...

...

8,180

1,925

3,945

0,822 0

8

0,410 0

8,205

2,155

4,095

...

...

...

9

0,409 5

7,885

1,605

4,180

0,762 5

10

0,373 0

8,175

...

...

...

4,045

0,842 5

11

0,391 5

8,675

2,097

4,225

0,868 0

E.2.4.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

...

...

...

Bảng E.21 - Chênh lệch tuyệt đối của ô - Hàm lượng Indigotin

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

...

...

...

0,050

0,42

0,20

0,76

0,019

2

0,012

0,21

0,13

...

...

...

0,056

3

0,030

0,33

0,05

0,41

0,015

4

0,020

...

...

...

0,07

0,24

0,047

5

0,038

0,61

0,23

0,22

0,043

...

...

...

0,046

0,50

0,39

0,08

0,085

7

0,013

0,48

0,23

...

...

...

0,010

8

0,032

0,25

0,37

0,43

0,017

9

0,039

...

...

...

0,21

0,38

0,067

10

0,052

0,29

0,31

0,55

0,071

...

...

...

0,041

0,63

0,55

0,29

0,098

E.2.4.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.4.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mandel h và k

Xem Hình E.7 và E.8.

...

...

...

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.7 - Hàm lượng Indigotin - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, h, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.8 - Hàm lượng Indigotin - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 2 và phòng thử nghiệm số 9 có hai giá trị bất thường ở mức E, trong khi phòng thử nghiệm số 6 có một giá trị ngoại lệ ở mức D, phòng thử nghiệm số 9 ở mức C. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, phòng thử nghiệm số 6 và phòng thử nghiệm số 9 thu được kết quả thử nghiệm thấp hơn so với các phòng thử nghiệm khác tương ứng ở mức D và C, vì vậy các kết quả này bị loại bỏ.

...

...

...

E.2.4.4.2  Phép thử Cochran

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.22.

Bảng E.22 - Hàm lượng Idigotin - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

Thông số

Mức j

A

B

C

D

...

...

...

Phép thử Cochran, C

0,185 2

0,194 6

0,356 0

0,307 4

0,278 2

Giá trị bất thường (n = 2)

0,570

0,570

...

...

...

0,602

0,570

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

0,684

0,684

0,718

0,718

0,684

Số lượng phòng thử nghiệm, p

...

...

...

11

10

10

11

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.4.4.3  Phép thử Grubb

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô của các giá trị thống kê phép thử G được nêu trong Bảng E.23.

Bảng E.23 - Hàm lượng Indigotin - Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô

Mức j

...

...

...

Giá trị đơn thấp

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

Giá trị kép cao

A

11

1,668

1,330

0,490 8

...

...

...

B

10

1,432

1,523

0,657 0

0,513 6

C

11

1,955

...

...

...

0,420 5

0,573 8

D

11

1,666

1,218

0,364 2

0,632 2

E

...

...

...

2,207

1,904

0,407 8

0,483 8

Giá trị bất thường (5 %)

p = 10

2,290

2,290

0,186 4

...

...

...

p = 11

2,355

2,355

0,221 3

0,2213

Giá trị ngoại lệ (1 %)

p = 10

2,482

2,482

...

...

...

0,115 0

p = 11

2,564

2,564

0,144 8

0,144 8

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.4.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Indigotin trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.24.

...

...

...

Thông số

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

Số lượng các phòng thử nghiệm, p

...

...

...

11

10

10

11

Giá trị trung bình, m

0,398

8,32

2,05

4,13

...

...

...

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,025 8

0,304 5

0,207 6

0,306 5

0,039 6

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,027 6

0,370 2

...

...

...

0,242 7

0,044 6

E.2.4.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

Bảng E.24 cho thấy s_r và s_R có mối tương quan thuận chặt chẽ với m. Phép tính thực tế thể hiện mối tương quan tuyến tính giữa logs_r (hoặc logs_R) với logm, như sau:

logs_r = 0,924 1 logm - 1,194 1, R^2 = 0,895 0

logs_R = 0,904 6 logm - 1,198 5, R^2 = 0,971 6

E.2.4.7  Giá trị cuối cùng của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Indigotin được đưa ra như sau:

- s_r = 0,064 m^0^,^92

...

...

...

E.2.5  Ponceau 4R

E.2.5.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia xác định hàm lượng Ponceau 4R trong các mẫu thịt. Kết quả thử nghiệm được nêu trong Bảng E.25.

Bảng E.25 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Ponceau 4R

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

...

...

...

D

E

1

0,428

0,453

8,44

8,07

2,16

2,38

...

...

...

3,95

0,975

0,899

2

0,479

0,495

8,03

7,98

2,29

...

...

...

4,69

4,64

0,966

0,994

3

0,474

0,436

8,52

8,74

...

...

...

2,47

4,66

4,71

0,896

0,914

4

0,455

0,440

8,39

...

...

...

2,30

2,07

4,67

4,74

0,952

0,923

5

0,443

0,446

...

...

...

8,65

2,30

2,28

4,91

4,79

0,983

1,014

6

0,414

...

...

...

8,07

8,49

2,28

2,27

4,23

4,34

0,871

0,893

7

...

...

...

0,467

8,27

8,50

2,20

2,22

4,56

4,45

0,877

0,934

...

...

...

0,462

0,429

8,45

8,35

2,35

2,36

4,87

4,27

0,948

...

...

...

9

0,437

0,421

7,90

8,30

2,16

2,13

3,92

5,00

...

...

...

0,816

10

0,427

0,474

8,18

8,35

2,20

2,22

4,37

...

...

...

0,890

0,872

11

0,471

0,518

8,77

8,78

2,30

2,32

...

...

...

4,52

0,805

1,037

E.2.5.2  Giá trị trung bình ô

Giá trị trung bình ô của phép xác định hàm lượng Ponceau 4R được nêu trong Bảng E.26.

Bảng E.26 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng Ponceau 4R

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

...

...

...

B

C

D

E

1

0,440 5

8,255

2,270

4,350

...

...

...

2

0,487 0

8,005

2,285

4,665

0,980 0

3

0,455 0

8,630

...

...

...

4,685

0,905 0

4

0,447 5

8,445

2,185

4,705

0,937 5

5

...

...

...

8,710

2,290

4,850

0,998 5

6

0,425 0

8,280

2,275

4,285

...

...

...

7

0,468 5

8,385

2,210

4,505

0,905 5

8

0,445 5

8,400

...

...

...

4,570

0,957 2

9

0,429 0

8,100

2,145

4,460

0,798 5

10

...

...

...

8,265

2,210

4,460

0,881 0

11

0,494 5

8,775

2,310

4,745

...

...

...

E.2.5.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng Ponceau 4R được nêu trong Bảng E.27.

Bảng E.27 - Chênh lệch tuyệt đối của ô - Hàm lượng Ponceau 4R

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

...

...

...

E

1

0,025

0,37

0,22

0,80

0,076

2

0,016

...

...

...

0,01

0,05

0,028

3

0,038

0,22

0,16

0,05

0,018

...

...

...

0,015

0,11

0,23

0,07

0,029

5

0,003

0,12

0,02

...

...

...

0,031

6

0,022

0,42

0,01

0,11

0,022

7

0,003

...

...

...

0,02

0,11

0,057

8

0,033

0,10

0,01

0,60

0,018

...

...

...

0,016

0,40

0,03

1,08

0,035

10

0,047

0,17

0,02

...

...

...

0,018

11

0,047

0,01

0,02

0,45

0,232

E.2.5.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.5.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mandel h và k

...

...

...

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.9 - Hàm lượng Ponceau 4R - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, h, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

...

...

...

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 9 có giá trị bất thường ở mức E, cũng như phòng thử nghiệm số 11 ở mức A, trong khi không tìm thấy giá trị ngoại lệ.

Đồ thị k cho thấy phòng thử nghiệm số 1 và phòng thử nghiệm số 4 có hai giá trị bất thường ở mức C, phòng thử nghiệm số 9 ở mức D, trong khi phòng thử nghiệm số 11 có một giá trị ngoại lệ ở mức E. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, chênh lệch tuyệt đối giữa dữ liệu đo được bởi các phòng thử nghiệm số 11 ở mức E là lớn nhất, vì vậy kết quả bị loại bỏ.

E.2.5.4.2  Phép thử Cochran

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.28.

Bảng E.28 - Hàm lượng Ponceau 4 R - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

Tham số

Mức j

A

B

...

...

...

D

E

Phép thử Cochran, C

0,250 6

0,274 5

0,407 9

0,476 1

0,403 8

Giá trị bất thường (n = 2)

...

...

...

0,570

0,570

0,570

0,602

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

0,684

0,684

0,684

0,684

...

...

...

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

11

11

11

10

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.5.4.3  Phép thử Grubb

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô của các giá trị thống kê phép thử G được nêu trong Bảng E.29.

...

...

...

Mức j

Số lượng các phòng thử nghiệm, p

Giá trị đơn thấp

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

Giá trị kép cao

A

11

1,296

...

...

...

0,643 3

0,284 3

B

11

1,571

1,601

0,530 1

0,470 5

C

...

...

...

1,649

1,693

0,521 9

0,471 8

D

11

1,630

1,591

0,482 7

...

...

...

E

10

2,078

1,394

0,370 7

0,571 9

Giá trị bất thường (5 %)

p = 10

2,290

...

...

...

0,186 4

0,186 4

p = 11

2,355

2,355

0,221 3

0,221 3

Giá trị ngoại lệ (1 %)

p = 10

...

...

...

2,482

0,115 0

0,1150

p = 11

2,564

2,564

0,144 8

0,144 8

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

...

...

...

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Ponceau 4R trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.30.

Bảng E.30 - Hàm lượng Ponceau 4R - Giá trị tính được của m, s_r, s_R

Thông số

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

...

...

...

Số lượng phòng thử nghiệm p

11

11

11

11

10

Giá trị trung bình chung, m

0,453

8,39

...

...

...

4,57

0,918

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,020 0

0,170 9

0,076 8

0,333 7

0,026 7

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

...

...

...

0,271 2

0,091 2

0,294 0

0,060 6

E.2.5.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

Bảng E.30 cho thấy không có sự phụ thuộc rõ rệt giữa s_r và m. Do đó, m có thể được coi là giá trị trung bình cuối cùng và trung bình s_r của năm nền mẫu là độ lệch chuẩn lặp lại cuối cùng. Phép tính thực tế thể hiện mối tương quan tuyến tính giữa logs_R với log_m như sau:

logs_R = 0,843 7 log m - 1,250 8, R^2 = 0,938 0

E.2.5.7  Giá trị cuối của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Ponceau 4R được đưa ra như sau:

...

...

...

- s_R = 0,056 m^0^,^84

E.2.6  Sunset Yellow FCF

E.2.6.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia xác định hàm lượng FCF Sunset Yellow trong các mẫu thịt. Kết quả thử nghiệm được nêu trong Bảng E.31.

Bảng E.31 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Sunset Yellow FCF

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

...

...

...

C

D

E

1

0,448

0,469

9,35

9,50

2,30

...

...

...

4,75

4,04

1,010

0,951

2

0,461

0,466

9,23

8,95

...

...

...

2,48

4,90

4,85

0,933

1,085

3

0,459

0,465

8,37

...

...

...

2,22

2,50

4,75

4,77

0,944

0,996

4

0,459

0,471

...

...

...

8,57

2,44

2,41

4,77

4,74

0,912

0,975

5

0,491

...

...

...

8,93

8,95

2,22

2,24

4,86

4,89

0,925

0,884

6

...

...

...

0,537

9,73

9,91

3,07

2,28

4,25

4,93

1,030

0,942

...

...

...

0,503

0,480

9,76

10,19

2,48

2,53

4,47

4,98

0,972

...

...

...

8

0,507

0,489

10,14

9,43

2,96

2,06

5,04

4,65

...

...

...

1,040

9

0,501

0,467

9,23

9,94

2,42

2,38

4,63

...

...

...

0,883

0,967

10

0,485

0,500

10,04

9,54

2,38

2,71

...

...

...

4,99

0,987

0,942

11

0,535

0,473

10,04

10,84

2,60

...

...

...

4,82

5,10

1,015

1,025

E.2.6.2  Giá trị trung bình ô

Giá trị trung bình ô để xác định hàm lượng Sunset Yellow FCF được nêu trong Bảng E.32.

Bảng E.32 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng Sunset Yellow FCF

Phòng thử nghiệm i

Mức j

...

...

...

A

B

C

D

E

1

0,458 5

9,425

2,390

...

...

...

0,980 5

2

0,463 5

9,090

2,460

4,875

1,009 0

3

0,462 0

...

...

...

2,360

4,760

0,970 0

4

0,465 0

8,500

2,425

4,755

0,943 5

...

...

...

0,495 5

8,940

2,230

4,875

0,904 5

6

0,522 5

9,820

2,675

...

...

...

0,986 0

7

0,491 5

9,975

2,505

4,725

0,964 5

8

0,498 0

...

...

...

2,510

4,845

0,998 5

9

0,484 0

9,585

2,400

4,750

0,925 0

...

...

...

0,492 5

9,790

2,545

4,830

0,964 5

11

0,504 0

10,440

2,620

...

...

...

1,020 0

E.2.6.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng Sunset Yellow FCF được nêu trong Bảng E.33.

Bảng E.33 - Chênh lệch tuyệt đối của ô - Hàm lượng Sunset Yellow FCF

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

...

...

...

D

E

1

0,021

0,15

0,18

0,71

0,059

2

...

...

...

0,28

0,04

0,05

0,152

3

0,006

0,53

0,28

0,02

...

...

...

4

0,012

0,14

0,03

0,03

0,063

5

0,009

0,02

...

...

...

0,03

0,041

6

0,029

0,18

0,79

0,68

0,088

7

...

...

...

0,43

0,05

0,51

0,015

8

0,018

0,71

0,90

0,39

...

...

...

9

0,034

0,71

0,04

0,24

0,084

10

0,015

0,50

...

...

...

0,32

0,045

11

0,062

0,80

0,04

0,28

0,010

E.2.6.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

...

...

...

Xem Hình E.11 và E.12.

Chú giải

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.11 - Hàm lượng Sunset Yellow FCF - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, h, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Chú giải

 giá trị tới hạn 1 %

...

...

...

Hình E.12 - Hàm lượng Sunset yellow FCF - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 5 có hai giá trị bất thường ở mức C và E, trong khi phòng thử nghiệm số 1 có giá trị ngoại lệ ở mức D. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, phòng thử nghiệm số 1 thu được kết quả thử nghiệm thấp hơn so với các phòng thử nghiệm khác ở mức D, vì vậy kết quả này bị loại bỏ.

Đồ thị k cho thấy phòng thử nghiệm số 2 có một giá trị bất thường ở mức E, phòng thử nghiệm số 6 và phòng thử nghiệm số 8 có hai giá trị bất thường ở mức C, trong khi phòng thử nghiệm số 11 có giá trị ngoại lệ ở mức A. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, chênh lệch tuyệt đối giữa dữ liệu đo được bởi phòng thử nghiệm số 11 ở mức A là lớn nhất, vì vậy kết quả này bị loại bỏ.

E.2.6.4.2  Phép thử Cochran

E.2.6.4.2.1  Yêu cầu chung

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.34.

Bảng E.34 - Hàm lượng Sunset Yellow FCF - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

Thông số

Mức j

...

...

...

B

C

D

E

Phép thử Cochran, C

0,304 1

0,254 2

0,487 2

0,413 7

...

...

...

Giá trị bất thường (n = 2)

0,602

0,570

0,570

0,602

0,570

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

0,718

0,684

...

...

...

0,718

0,684

Số lượng phòng thử nghiệm, p

10

11

11

10

11

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại tệ.

...

...

...

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô của các giá trị thống kê phép thử G được nêu trong Bảng E.35.

Bảng E.35 - Hàm lượng Sunset Yellow FCF - Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô

Mức j

Số lượng phòng thử nghiệm, p

Giá trị đơn thấp

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

Giá trị kép cao

A

...

...

...

1,199

1,895

0,653 4

0,450 4

B

11

1,590

1,646

0,464 2

...

...

...

C

11

1,886

1,678

0,490 1

0,470 6

D

10

2,005

...

...

...

0,398 8

0,578 9

E

11

1,859

1,437

0,383 0

0,594 3

Giá trị bất thường (5 %)

...

...

...

2,290

2,290

0,186 4

0,186 4

p = 11

2,355

2,355

0,221 3

0,221 3

...

...

...

p = 10

2,482

2,482

0,1150

0,115 0

p = 11

2,564

2,564

0,144 8

...

...

...

Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.6.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Sunset Yellow FCF trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.36.

Bảng E.36 - Hàm lượng Sunset Yellow FCF - Giá trị tính được của m, s_r, s_R

Thông số

Mức j

mg/kg

A

B

...

...

...

D

E

Số lượng phòng thử nghiệm, p

10

11

11

10

11

Giá trị trung bình chung, m

...

...

...

9,45

2,47

4,80

0,970

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,013 8

0,338 3

0,274 9

0,236 4

...

...

...

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,022 9

0,645 6

0,231 0

0,196 4

0,050 7

E.2.6.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

Bảng E.36 cho thấy không có sự phụ thuộc rõ rệt giữa s_r và m. Do đó, m có thể được coi là giá trị trung bình cuối cùng và s_r trung bình của năm nền mẫu là độ lệch chuẩn lặp lại cuối cùng. Phép tính thực tế thể hiện mối tương quan tuyến tính giữa logs_R với logm, như sau:

logs_R = 1,072 7 logm - 1,262 7, R^2 = 0,942 6

...

...

...

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Sunset Yellow FCF được đưa ra như sau:

- s_r = 0,183 0

- s_R = 0,055 m^1^,^07

E.2.7  Allura Red AC

E.2.7.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia xác định hàm lượng Allura Red AC trong các mẫu thịt. Kết quả thử nghiệm được nêu trong Bảng E.37.

Bảng E.37 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Allura Red AC

Phòng thử nghiệm i

Mức j

...

...

...

A

B

C

D

E

1

0,469

0,451

9,15

...

...

...

2,26

2,44

4,86

3,93

1,017

0,977

2

0,496

0,479

...

...

...

8,57

2,31

2,08

4,97

5,10

0,978

0,989

3

0,481

...

...

...

9,20

9,87

2,38

2,13

4,74

5,14

0,990

0,953

4

...

...

...

0,534

9,32

9,01

2,38

2,33

4,97

4,92

0,950

0,918

...

...

...

0,467

0,486

9,51

9,28

2,51

2,57

4,87

4,77

0,937

...

...

...

6

0,453

0,496

9,83

9,82

3,05

3,44

4,65

4,75

...

...

...

0,977

7

0,487

0,508

10,16

10,14

2,65

2,41

4,99

...

...

...

0,902

0,967

8

0,499

0,486

9,90

10,03

2,46

2,88

...

...

...

4,92

0,954

0,971

9

0,495

0,470

9,34

9,94

2,47

...

...

...

4,54

4,87

0,852

0,888

10

0,531

0,518

10,07

10,02

...

...

...

2,89

4,71

4,79

0,948

0,919

11

0,533

0,511

10,65

...

...

...

2,60

2,79

4,89

5,13

0,952

1,240

E.2.7.2  Giá trị trung bình ô

Giá trị trung bình ô của phép xác định hàm lượng Allura Red AC được nêu trong Bảng E.38.

Bảng E.38 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng Allura Red AC

...

...

...

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

1

0,460 0

...

...

...

2,350

4,395

0,997 0

2

0,487 5

8,590

2,195

5,035

0,983 5

...

...

...

0,495 0

9,535

2,255

4,940

0,971 5

4

0,513 5

9,165

2,355

...

...

...

0,934 0

5

0,476 5

9,395

2,540

4,820

0,945 5

6

0,474 5

...

...

...

3,245

4,700

0,958 5

7

0,497 5

10,150

2,530

4,780

0,934 5

...

...

...

0,492 5

9,965

2,670

4,830

0,962 5

9

0,482 5

9,640

2,895

...

...

...

0,870 0

10

0,524 5

10,045

2,710

4,750

0,933 5

11

0,522 0

...

...

...

2,695

5,010

1,096 0

E.2.7.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng Allura Red AC được nêu trong Bảng E.39.

Bảng E.39 - Chênh lệch tuyệt đối của ô - Hàm lượng Allura Red AC

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

...

...

...

B

C

D

E

1

0,018

0,76

0,18

0,93

...

...

...

2

0,017

0,04

0,23

0,13

0,011

3

0,028

0,67

...

...

...

0,40

0,037

4

0,041

0,31

0,05

0,05

0,032

5

...

...

...

0,23

0,06

0,10

0,017

6

0,043

0,01

0,39

0,10

...

...

...

7

0,021

0,02

0,24

0,42

0,065

8

0,013

0,13

...

...

...

0,18

0,017

9

0,025

0,60

0,85

0,33

0,036

10

...

...

...

0,05

0,36

0,08

0,029

11

0,022

0,56

0,19

0,24

...

...

...

E.2.7.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.7.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mandel h và k

Xem Hình E.13 và E.14.

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.13 - Hàm lượng Allura Red AC - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, h, được nhóm theo phòng thử nghiệm

...

...

...

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.14 - Hàm lượng Allura Red AC - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 2 có một giá trị bất thường ở mức B, phòng thử nghiệm số 6 ở mức C, trong khi phòng thử nghiệm số 1 và phòng thử nghiệm số 11 có hai giá trị ngoại lệ lần lượt ở mức D và E. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, phòng thử nghiệm số 1 thu được kết quả thử nghiệm thấp hơn các phòng thử nghiệm khác ở mức D và phòng thử nghiệm số 11 thu được kết quả thử nghiệm cao nhất ở mức E, vì vậy các kết quả này bị loại bỏ.

Đồ thị k cho thấy không có giá trị nào bất thường, trong khi phòng thử nghiệm số 1 có giá trị ngoại lệ ở mức D, phòng thử nghiệm số 9 ở mức C và phòng thử nghiệm số 11 ở mức E. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, chênh lệch tuyệt đối giữa dữ liệu đo được bởi phòng thử nghiệm số 1 ở mức D, phòng thử nghiệm số 9 ở mức C và phòng thử nghiệm số 11 ở mức E là lớn nhất, vì vậy các kết quả này bị loại bỏ.

E.2.7.4.2  Phép thử Cochran

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.40.

Bảng E.40 - Hàm lượng Allura Red AC - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

Thông số

...

...

...

A

B

C

D

E

Phép thử Cochran, C

0,257 7

0,308 8

0,250 0

...

...

...

0,340 1

Bất thường (n = 2)

0,570

0,570

0,602

0,602

0,602

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

0,684

...

...

...

0,718

0,718

0,718

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

11

10

10

10

...

...

...

E.2.7.4.3  Phép thử Grubb

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô của các giá trị thống kê phép thử G được nêu trong Bảng E.41.

Bảng E.41 - Hàm lượng Allura Red AC - Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô

Mức j

Số lượng phòng thử nghiệm, p

Giá trị đơn thấp

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

Giá trị kép cao

...

...

...

11

1,639

1,538

0,572 8

0,466 2

B

11

2,129

1,428

...

...

...

0,633 8

C

10

1,180

2,266

0,672 9

0,293 2

D

10

...

...

...

1,489

0,593 8

0,462 8

E

10

2,241

1,359

0,320 7

0,613 0

...

...

...

p = 10

2,290

2,290

0,186 4

0,186 4

p = 11

2,355

2,355

0,2213

...

...

...

Giá trị ngoại lệ (1 %)

p = 10

2,482

2,482

0,115 0

0,115 0

p = 11

2,564

2,564

...

...

...

0,144 8

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.7.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Allura Red AC trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.42.

Bảng E.42 - Hàm lượng Allura Red AC - Giá trị tính được của m, s_r, s_R

Thông số

Mức j

mg/kg

A

...

...

...

C

D

E

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

11

10

10

10

...

...

...

0,493

9,66

2,55

4,85

0,949

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,018 1

0,291 6

0,187 8

...

...

...

0,024 9

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,024 0

0,541 4

0,332 4

0,172 4

0,039 4

E.2.7.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

Bảng E.42 cho thấy không có sự phụ thuộc rõ rệt giữa s_R và m. Do đó, m có thể được coi là giá trị trung bình cuối cùng và s_R trung bình của năm nền mẫu là độ lệch chuẩn tái lập cuối cùng. Phép tính thực tế thể hiện mối tương quan tuyến tính giữa logs_R với logm như sau:

...

...

...

E.2.7.7  Giá trị cuối cùng của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Allura Red AC được đưa ra như sau:

- s_r = 0,037 m^1^,^01

- s_R = 0,221 9

E.2.8  Brilliant Blue FCF

E.2.8.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia xác định hàm lượng Brilliant Blue FCF trong các mẫu thịt. Kết quả thử nghiệm được nêu trong Bảng E.43.

Bảng E.43 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Brilliant Blue FCF

Phòng thử nghiệm i

...

...

...

mg/kg

A

B

C

D

E

1

0,384

0,367

...

...

...

7,99

2,13

2,01

5,28

4,62

0,868

0,833

2

0,395

...

...

...

8,47

8,40

2,06

2,25

4,18

3,79

0,886

0,841

3

...

...

...

0,418

7,78

7,83

2,21

2,28

4,20

4,25

0,844

0,843

...

...

...

0,403

0,407

7,74

7,47

2,01

1,94

4,07

4,11

0,815

...

...

...

5

0,383

0,392

8,01

8,16

1,98

2,09

3,84

4,00

...

...

...

0,811

6

0,427

0,395

8,19

7,98

1,99

2,42

3,87

...

...

...

0,768

0,826

7

0,401

0,372

8,09

8,40

2,34

1,88

...

...

...

4,04

0,797

0,762

8

0,387

0,418

8,08

8,33

1,79

...

...

...

3,87

4,19

0,839

0,879

9

0,407

0,361

7,61

8,03

...

...

...

1,84

3,78

4,01

0,770

0,809

10

0,385

0,403

8,31

...

...

...

1,94

2,21

3,97

4,03

0,858

0,787

11

0,420

0,397

...

...

...

8,75

2,03

2,22

4,22

4,20

0,803

0,844

E.2.8.2  Giá trị trị trung bình ô

Giá trị trung bình ô của phép xác định hàm lượng Brilliant Blue FCF được nêu trong Bảng E.44.

...

...

...

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

1

...

...

...

7,885

2,070

4,950

0,850 5

2

0,399 5

8,435

2,155

3,985

...

...

...

3

0,411 5

7,805

2,245

4,225

0,843 5

4

0,405 0

7,605

...

...

...

4,090

0,821 5

5

0,387 5

8,085

2,035

3,920

0,802 0

6

...

...

...

8,085

2,205

4,040

0,797 0

7

0,386 5

8,245

2,110

3,960

...

...

...

8

0,402 5

8,205

1,995

4,030

0,859 0

9

0,384 0

7,820

...

...

...

3,895

0,789 5

10

0,394 0

8,200

2,075

4,000

0,822 5

11

...

...

...

8,615

2,125

4,210

0,823 5

E.2.8.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng Brilliant Blue FCF được nêu trong Bảng E.45.

Bảng E.45 - Chênh lệch tuyệt đối của ô - Hàm lượng Brilliant Blue FCF

Phòng thử nghiệm i

Mức j

...

...

...

A

B

C

D

E

1

0,017

0,21

0,12

...

...

...

0,035

2

0,009

0,07

0,19

0,39

0,045

3

0,013

...

...

...

0,07

0,05

0,001

4

0,004

0,27

0,07

0,04

0,013

...

...

...

0,009

0,15

0,11

0,16

0,018

6

0,032

0,21

0,43

...

...

...

0,058

7

0,029

0,31

0,46

0,16

0,035

8

0,031

...

...

...

0,41

0,32

0,040

9

0,046

0,42

0,53

0,23

0,039

...

...

...

0,018

0,22

0,27

0,06

0,071

11

0,023

0,27

0,19

...

...

...

0,041

E.2.8.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.8.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mandel h và k

Xem Hình E.15 và E.16.

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.15 - Hàm lượng Brilliant Blue FCF - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, h, được nhóm theo phòng thử nghiệm

...

...

...

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.16 - Hàm lượng Brilliant Blue FCF - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Đồ thị h cho thấy không có giá trị bất thường, trong khi phòng thử nghiệm số 1 có giá trị ngoại lệ ở mức D. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, phòng thử nghiệm số 1 thu được kết quả thử nghiệm cao nhất ở mức D, vì vậy kết quả bị loại bỏ.

Đồ thị k cho thấy phòng thử nghiệm số 1 có giá trị bất thường ở mức D, trong khi không tìm thấy giá trị ngoại lệ.

E.2.8.4.2  Phép thử Cochran

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.46.

Bảng E.46 - Hàm lượng Brilliant blue FCF - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

...

...

...

Mức j

A

B

C

D

E

Phép thử Cochran, C

0,329 0

0,272 5

...

...

...

0,315 4

0,277 3

Giá trị bất thường (n = 2)

0,570

0,570

0,570

0,602

0,570

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

...

...

...

0,684

0,684

0,718

0,684

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

11

11

10

...

...

...

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.8.4.3  Phép thử Grubb

Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô cho giá trị thống kê được nêu trong Bảng E.47.

Bảng E.47 - Hàm lượng Brilliant blue FCF - Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô

Mức j

Số lượng các phòng thử nghiệm, p

Giá trị đơn thấp

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

...

...

...

A

11

1,756

1,203

0,491 7

0,658 0

B

11

1,638

...

...

...

0,564 2

0,452 0

C

11

1,508

1,761

0,527 0

0,424 3

D

...

...

...

1,260

1,699

0,6314

0,259 4

E

11

1,512

1,413

0,556 7

...

...

...

Giá trị bất thường (5 %)

p = 10

2,290

2,290

0,186 4

0,186 4

p = 11

2,355

2,355

...

...

...

0,221 3

Giá trị ngoại lệ (1 %)

p = 10

2,482

2,482

0,115 0

0,115 0

p = 11

2,564

...

...

...

0,144 8

0,144 8

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.8.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Brilliant Blue FCF trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.48.

Bảng E.48 - Hàm lượng Brilliant Blue FCF - Giá trị tính được của m, s_r, s_R

Thông số

Mức j

mg/kg

...

...

...

B

C

D

E

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

11

11

10

...

...

...

Giá trị trung bình chung, m

0,397

8,09

2,10

4,04

0,823

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,017 1

0,171 5

...

...

...

0,155 3

0,028 7

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,017 1

0,319 8

0,173 7

0,156 5

0,035 2

E.2.8.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

...

...

...

logs_R = 0,978 1 logm - 1,320 1, R^2 = 0,933 1

E.2.8.7  Giá trị cuối cùng của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Brilliant Blue FCF được đưa ra như sau:

- s_r = 0,117 7

- s_R = 0,048 m^0,98

E.2.9  Carmoisin

E.2.9.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia xác định hàm lượng Carmoisin trong các mẫu thịt. Kết quả thử nghiệm được nêu trong Bảng E.49.

Bảng E.49 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Carmoisin

...

...

...

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

1

0,394

...

...

...

8,20

8,45

2,53

2,21

4,56

3,54

0,892

0,877

2

...

...

...

0,411

8,57

8,40

2,44

2,52

4,39

4,17

0,875

0,813

...

...

...

0,394

0,401

8,16

8,17

2,29

2,44

4,39

4,66

0,890

...

...

...

4

0,399

0,441

8,24

8,23

2,50

2,27

4,59

4,50

...

...

...

0,860

5

0,421

0,434

7,93

8,11

2,28

2,18

4,23

...

...

...

0,805

0,815

6

0,429

0,470

7,58

9,56

2,42

2,39

...

...

...

4,14

0,831

0,800

7

0,439

0,498

8,86

8,87

2,46

...

...

...

4,29

4,29

0,809

0,781

8

0,478

0,405

8,76

8,65

...

...

...

2,27

4,01

4,61

0,855

0,877

9

0,458

0,419

8,32

...

...

...

1,82

2,64

3,99

4,61

0,750

0,794

10

0,501

0,438

...

...

...

8,93

2,36

2,41

4,20

4,37

0,836

0,770

11

0,431

...

...

...

9,57

8,96

2,57

2,33

4,48

4,53

0,836

0,813

E.2.9.2  Giá trị trung bình ô

...

...

...

Bảng E.50 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng Carmoisin

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

...

...

...

0,392 0

8,323

2,370

4,050

0,884 5

2

0,398 5

8,485

2,480

...

...

...

0,844 0

3

0,397 5

8,165

2,365

4,525

0,872 0

4

0,420 0

...

...

...

2,385

4,545

0,863 5

5

0,427 5

8,020

2,230

4,240

0,810 0

...

...

...

0,449 5

8,570

2,405

4,145

0,815 5

7

0,468 5

8,865

2,365

...

...

...

0,795 0

8

0,441 5

8,705

2,285

4,310

0,866 0

9

0,438 5

...

...

...

2,230

4,300

0,772 0

10

0,469 5

8,745

2,385

4,285

0,803 0

...

...

...

0,485 0

9,265

2,450

4,505

0,824 5

E.2.9.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng Carmoisin được nêu trong Bảng E.51.

Bảng E.51 - Chênh lệch tuyệt đối của ô - Hàm lượng Carmoisin

Phòng thử nghiệm i

...

...

...

mg/kg

A

B

C

D

E

1

0,004

0,25

...

...

...

1,02

0,015

2

0,025

0,17

0,08

0,22

0,062

3

...

...

...

0,01

0,15

0,27

0,036

4

0,042

0,01

0,23

0,09

...

...

...

5

0,013

0,18

0,10

0,02

0,010

6

0,041

1,98

...

...

...

0,01

0,031

7

0,059

0,01

0,19

0,00

0,028

8

...

...

...

0,11

0,03

0,60

0,022

9

0,039

0,41

0,82

0,62

...

...

...

10

0,063

0,37

0,05

0,17

0,066

11

0,108

0,61

...

...

...

0,05

0,023

E.2.9.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.9.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mandel h và k

Xem Hình E.17 và E.18.

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

...

...

...

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.18 - Hàm lượng Carmoisin - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm theo phòng thử nghiệm

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 11 có giá trị bất thường ở mức B, trong khi không tìm thấy giá trị ngoại lệ.

Đồ thị k cho thấy phòng thử nghiệm số 11 có giá trị bất thường ở mức A, trong khi phòng thử nghiệm số 1 có giá trị ngoại lệ ở mức D, phòng thử nghiệm số 6 ở mức B và phòng thử nghiệm số 9 ở mức C. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, chênh lệch tuyệt đối giữa dữ liệu đo được bởi phòng thử nghiệm số 1 ở mức D, phòng thử nghiệm số 6 ở mức B và phòng thử nghiệm số 9 ở mức C là lớn nhất, vì vậy các kết quả này bị loại bỏ.

E.2.9.4.2  Phép thử Cochran

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.52.

Bảng E.52 - Hàm lượng Carmoisin - Giá trị của thống kê C phép thử Cochran

...

...

...

Mức j

A

B

C

D

E

Phép thử Cochran, C

0,385 4

0,458 6

...

...

...

0,424 4

0,299 1

Giá trị bất thường (n = 2)

0,570

0,602

0,602

0,602

0,570

Giá trị ngoại lệ (n = 2)

...

...

...

0,718

0,718

0,718

0,684

Số lượng các phòng thử nghiệm, p

11

10

10

10

...

...

...

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.9.4.3  Phép thử Grubb

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô của các giá trị thống kê phép thử G được nêu trong Bảng E.53.

Bảng E.53 - Hàm lượng Carmoisin - Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô

Mức j

Số lượng phòng thử nghiệm, p

Giá trị đơn thấp

Giá trị đơn cao

Giá trị kép thấp

...

...

...

A

11

1,372

1,577

0,594 9

0,554 8

B

10

1,375

...

...

...

0,604 4

0,372 8

C

10

1,965

1,494

0,270 6

0,530 5

D

...

...

...

1,467

1,504

0,627 4

0,430 6

E

11

1,642

1,446

0,550 0

...

...

...

Giá trị bất thường (5 %)

p = 10

2,290

2,290

0,186 4

0,186 4

p = 11

2,355

2,355

...

...

...

0,221 3

Giá trị ngoại lệ (1 %)

p = 10

2,482

2,482

0,115 0

0,115 0

p = 11

2,564

...

...

...

0,144 8

0,144 8

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.9.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Carmoisin trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.54.

Bảng E.54 - Hàm lượng Carmoisin - Giá trị tính được của m, s_r và s_R

Thông số

Mức j

mg/kg

...

...

...

B

C

D

E

Số lượng phòng thử nghiệm, p

11

10

10

10

...

...

...

Giá trị trung bình chung, m

0,435

8,53

2,37

4,34

0,832

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,037 1

0,2014

...

...

...

0,212 8

0,025 7

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,041 0

0,399 6

0,111 9

0,201 9

0,040 7

E.2.9.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

...

...

...

s_R = 0,045 3 m + 0,009 3, R^2 = 0,997 4

E.2.9.7  Giá trị cuối cùng của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Carmoisin được đưa ra như sau:

- s_r = 0,119 6

- s_R = 0,045 3 m + 0,009 3

E.2.10  Erythrosin

E.2.10.1  Kết quả thử nghiệm ban đầu

Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia xác định hàm lượng Erythrosin trong các mẫu thịt. Kết quả thử nghiệm được nêu trong Bảng E.55. Do tính không ổn định nên Erythrosin ở nồng độ thấp dễ bị phân hủy. Vì vậy, các kết quả của phòng thử nghiệm số 6, 10 và 11 ở mức A là không đáng tin cậy đã không được sử dụng.

Bảng E.55 - Kết quả thử nghiệm ban đầu - Hàm lượng Erythrosin

...

...

...

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

1

0,349

...

...

...

7,61

7,32

1,82

1,99

4,15

3,41

0,776

0,750

2

...

...

...

0,388

7,37

7,21

2,00

1,79

3,99

3,76

0,746

0,770

...

...

...

0,379

0,398

8,10

8,19

1,98

2,04

3,85

3,77

0,789

...

...

...

4

0,357

0,344

7,26

7,01

1,96

1,87

3,65

3,4

...

...

...

0,748

5

0,349

0,372

7,21

7,15

1,88

1,99

3,78

...

...

...

0,743

0,759

6

-

-

8,26

7,95

1,86

1,80

...

...

...

3,81

-

-

7

0,370

0,356

7,43

7,46

1,86

...

...

...

3,76

3,59

0,719

0,742

8

0,390

0,394

7,96

7,84

...

...

...

1,79

4,03

3,75

0,797

0,772

9

0,396

0,375

6,64

...

...

...

1,71

1,81

3,41

3,61

0,790

0,762

10

-

-

...

...

...

6,54

1,42

1,42

3,27

3,34

-

-

11

-

...

...

...

7,19

7,29

1,55

1,56

3,53

3,79

-

-

E.2.10.2  Giá trị trung bình ô

...

...

...

Bảng E.56 - Giá trị trung bình ô - Hàm lượng Erythrosin

Phòng thử nghiệm i

Mức j

mg/kg

A

B

C

D

E

...

...

...

0,360 5

7,465

1,905

3,780

0,763 0

2

0,377 0

7,290

1,895

...

...

...

0,758 0

3

0,388 5

8,145

2,010

3,810

0,780 0

4

0,350 5

...

...

...

1,915

3,525

0,743 0

5

0,360 5

7,180

1,935

3,660

0,751 0

...

...

...

-

8,105

1,830

3,915

-

7

0,363 0

7,445

1,920

...

...

...

0,730 5

8

0,392 0

7,900

1,855

3,890

0,784 5

9

0,385 5

...

...

...

1,760

3,510

0,776 0

10

-

6,370

1,420

3,305

-

...

...

...

-

7,240

1,555

3,660

-

E.2.10.3  Chênh lệch tuyệt đối của ô

Chênh lệch tuyệt đối của ô của phép xác định hàm lượng Erythrosin được nêu trong Bảng E.57.

Bảng E.57 - Chênh lệch tuyệt đối của ô - Hàm lượng Erythrosin

Phòng thử nghiệm i

...

...

...

mg/kg

A

B

C

D

E

1

0,023

0,29

...

...

...

0,74

0,026

2

0,022

0,16

0,21

0,23

0,024

3

...

...

...

0,09

0,06

0,08

0,018

4

0,013

0,25

0,09

0,25

...

...

...

5

0,023

0,06

0,11

0,24

0,016

6

-

0,31

...

...

...

0,21

-

7

0,014

0,03

0,12

0,17

0,023

8

...

...

...

0,12

0,13

0,28

0,025

9

0,021

0,35

0,10

0,20

...

...

...

10

-

0,34

0,00

0,07

-

11

-

0,10

...

...

...

0,26

-

E.2.10.4  Xem xét kết quả về tính nhất quán và các giá trị ngoại lệ

E.2.10.4.1  Kỹ thuật nhất quán bằng đồ thị theo thống kê Mande h và k

Mức A và mức E có kết quả từ 8 phòng thử nghiệm hợp lệ, trong khi các mức khác có kết quả từ 11 phòng thử nghiệm hợp lệ. Các chỉ số đối với thống kê Mandel h và k ở mức có ý nghĩa 1 % và 5 % có liên quan đến số lượng phòng thử nghiệm hợp lệ. Vì vậy, đồ thị Mandel h và k đối với mức A và mức E được nêu trong Hình E.19 và E.20. Đồ thị h và k đối với các mức B, C và D được nêu trong Hình E.21 và E.22.

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

...

...

...

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.20 - Hàm lượng Erythrosin - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm theo phòng thử nghiệm (mức A và mức E)

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

...

...

...

Chú dẫn

 giá trị tới hạn 1 %

 giá trị tới hạn 5 %

Hình E.22 - Hàm lượng Erythrosin - Thống kê nhất quán liên phòng thử nghiệm của Mandel, k, được nhóm bởi các phòng thử nghiệm (các mức B, C và D)

Đồ thị h cho thấy phòng thử nghiệm số 10 thu được kết quả thử nghiệm thấp hơn nhiều so với tất cả các phòng thử nghiệm khác ở tất cả các mức và có giá trị ngoại lệ ở mức C. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, phòng thử nghiệm số 10 đã thu được kết quả thử nghiệm thấp hơn so với các phòng thử nghiệm khác ở mức C, và vì vậy kết quả bị loại bỏ.

Đồ thị k cho thấy không có giá trị nào bất thường, trong khi phòng thử nghiệm số 1 có giá trị ngoại lệ ở mức D. Khi tiếp tục xác nhận giá trị sử dụng, chênh lệch tuyệt đối giữa dữ liệu đo được bởi phòng thử nghiệm số 1 ở mức D là lớn nhất, vì vậy kết quả này bị loại bỏ.

E.2.10.4.2  Phép thử Cochran

Dữ liệu còn lại được sử dụng để thực hiện phép thử Cochran tiếp theo, thu được các giá trị thống kê phép thử C nêu trong Bảng E.58.

...

...

...

Thông số

Mức j

A

B

C

D

E

Phép thử Cochran, C

0,194 1

...

...

...

0,311 0

0,176 9

0,202 6

Giá trị bất thường (n = 2)

0,680

0,570

0,602

0,602

0,680

...

...

...

0,794

0,684

0,718

0,718

0,794

Số lượng phòng thử nghiệm, p

8

11

10

...

...

...

8

Việc áp dụng phép thử Cochran khẳng định không có giá trị bất thường và giá trị ngoại lệ.

E.2.10.4.3  Phép thử Grubb

Việc áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô của các giá trị thống kê phép thử G được nêu trong Bảng E.59.

Bảng E.59 - Hàm lượng Erythrosin - Áp dụng phép thử Grubb cho giá trị trung bình ô

Mức j

Số lượng phòng thử nghiệm, p

Giá trị đơn thấp

Giá trị đơn cao

...

...

...

Giá trị kép cao

A

8

1,397

1,276

0,530 2

0,480 6

B

11

...

...

...

1,446

0,446 1

0,514 7

C

10

2,413

1,210

0,143 7

0,749 2

...

...

...

10

1,918

1,181

0,397 3

0,652 0

E

8

1,599

1,255

...

...

...

0,503 9

Giá trị bất thường (5 %)

p = 8

2,126

2,126

0,110 1

0,110 1

p = 10

2,290

...

...

...

0,186 4

0,186 4

p = 11

2,355

2,355

0,221 3

0,221 3

Giá trị ngoại lệ (1 %)

p = 8

...

...

...

2,274

0,056 3

0,056 3

p = 10

2,482

2,482

0,115 0

0,115 0

p = 11

...

...

...

2,564

0,144 8

0,144 8

Phép thử Grubb kép cho thấy giá trị bất thường đối với mức C. Khi xem xét kỹ hơn, giá trị trung bình ô đối với phòng thử nghiệm số 11 thấp hơn nhiều so với các phòng thử nghiệm khác. Khi xem xét tính không ổn định của Erythrosin ở mức thấp, cặp kết quả thử nghiệm này đã bị loại bỏ.

Khi không có các kết quả thử nghiệm này, giá trị kép thấp của thống kê phép thử Grubb là 0,336 4 ở mức C, sau đó được so sánh với giá trị tới hạn của 9 phòng thử nghiệm (0,149 2 ở 5 %). Đã không xuất hiện giá trị bất thường và các kết quả được giữ lại.

E.2.10.5  Tính giá trị trung bình chung và độ lệch chuẩn

Tính giá trị trung bình chung (m) và độ lệch chuẩn (s_r và s_R) của hàm lượng Erythrosin trong mỗi mẫu cho các giá trị nêu trong Bảng E.60.

Bảng E.60 - Hàm lượng Erythrosin - Giá trị tính được của m, s_r, s_R

Thông số

...

...

...

mg/kg

A

B

C

D

E

Số lượng phòng thử nghiệm, p

8

11

...

...

...

10

8

Giá trị trung bình chung, m

0,372

7,37

1,89

3,68

0,761

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

...

...

...

0,157 2

0,088 7

0,148 9

0,015 6

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R

0,018 1

0,546 1

0,094 5

0,223 2

...

...

...

E.2.10.6  Sự phụ thuộc của độ chụm vào giá trị trung bình chung, m

Bảng E.60 cho thấy s_r và s_R có mối tương quan thuận chặt chẽ với m. Phép tính thực tế thể hiện mối tương quan tuyến tính giữa logs_r (hoặc logs_R) với logm, như sau:

logs_r = 0,973 4 logm - 1,501 4, R^2 = 0,905 3

logs_R = 1,2127 logm - 1,350 4, R^2 = 0,972 3

E.2.10.7  Giá trị cuối cùng của độ chụm

Độ chụm của phương pháp đo hàm lượng Erythrosin được đưa ra như sau:

- s_r = 0,032 m^0^,^97

- s_R = 0,045 m^1^,^21

E.3  Kết luận

...

...

...

Giá trị độ chụm cuối cùng do phép thống kê đưa ra có thể được sử dụng để xác định độ lệch chuẩn lặp lại và độ lệch chuẩn tái lập của phương pháp thử.

Giá trị độ chụm cuối cùng khẳng định rằng phương pháp thử được mô tả trong tiêu chuẩn này là đáng tin cậy, vì tính nhất quán tốt được thể hiện giữa các giá trị thử nghiệm được báo cáo từ tất cả các phòng thử nghiệm tham gia.

Thư mục tài liệu tham khảo

[1] TCVN 7925 (ISO 17604), Vi sinh vật trong chuỗi thực phẩm - Lấy mẫu thân thịt để phân tích vi sinh vật

[2] GB 5009-35:2016, National standard for food safety - Determination of synthetic colorants in foods

[3] Colours, synthetic, water-soluble. Semi-quantitative determination by chromatography and spectrophotometry. Nordic Committee on Food Analysis (NMKL), No. 134, 1990

[4] CI (Colour Index], Chemical Constitutions. 3rd Edition, Society of Dyers and Colourists (SDC) and American Association of Textile Chemists and Colourists [AATCC], 1971.

...

...

...

Lời nói đầu

1  Phạm vi áp dụng

2  Tài liệu viện dẫn

3  Thuật ngữ và định nghĩa

4  Nguyên tắc

4.1  Phương pháp sắc ký lớp mỏng

4.2  Phương pháp HPLC

5  Lấy mẫu

6  Chuẩn bị mẫu thử

...

...

...

7.1  Thuốc thử

7.2  Thiết bị, dụng cụ

7.3  Cách tiến hành

8  Phương pháp HPLC

8.1  Thuốc thử

8.2  Thiết bị, dụng cụ

8.3  Cách tiến hành

8.4  Tính kết quả

8.5  Độ chụm

...

...

...

9  Báo cáo thử nghiệm

Phụ lục A (tham khảo) Tên đồng danh và mã số phẩm màu tổng hợp, phẩm màu tan trong nước

Phụ lục B (tham khảo) Khả năng gây nhiễu bởi các phẩm màu

Phụ lục C (tham khảo) Phổ hấp thụ

Phụ lục D (tham khảo) Sắc ký đồ và bước sóng

Phụ lục E (tham khảo) Phép thử liên phòng thử nghiệm

Thư mục tài liệu tham khảo

1) AOAC 950.61 có mã số 46.1.08.