Tiêu chuẩn TCVN 12657:2019 về Định lượng nhanh nấm men và nấm mốc sử dụng đĩa đếm PetrifilmTM 3MTM

• Số hiệu: TCVN12657:2019
• Loại văn bản: Tiêu chuẩn Việt Nam
• Nơi ban hành: ***
• Người ký: ***
• Ngày ban hành: Năm 2019

Vùng phát triển là 30 cm^2. Các đĩa chứa nhiều hơn 150 khuẩn lạc có thể được định lượng hoặc được coi là quá nhiều không đếm được. Việc ước tính có thể được thực hiện bằng cách đếm số khuẩn lạc trong một hoặc nhiều diện tích đại diện và xác định số trung bình trên diện tích đó.

Các mẫu thực phẩm trong một số ít trường hợp có các yếu tố gây nhiễu khi sử dụng đĩa đếm Pertrifilm 3M RYM

- toàn bộ nền đĩa có màu xanh (thường gặp ở những sản phẩm dùng vi sinh vật trong quá trình sản xuất). Trường hợp này không thể coi là nhiều quá không đếm được.

- có số lượng đáng kể các chấm nhỏ màu xanh (thường gặp ở những sản phẩm có gia vị hoặc cấu trúc hạt).

- báo cáo kết quả là đơn vị khuẩn lạc tạo thành/gam (CFU/g).

Nếu cần, nhấc tấm film lên và lấy khuẩn lạc ra khỏi gel để tiến hành phân lập và nhận diện tiếp.

9  Tính và biểu thị kết quả

Số đếm trung bình (của các ô) nhân với 30 để thu được số đếm ước tính trên một đĩa. Nếu cần có số đếm chính xác hơn thì cần thử nghiệm tiếp trên các độ pha loãng cao hơn.

Để tính số lượng nấm men, nấm mốc nhân tổng số lượng khuẩn lạc có trong một đĩa (hoặc số lượng trung bình các khuẩn lạc trên một đĩa, nếu tại một độ pha loãng thực hiện đếm các đĩa kép) với số nghịch đảo của độ pha loãng tương ứng. Khi đếm các khuẩn lạc trên các đĩa kép của các độ pha loãng kế tiếp, tính số lượng trung bình các khuẩn lạc cho mỗi độ pha loãng trước khi xác định trung bình số đếm tổng vi khuẩn.

...

...

...

Nếu các đĩa đều có mật độ khuẩn lạc quá lớn để ước tính số đếm thì kết quả được báo cáo là “quá nhiều không đếm được”.

10  Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm ít nhất các thông tin dưới đây:

- mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử;

- viện dẫn tiêu chuẩn này hoặc phương pháp đã sử dụng;

- kết quả và đơn vị biểu thị kết quả;

- ngày tháng nhận mẫu phòng thử nghiệm;

- ngày tháng thử nghiệm;

- các điểm đặc biệt quan sát được trong quá trình thử nghiệm;

...

...

...

Phụ lục A

(Tham khảo)

Kết quả của phép thử liên phòng thử nghiệm

Các kết quả của phép thử liên phòng thử nghiệm nguyên liệu thịt bò xay đông lạnh được nêu trong Bảng A.1.

Bảng A.1 - Kết quả của phép thử liên phòng thử nghiệm nguyên liệu thịt bò xay thô đông lạnh sử dụng dĩa đếm RYM so với phương pháp trong TCVN 8275-1:2010 (ISO 21527-1:2008)

Mẫu

Phương pháp Petrifilm 3M RYM

Phương pháp FDA-BAM/ TCVN 8275-1:2010 (ISO 21527-1:2008) ^a

...

...

...

Chênh lệch trung bình

Chênh lệch trung bình nghịch đảo^e

Lô hàng

N^b

Trung bình^c

s_r

s_R

N

Trung bình

...

...

...

s_R

25 °C, 48 h

Kiểm soát

11(0)

<1,00

-

-

11(0)

<1,00

...

...

...

-

-

-

-

Thấp

11(0)

2,12

0,41

0,41

...

...

...

2,07

0,36

0,38

0,5323

0,05

14,34

Vừa phải

11(1)

3,52

...

...

...

0,10

11(0)

3,47

0,09

0,11

0,1637

0,05

360,10

Cao

...

...

...

4,65

0,13

0,14

11(0)

4,59

0,10

0,14

0,2266

0,06

...

...

...

25 °C, 60 h

Kiểm soát

11(0)

<1,00

-

-

11(0)

<1,00

-

...

...

...

-

-

-

Thấp

11(0)

2,14

0,36

0,37

11(1)

...

...

...

036

0,38

0,3773

0,07

20,55

Vừa phải

11(0)

3,52

0,10

...

...

...

11(0)

3,47

0,09

0,11

0,1573

0,05

360,10

Cao

11(0)

...

...

...

0,14

0,15

11(0)

4,59

0 10

0,14

0,1750

006

5763,84

...

...

...

Kiểm soát

11(0)

<1,00

11(0)

<1,00

...

...

...

Thấp

11(0)

2,17

0,29^f

0,30

11(1)

2,07

...

...

...

0,38

0,1391

0,10

3042

Vừa phải

11(0)

3,53

0,10

0,10

...

...

...

3,47

0,09

0,11

0,0824

0,06

437,23

Cao

11(0)

4,67

...

...

...

0,11

11(0)

4,59

0,10

0,14

0,0966

0,08

7869,00

28 °C, 60 h

...

...

...

11(0)

<1,00

11(0)

<1,00

...

...

...

Thấp

11(0)

2,16

0,29^f

0,29

11(1)

2,07

0,36

...

...

...

0,1843

0,09

27,05

Vừa phải

11(0)

3,53

0,09

0,10

11(0)

...

...

...

0,09

0,11

0,1095

0,06

437,23

Cao

11(2)

4,67

0,08^f

...

...

...

11(0)

4,59

0,10

0,14

0,1068

008

7869,00

^a Mẫu đã được phân tích theo sự thống nhất các phương pháp FDA-BAM chương 18 và TCVN 8275-1:2010 (ISO 21527-1:2008) sử dụng pepton 0,1 % làm mẫu pha loãng.

^b N = số phòng thử nghiệm có kết quả báo cáo đầy đủ. Ngoại lệ trong dấu ngoặc đơn.

...

...

...

^dChênh lệch đáng kể (p < 0,05).

^e Độ lệch trung bình, tính bằng CFU/g

^f Kết quả chỉ ra rằng phương pháp dự kiến được lặp lại nhiều hơn so với phương pháp chuẩn, s_r là độ lệch chuẩn lặp lại; s_R là độ lệch chuẩn tái lập.

Bảng A.2 - Kết quả của phép thử liên phòng thử nghiệm nguyên liệu cá hồi sử dụng đĩa đếm RYM so với phương pháp trong TCVN 8275-1:2010 (ISO 21527-1:2008)

Mẫu

Phương pháp Petrlfilm 3M RYM

Phương pháp FDA-BAM/ TCVN 8275-1:2010 (ISO 21527-1:2008) ^a

Giá trị P^d

Chênh lệch trung bình

...

...

...

Lô hàng

N^b

Trung bình^c

s_r

s_R

N

Trung bình^c

s_r

s_R

...

...

...

Kiểm soát

12(0)

<1,00

12(0)

<1,00

...

...

...

Thấp

14(0)

1,45

0,17^f

0,26

14(0)

1,55

...

...

...

0,34

0,4165

0,10

-7,30

Vừa phải

14(1)

2,12

0,26

0,39

...

...

...

2,21

0,20

0,24

0,3322

0,09

-30,36

Cao

14(2)

3,00

...

...

...

0,49

14(1)

3,08

0,12

0,31

0,2833

0,08

-202,26

25 °C, 60 h

...

...

...

12(0)

<1,00

12(0)

<1,00

...

...

...

Thấp

14(0)

1,53

0,23

0,28

14(0)

1,55

0,19

...

...

...

0,8391

0,02

-1,60

Vừa phải

14(0)

2,20

0,21

0,27

14(0)

...

...

...

0,20

0,24

0,7789

0,01

-3,69

Cao

14(2)

3,04

0,18

...

...

...

14(1)

3,08

0,12

0,31

0,5418

0,04

-105,79

28 °C, 48 h

Kiểm soát

...

...

...

<1,00

12(0)

<1,00

...

...

...

Thấp

14(0)

1,58

0,16^f

0,21

14(0)

1,55

0,19

0,34

...

...

...

0,03

2,54

Vừa phải

14(0)

2,17

0,17^f

0,29

14(0)

2,21

...

...

...

024

0,6139

0,04

-11,73

Cao

14(2)

3,01

0,17

0,45

...

...

...

3,08

0,12

0,31

0,3904

0,07

-178,97

28 °C, 60 h

Kiểm soát

12(0)

...

...

...

12(0)

<1,00

...

...

...

14(0)

1,60

0,17^f

0,20

14(0)

1,55

0,19

0,34

0,5474

...

...

...

4,33

Vừa phải

14(0)

2,21

0,17^f

0,23

14(0)

2,21

0,20

...

...

...

0,9483

0,00

0,00

Cao

14(2)

3,03

0,18

0,42

14(1)

...

...

...

0,12

0,31

0,4687

0,05

-130,75

^a Mẫu đã được phân tích theo sự thống nhất các phương pháp FDA-BAM chương 18 và TCVN 8275-1:2010 (ISO 21527-1:2008) sử dụng pepton 0,1 % làm mẫu pha loãng.

^b N = số phòng thử nghiệm có kết quả báo cáo đầy đủ. Ngoại lệ trong dấu ngoặc đơn.

^c Giá trị Log₁₀ nấm men và nấm mốc, tính bằng CFU/g.

^d Chênh lệch đáng kể (p < 0,05).

...

...

...

^f Kết quả chỉ ra rằng phương pháp dự kiến được lặp lại nhiều hơn so với phương pháp chuẩn, s_r là độ lệch chuẩn lặp lại; s_R là độ lệch chuẩn tái lập.

Thư mục tài liệu tham khảo

[1] TCVN 8275-1:2010 (ISO 21527-1:2008), Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi - Phương pháp định lượng nấm men và nấm mốc - Phần 1: Kỹ thuật đếm khuẩn lạc trong các sản phẩm có hoạt độ nước lớn hơn 0,95

[2] U.S. Food and Drug Administration (FDA), Bacteriological Analytical Manual (BAM), Chapter 18 Yeasts, Molds and Mycotoxins